卫巍
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 供职机构：同济大学附属第十人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- microRNAs在胰腺癌中的研究进展
- 2011年
- 胰腺癌是一种极具侵犯性的肿瘤，其病死率几乎同于发病率，西方世界研究表明，胰腺癌所致死亡在所有肿瘤相关死亡中占第四位。平均生存时间仅为6个月，五年生存率仅3％-5％左右，通过辅助治疗，平均生存期或可提高至20个月左右，而胰腺癌恶性程度高，早期易发生转移，
- 卫巍王兴鹏
- 关键词：MICRORNAS胰腺肿瘤
- 脑胶质瘤相关癌基因1对人胰腺癌PANC-1细胞增殖的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨脑胶质瘤相关癌基因1(glioma-associated oncogene1,GLI1)对人胰腺癌PANC-1细胞增殖的影响。方法:构建靶向GLI1基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)慢病毒重组载体pLVTHM-GLI1-shRNA(以空载体pLVTHM-GFP为对照),经包装后感染胰腺癌PANC-1细胞,应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞中GLI1、bcl-2、bcl-xl和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA和蛋白的表达;CCK8(cell counting kit-8)法分析各组细胞的生长情况。结果:成功构建了稳定低表达GLI1的GLI1-shRNA-PANC-1细胞,与PANC-1细胞和GFP-PANC-1细胞比较,GLI1-shRNA-PANC-1细胞中GLI1mRNA和蛋白表达水平分别下调了(82.1±3.2)和(76.7±2.2)(P<0.01),bcl-2mRNA和蛋白表达分别下调了(49.7±5.4)、(43.5±9.4)(P<0.01);而blc-xl和PCNAmRNA和蛋白表达水平无明显变化。GLI1-shRNA-PANC-1细胞的增殖抑制率明显高于GFP-PANC-1、PANC-1细胞(P<0.05)。结论:干扰GLI1基因的表达可抑制人胰腺癌PANC-1细胞的增殖,其机制可能与下调bcl-2的表达有关。
- 王锋徐凌郭传勇杨丽娟何姗姗徐选福黄银实卫巍戴维奇沈杰王兴鹏
- 关键词：胰腺肿瘤慢病毒属
- IRX1在胰腺癌中的表达及其启动子区甲基化状态
- 2011年
- 目的检测胰腺癌的易洛魁族同源盒基因（IRX1）的表达及其启动子区的甲基化状态，探讨两者间的相关性。方法采用实时PCR法检测12例胰腺癌组织及6株胰腺癌细胞株的IRX1mRNA表达。基因序列分析1RX1基因启动子区结构。应用甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza—dC）处理胰腺癌细胞，采用甲基化特异性PCR（MSP）、非甲基化特异性PCR（USP）及实时PCR检测处理前后IRX1启动子甲基化状态和IRX1mRNA表达。结果胰腺癌组织IRX1mRNA的表达量为0．31±0．11，显著低于癌旁正常胰腺组织的1．05±0．32（P〈0．01）。胰腺癌细胞AsPCI、BxPC3、Capan-2、PANCl、PaTu8988和SW1990的IRX1mRNA表达量分别为0．36±0．08、0．34±0．16、0．37±0．11、0．25±0．06、0．31±0．04、0．36±0．02，均显著低于人肾上皮293细胞的1．03±0．28（P〈0．05或〈0．01）。IRX1基因启动子区富含CpG岛。各胰腺癌细胞株IRX1基因启动子CpG岛对应位点均有甲基化，经5-Aza-dC处理后甲基化状态得以逆转，IRXmRNA的表达也得以恢复。结论胰腺癌的IRX1mRNA表达下降，与其IRX1基因启动子区CpG岛高甲基化状态相关。
- 卫巍徐凌王锋何珊珊杨丽娟郭传勇王兴鹏
- 关键词：胰腺肿瘤启动子甲基化
- 低氧对人肝癌HepG2细胞中HIF-1α及miR-210表达的影响被引量：7
- 2011年
- 目的:研究低氧对人肝癌细胞株HepG2细胞表达缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)及缺氧特异性微小RNA-210(microRNA-210,miR-210)的影响,探讨肿瘤细胞在低氧环境下miR-210表达的变化情况。方法:HepG2细胞经体外常规培养后,用体积分数为1%的氧气分别培养HepG2细胞6、12、18和24h。应用实时荧光定量RT-PCR(real-time quantitative reverse transcriptionPCR,qRT-PCR)和蛋白质印迹法分别检测细胞中HIF-1αmRNA和蛋白的表达变化,同时用茎环RT-PCR检测miR-210的表达变化,分析HIF-1α与miR-210的表达关系。染色质免疫共沉淀PCR(chromatin immunoprecitation PCR,ChIP-PCR)分析HIF-1α与miR-210启动子结合的可能性。结果:低氧培养6～12h,HIF-1αmRNA的表达量存在明显改变(P<0.05),而其蛋白的表达量从低氧培养开始直至24h均有明显变化(P<0.005);与此同时,miR-210的表达量在低氧培养6～18h时出现明显改变(P<0.01),且与HIF-1α蛋白表达存在明显的线性相关(R=0.795,P=0.037)。进一步的ChIP-PCR实验表明,HIF-1α在HepG2细胞内可与miR-210启动子区近转录区的低氧反应元件(hypoxia response element,HRE)结合,从而发挥转录调控作用。结论:适度的低氧环境可能影响miR-210表达,其机制可能是通过HIF-1α结合其启动子来调节实现的。
- 徐凌王锋卫巍戴维奇何珊珊王兴鹏郭传勇
- 关键词：低氧染色质免疫沉淀
- 白藜芦醇对肝癌细胞增殖和凋亡影响及其机制被引量：6
- 2012年
- 目的:研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对肝癌细胞LM3周期及凋亡的影响并探讨其可能的分子机制。方法:分别用50、100、150、200μmol/L浓度的Res作用LM3肝癌细胞24、48和72h,CCK-8测定Res对细胞的增殖作用;分别以相同剂量的DMSO及无处理的LM3细胞为随机和空白对照,观察150μmol/L Res作用72小时后对肿瘤细胞周期及凋亡的影响;Real time-PCR及Western blot分析Res对LM3细胞中Bak和Bcl-2 mRNA及蛋白表达的影响。结果:Res体外能明显抑制肝癌细胞LM3的生长增殖,在一定范围内呈现作用浓度(F=101.183,P<0.001)和时间依赖性(F=192.371,P<0.001);150μmol/L Res作用72小时后能显著减缓肝癌细胞LM3的周期转换(P<0.001),并诱导明显的细胞凋亡效应(P<0.001);进一步的检测发现Res作用LM3细胞后,Bak mRNA(P=0.002,0.007)及蛋白(P=0.004,0.01)表达增强,而Bcl-2 mRNA(P=0.027,0.007)及蛋白(P=0.001,0.001)表达出现显著下降。结论:Res可能通过对Bak及Bcl-2表达的调节来抑制肝癌细胞LM3的增殖,并诱导其细胞凋亡。
- 戴维奇徐凌王锋卫巍沈杰黄银实杨丽娟何姗姗郭传勇
- 关键词：肿瘤周期BCL-2BAK
