刘薇
- 作品数：12 被引量：29H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：经济管理农业科学生物学更多>>
- 奶牛RORα基因的生物信息学分析与组织表达谱检测
- 2023年
- 本研究旨在克隆奶牛(Bos taurus)维甲酸相关孤儿受体α(retinoic acid-related orphan receptor alpha,RORα)的蛋白编码序列(coding sequence,CDS),预测分析其结构与功能特征并验证其真核表达载体在HEK293T细胞中的过表达效果,进一步检测RORα基因在奶牛不同组织的表达谱。本研究提取了奶牛肝脏组织的总RNA,反转录得到cDNA,经过PCR扩增后获得奶牛RORα基因的CDS区片段,随后将其与pcDNA3.1-Puro-N-3HA线性化载体进行同源重组连接。转化感受态细胞DH5α后,对初步鉴定为阳性克隆的重组质粒进行测序。结合测序结果,利用ExPASy、Protscale和DNAstar等生物信息学软件,对奶牛RORα蛋白的理化性质和功能特性进行预测分析。将对照组空质粒pcDNA3.1-Puro-N-3HA和试验组重组质粒pcDNA-3.1-3HA-RORα分别转染至HEK293T细胞,借助实时定量PCR和蛋白质印迹法检测奶牛RORα基因的过表达效果。借助半定量RT-PCR技术检测奶牛RORα基因在肝脏、脾脏和肌肉等7个组织的相对表达量。PCR结果显示,成功克隆了奶牛RORα基因的CDS区片段;酶切及测序结果表明重组质粒pcDNA3.1-3HA-RORα构建成功;生物信息学软件预测分析结果表明,奶牛RORα蛋白三级结构与山羊(Capra hircus)、小鼠(Mus musculus)的高度相似;不同物种间同源性比对显示,奶牛RORα基因与山羊的相似性最高;实时定量PCR和蛋白印迹法结果表明,与对照组相比,试验组HEK293T细胞中奶牛RORα基因的mRNA和蛋白表达水平均显著升高;半定量RT-PCR结果表明,在所检测的7个组织中,奶牛RORα基因在肝脏表达量最高,在脾脏表达量最低。本研究成功克隆了奶牛RORα基因的CDS区片段,在HEK293T细胞中验证了其真核表达载体在mRNA和蛋白水平的表达效果,并分析了其结构与功能特征,检测了其在不同组织的表达谱,为深入探究其在奶牛生殖与代谢调控中的作用机制提供了前期基础。
- 刘薇刘薇王逢博王博杨王浩张粉丽高登科张海森李超靳亚平李超
- 关键词：奶牛表达谱生物钟生物信息学分析
- 牛RORα基因的克隆、真核表达载体的构建及其应用
- 本发明公开了牛RORα基因的克隆、真核表达载体的构建及其应用，属于基因的克隆、真核表达载体的构建技术领域，本发明提供的牛RORα基因的克隆、真核表达载体的构建及其应用，成功构建了牛RORα基因的真核表达载体，补充了牛RO...
- 陈华涛秦新喜刘薇靳亚平王逢博杨王浩赵泓淙张粉丽
- 一种基于荧光素酶报告基因系统鉴定circSMARCA5的方法
- 本发明公开了一种基于荧光素酶报告基因系统鉴定circSMARCA5的方法，属于基因工程技术领域。本发明公开的一种基于荧光素酶报告基因系统鉴定circSMARCA5的方法，利用pGL4‑circSMARCA5‑Luc‑CM...
- 陈华涛高登科靳亚平王爱华刘薇刘田马白荣
- 上市公司盈余管理与会计监管的博弈思考被引量：1
- 2005年
- 张琴杨军芳刘薇
- 关键词：盈余管理博弈行为会计监管上市公司市场价值最大化对外财务报告
- 陕西中部小麦条锈菌传播规律及其菌源的分子证据
- 小麦条锈菌,即条形柄锈菌小麦转化型(Puccinia striiformis West.f.sp.tritici Erikss.&Henn.),是危害小麦及部分禾本科作物的重要真菌。小麦条锈菌的夏孢子可以依靠气流远距离传...
- 刘薇
- 关键词：小麦条锈病基因分型基因流菌源
- 奶牛生物钟基因CLOCK的真核表达载体构建、生物信息学分析及其组织表达谱
- 2023年
- 旨在克隆奶牛昼夜运动输出周期(circadian locomotor output cycles kaput,CLOCK)基因的蛋白编码区序列(coding sequence,CDS),构建该基因的真核表达载体,检测CLOCK基因在奶牛不同组织的相对表达丰度,并预测分析奶牛CLOCK蛋白的高级结构、理化性质及其功能特征。以奶牛肝脏组织cDNA为模板,通过PCR扩增奶牛CLOCK基因CDS区片段,利用同源重组法将其连接至pcDNA3.1-Puro-N-3HA载体;经酶切与测序鉴定后,将鉴定正确的质粒命名为pcDNA3.1-Puro-N-3HA-bCLOCK;将pcDNA3.1-Puro-N-3HA空质粒和pcDNA3.1-Puro-N-3HA-bCLOCK重组质粒分别转染至HEK293T细胞,通过蛋白质免疫印迹(Western blot)检测CLOCK蛋白的过表达效率;提取奶牛的心、肝、脾、肺等10个组织的总RNA并反转录为cDNA,以此为模板通过实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)检测CLOCK基因在奶牛不同组织的表达变化;同时,利用生物信息学软件对奶牛CLOCK基因及其编码蛋白进行功能预测分析。琼脂糖凝胶电泳结果显示,成功克隆了奶牛CLOCK基因全长CDS区片段。酶切与测序结果显示,pcDNA3.1-Puro-N-3HA-bCLOCK真核表达载体构建成功。Western blot结果表明,该真核表达载体在HEK293T细胞中成功表达HA-CLOCK融合蛋白。qPCR结果表明,CLOCK基因在心、肝、脾、肺等10个组织中均有表达,其中在心脏表达最高,在小肠表达最低。生物信息学分析结果表明,奶牛CLOCK基因的CDS区与绵羊、山羊、骆驼的相似性较高;奶牛CLOCK蛋白由845个氨基酸组成,分子质量为95.12 kDa,无跨膜结构域与信号肽,为亲水性蛋白,二级结构中富含α-螺旋;奶牛CLOCK蛋白的三级结构与绵羊、人和小鼠的差异极小。结论:本研究成功克隆了奶牛CLOCK基因全长CDS区片段并构建了其真核表达载体,qPCR检测CLOCK基因在奶牛不同组织的表达谱,通过生物信息学预测分析CLOCK蛋白的结构与功能特性,为进一步探究奶牛CLOCK基因的生物学功能提�
- 杨王浩王博刘薇刘薇董浩张粉丽张粉丽李超李超刘祖培靳亚平陈华涛
- 关键词：奶牛真核表达载体生物信息学分析
- 杨凌示范区农业标准化问题研究
- 目前，我国农业发展面临着资源、需求和环境约束。一方面，农产品供给已由短缺转向总量基本平衡，特别是在我国加入WTO后，农产品面临着激烈的国际市场竞争，市场需求对农业发展的约束力越来越大;另一方面，随着化肥、农药的大量使用，...
- 刘薇
- 关键词：农业发展农产品保护生态环境产品质量国际竞争力
- 文献传递
- 论农业标准化推广模式与农民合作经济组织的培育被引量：9
- 2005年
- 农业标准化是增强我国农产品国际竞争力,保障人民身体健康,促进农业可持续发展的重要途径。在标准化的过程中,目前的推广模式主要以政府和企业为主,农民合作经济组织发展极为滞后,影响到了农业标准化的进程和农民的生产积极性。本文旨在对各种标准化推广模式进行介绍,分析农民合作经济组织在标准化中的联结和纽带作用,提出加快培育农民合作经济组织的策略以促进农业标准化的发展。
- 刘薇张琴刘钊
- 关键词：农业标准化合作经济组织
- 从农民合作经济组织培育的角度审视农业标准化推广模式被引量：15
- 2006年
- 农业标准化对于增强我国农产品的国际竞争力,保障人民身体健康,促进农业可持续发展起着重要作用。目前,我国农业标准的推广仍主要以政府和龙头企业带动为主,农民合作经济组织发展极为滞后,因而影响到了农业标准化的进程和农民的生产积极性。本文站在农民合作经济组织的角度,重新审视农业标准化推广模式,强调了合作经济组织的桥梁和纽带作用,提出加快培育农民合作经济组织的策略,以促进农业标准化的发展。
- 刘薇张琴刘钊
- 关键词：农业标准化合作经济组织
- 杨凌农业高新技术产业示范区农业标准化推广现状调查及分析被引量：6
- 2005年
- 调查分析陕西省杨凌地区农业标准化过程中农户的认识及行为,以找准农户采用农业标准的主要制约因素。并在此基础上,提出了进一步推广农业标准化的思路。
- 刘薇侯军岐张琴
- 关键词：农业标准化农户行为实证研究
