包大士
- 作品数：10 被引量：28H指数：4
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省卫生厅重大科研项目江苏省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组腺病毒载体介导血管抑素基因治疗大鼠脑胶质瘤的实验研究
- 目的：构建重组缺陷型腺病毒血管抑素基因（angiostatin）载 体，进行血管抑制基因治疗脑胶质瘤的体内及体外的实验研究。方 法：RT-PCR法克隆血管抑素基因，同源重组共转染293细胞构建携 带血管抑素基因的腺病毒载...
- 包大士
- 关键词：血管抑素基因治疗腺病毒载体C6胶质瘤
- 文献传递
- 重组腺病毒介导P21^(WAF1/CIP1)过量表达治疗人脑胶质瘤的实验研究被引量：4
- 2002年
- 目的 研究基因转移P2 1WAF1 CIP1 过量表达对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响和治疗作用。方法 本文构建缺陷型重组腺病毒载体 :在CMV启动子控制下的人P2 1cDNA (Ad P2 1) ,其编码人P2 1蛋白。通过流式细胞仪、RT PCR进行P2 1表达检测 ;应用TUNEL法、免疫组化、荧光显微镜和流式细胞仪进行相关凋亡检测、分析。结果 RT PCR检测五株亲本胶质瘤细胞表达P2 1WAF1 CIP1 cDNA ,而流式细胞仪未检测到P2 1表达 ;Ad P2 1转导的胶质瘤细胞株均过量表达P2 1;在体内外Ad P2 1能诱导胶质细胞瘤向终末分化、凋亡或诱导炎症反应抑制肿瘤生长或消退。结论 基因转移P2 1WAF1 CIP1 为研究基因治疗恶性脑胶质瘤提供了有效的手段。
- 王文宏惠国桢马文雄包大士李向东陈桂林
- 关键词：重组腺病毒P21^WAF1/CIP1脑胶质瘤
- 器官移植用转基因动物模型研究
- 郭礼和夏国宏邢力费俭周筱刚马映华白旭芳包大士
- 该项研究为了解决移植手术中供体器官不足的问题，通过遗传杂交建立了含FasL和反义α(1,3)GT双基因的转基因鼠。克隆了猪α(1,3)GT cDNA,利用逆转录病毒和腺病毒载体介导它的反义cDNA,分别转染 COS、NI...
- 关键词：
- 关键词：异种移植转基因动物动物模型
- Fas L转基因神经细胞异种移植治疗癫痫被引量：2
- 2005年
- 目的以Fas配体转基因小鼠的胚胎海马神经细胞作为供体,异种移植治疗大鼠癫痫模型,研究Fas-配体表达对异种神经组织移植免疫排斥反应的影响。方法脑室注射海人酸损伤海马 CA3区建立癫痫模型。转基因小鼠胚胎15d的海马组织移植到癫痫大鼠的双侧海马区。大鼠-大鼠同种移植组和野生型小鼠-大鼠异种移植组及生理盐水移植组作为对照。在移植后8周进行三等分臂迷宫和跳台实验检测癫痫模型的行为改善情况。结果 RT-PCR检测移植的神经细胞中有人Fas 配体的表达。转基因移植组与移植前相比有显著地改善(P<0．01),异种移植及生理盐水组行为学无改善,转基因移植组与异种移植及生理盐水组相比有显著地改善(P<0．01),但没有同种移植恢复的效果好。结论 Fas配体的表达可以抑制或延缓宿主脑内对异种神经细胞的排斥反应。
- 杨立业包大士刘相名赵文娟惠国桢郭礼和
- 关键词：FAS配体癫痫
- 重组腺病毒载体介导血管抑素基因治疗大鼠脑胶质瘤的实验研究被引量：4
- 2001年
- 目的 研究以重组缺陷型腺病毒为载体的血管抑素基因治疗脑胶质瘤。方法 RT PCR法克隆angiostatin基因 ,构建携带血管抑素 (angiostatin)基因的重组腺病毒载体 ,体外检测angio statin的重组腺病毒载体对内皮细胞生长的抑制作用。建立皮下及脑胶质瘤大鼠模型 ,给予体内基因治疗。结果 克隆得到约 1 1Kb的angiostatin基因。构建重组腺病毒载体AdhCMV AGS ,体外试验表明 ,可以强烈抑制内皮细胞的生长。体内试验表明重组腺病毒可以在体内有效表达Angiostatin ,并且有效抑制胶质瘤的生长 ,使荷脑胶质瘤大鼠存活 90天以上。结论 以重组腺病毒为载体的血管抑素基因治疗脑胶质瘤效果显著 。
- 包大士惠国桢殷国勇杨立业王文宏费俭郭礼和
- 关键词：血管抑素基因治疗腺病毒载体脑胶质瘤血管生成
- 神经干细胞体外长期培养和外源基因表达被引量：8
- 2002年
- 目的 探讨胚胎大鼠神经干细胞的体外培养条件及外源基因的表达效率。方法 从胚胎大鼠脑皮质中机械分离细胞,应用N2培养基进行培养和扩增,采用免疫组织化学方法进行鉴定,应用Ad5βgal重组腺病毒载体检测神经干细胞表达外源基因的能力。结果 从胚胎大鼠的大脑皮质中成功分离培养出神经干细胞,在悬浮状态下培养形成典型的神经球并表达波形蛋白和巢蛋白。近100％的细胞可被Ad5βgal基因感染并表达lacZ基因。细胞可用机械方法传代,常规冻融和复苏,体外长期培养可达3个月。结论 神经干细胞可在体外长期稳定培养和传代,能表达βgal外源基因,是细胞治疗和基因治疗的良好载体。
- 杨立业惠国桢包大士蒋丽珍费俭郭礼和
- 关键词：神经干细胞外源基因体外培养细胞治疗
- 基因转移FasL诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的体外实验研究被引量：5
- 2002年
- 目的 探讨体外基因转移Fas配体 (Fas Ligand ,FasL)对恶性人脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法 用携带人FasLcDNA的缺陷型重组腺病毒载体 (Ad FL) ,在体外转导 5株人脑胶质瘤细胞 ,并使其表达 ;通过流式细胞仪、RT PCR、TUNEL法及荧光显微镜分别进行Fas/FasL表达检测和相关凋亡检测、分析。结果 RT PCR和流式细胞仪检测 5株胶质瘤细胞表面均表达Fas ,不表达FasL ,而Ad FL转导的 5株胶质瘤细胞均能表达FasL ,Fas表达水平与抗Fas抗体诱导胶质瘤细胞凋亡敏感性无相关性。Ad FL能显著诱导 5株胶质细胞瘤在体外凋亡或抑制其生长。
- 王文宏惠国桢马文雄陈桂林包大士李向东张世明
- 关键词：重组腺病毒基因转移FASL脑胶质瘤细胞凋亡体外实验研究
- 重组腺病毒载体介导FasL治疗人脑胶质瘤实验研究被引量：3
- 2004年
- 目的:研究以重组缺陷型腺病毒为载体的Fas配体(Fas-Ligand,FasL)基因治疗人脑胶质瘤。方法:用RT-PCR方法构建携带人FasL cDNA的缺陷型重组腺病毒载体(Ad-FL),在体外转导5株人脑胶质瘤细胞;体外检测Ad-FL对人脑胶质瘤细胞生长的影响;建立裸鼠皮下人胶质瘤模型,给予体内治疗。结果:体外实验证实Ad-FL能显著诱导5株胶质细胞瘤在体外凋亡或抑制其生长;体内试验表明重组腺病毒可以在体内有效表达FasL,且能有效通过诱导凋亡和/或炎症反应抑制U251胶质瘤的生长,使荷瘤鼠存活90天以上,而Ad-LacZ和对照组分别为(19.6±2.4)天和(15.8±1.9)天(P<0.01)。结论:以重组腺病毒为载体的FasL基因治疗脑胶质瘤效果显著,将是一种基因治疗脑胶质瘤的新手段。
- 王文宏惠国桢马文雄包大士陈桂林李向东
- 关键词：FAS配体胶质瘤基因转移重组腺病毒
- Fas L转基因神经细胞异种移植治疗癫痫
- 本文介绍了Fas L转基因神经细胞异种移植治疗癫痫的研究，成功建立起过表达人FasL的转基因小鼠,进行了FasL转基因鼠的异种神经组织移植研究。
- 杨立业包大士刘相名惠国桢赵文娟郭礼和
- 关键词：癫痫神经移植异种移植转基因
- 文献传递
- 小鼠胚胎神经干细胞的长期培养和分化被引量：3
- 2002年
- 目的 探索小鼠胚胎神经干细胞的体外培养和分化条件 ,为神经干细胞的深入研究奠定基础。 方法 无菌条件下分离小鼠胚胎脑皮质 ,制成单细胞悬液 ,种植在N2培养基中培养 ,培养基中加入 2 0ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子 (每次实验用 1～ 2只小鼠胚胎 ,实验重复 8次 )。采用机械方法传代 ,常规方法冻存和复苏。用免疫细胞化学方法对培养的细胞进行鉴定。 结果 成功培养出小鼠的神经干细胞 ,神经干细胞呈悬浮状态生长 ,形成典型的神经球。细胞表达巢蛋白和波形蛋白 2种神经干细胞的标志物。细胞在胎牛血清的诱导下 ,可分化成神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞 ,它们所占的比例分别为 7%、85 %～ 90 %和 2 %～ 4 %。 结论 小鼠的神经干细胞可以在体外稳定地培养和传代 ,为细胞治疗提供了一个理想的细胞来源。
- 杨立业惠国桢包大士蒋丽珍费俭郭礼和
- 关键词：胚胎神经干细胞体外培养细胞分化
