刘积凤
- 作品数：59 被引量：135H指数：7
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：国家绒毛用羊产业技术体系建设专项国家自然科学基金山东省农业良种工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 一对特异识别绵羊DKK1基因的sgRNA及其编码DNA和应用
- 本发明公开了一对特异识别绵羊DKK1基因的sgRNA及其编码DNA和应用，该sgRNA对由sgRNA-F和sgRNA-R组成，sgRNA-F和sgRNA-R分别由101个核苷酸组成，其中5’末端20nt的RNA片段能识别...
- 赵金山李和刚柳楠刘积凤程明
- 文献传递
- 利用同源重组技术构建DKK1、BMP4真核表达载体及共转染成纤维细胞表达的研究被引量：5
- 2018年
- 为了构建敖汉细毛羊DKK1、BMP4基因真核表达载体及单、共转染成纤维细胞后研究两基因表达量之间的变化,以敖汉细毛羊为研究对象,采集40日龄的胎羊。首先,通过RNA的提取反转录成c DNA参照Gen Bank中DKK1、BMP4基因序列信息分别设计1对含有同源臂的引物,通过PCR反应扩增获得DKK1、BMP4基因片段、利用So So试剂盒将目的片段连接到pcDNA3. 1真核表达载体上。鉴定正确后的pcDNA3. 1-DKK1、pcDNA3. 1-BMP4重组质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞;其次对敖汉细毛羊的成纤维细胞进行分离培养,并将构建的pcDNA3. 1-DKK1、pcDNA3. 1-BMP4单、共转染成纤维细胞,利用荧光定量PCR技术和Western Blot技术检测DKK1、BMP4基因单转染和共转染在成纤维细胞中表达量的变化。结果显示,经酶切、测序鉴定pcDNA3. 1-DKK1、pcDNA3. 1-BMP4构建成功,成纤维细胞原代、传代培养良好,转染后细胞生长良好,经实时荧光定量PCR技术和Western Blot检测DKK1基因共转染成纤维细胞较单转染的表达量极显著下降(P <0. 01),BMP4基因的共转染较单转染表达量没有发生明显变化。成功构建了敖汉细毛羊DKK1、BMP4基因的真核表达载体,并且成功共转染成纤维细胞,DKK1基因的表达量明显下降,BMP4基因的表达量没发生明显变化,因而,推断BMP4基因抑制了DKK1基因的表达,DKK1基因对BMP4基因作用不明显,结果可为进一步研究其功能奠定基础。
- 张梦瑶杨峰刘开东刘积凤贺建宁柳楠
- 关键词：同源重组成纤维细胞WESTERNBLOT
- GnRHR基因多态性与崂山奶山羊产羔数的关联分析被引量：2
- 2014年
- 研究旨在阐明GnRHR基因的多态性与崂山奶山羊产羔数的关系。设计7对引物,采用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术检测GnRHR基因在不同产羔数崂山奶山羊的单核苷酸多态性,并分析其与产羔数的关系。结果显示:该基因存在2个多态位点,A261G突变对于初产母羊GA型产羔数比AA型多0.06只,比GG型多0.04只,差异不显著(P>0.05);对于经产母羊GA型产羔数比AA型多0.35只,比GG型多0.45只,差异显著(P<0.05)。G55A位点共检测到GG和GA两种基因型,其中对于初产母羊GG型比GA型产羔数多0.13只,经产母羊GG型比GA型产羔数多0.19只,但差异均不显著(P>0.05)。因此,GnRHR基因A261G突变位点可能是影响崂山奶山羊产羔性能的一个潜在的有效分子标记。
- 马晓丽程明刘开东贺建宁刘积凤柳楠
- 关键词：崂山奶山羊产羔数
- Eph家族在哺乳动物皮肤毛囊中的研究进展被引量：2
- 2015年
- Eph家族蛋白包括Eph受体和Ephrin配体,是已知的蛋白酪氨酸激酶家族中最大的成员,而哺乳动物的毛囊是皮肤的重要附属结构,是产生被毛的组织,它的性状和组织结构决定着动物被毛的品质和产量。近年来的研究显示,Eph家族在哺乳动物皮肤毛囊的发育中具有十分重要的作用,可能参与毛囊的形成过程,对Ehp家族在哺乳动物毛囊中的表达及作用的深入研究可以指导毛用动物的选育进程,故该蛋白家族的相关领域研究日益受到重视。本文对Eph家族蛋白的分类及结构特点、Eph-Ephrin系统的信号传导和生物功能等相关领域的研究进展进行了简要综述,并对Eph家族在毛囊的形成过程及育种工作中的潜在价值和未来的研究方向进行了探讨和展望,以期为相关研究提供参考。
- 王春亮贺建宁程明刘开东刘积凤柳楠
- 关键词：EPH受体信号通路毛囊
- 3个不同品种羊Ⅰ型内根鞘角蛋白基因的差异表达被引量：3
- 2012年
- 探讨了敖汉细毛羊、小尾寒羊和莱芜黑山羊3个不同品种毛囊生长期与毛囊发育有关的特异基因表达模式。采用基因表达谱芯片技术对上述3个品种羊毛生长期颈部、腹股沟部的Ⅰ型内根鞘角蛋白基因表达进行检测,通过实时定量PCR技术对差异基因进行验证。结果:Ⅰ型内根鞘角蛋白基因家族KRT25、KRT26、KRT27和KRT28在颈部的表达量无品种间显著变化(差异倍数小于2);而在腹股沟部的表达量在品种间差异极显著(差异倍数大于2,P<0.01)。实时定量PCR所得结果与基因芯片结果基本吻合。结果表明:Ⅰ型内根鞘角蛋白基因家族在不同品种羊中的表达量与特异部位毛囊分布密度有着重要的关系。
- 柳楠余娟娟赵金山刘开东曲绪仙刘积凤
- 关键词：毛囊
- 一对特异识别绵羊MMP2基因的多肽及其编码基因和应用
- 本发明公开了一对特异识别绵羊MMP2基因的多肽，其由多肽甲和多肽乙组成；所述多肽甲由16个TAL核酸识别单元组成，每个TAL核酸识别单元中具有一个双连氨基酸；所述多肽乙由16个TAL核酸识别单元组成，每个TAL核酸识别单...
- 赵金山李和刚刘开东程明柳楠刘积凤江科孙友德王建华汪文鑫
- 一对靶向绵羊DKK2基因的sgRNA
- 本发明公开了一对靶向绵羊DKK2基因的sgRNA，该sgRNA对由sgRNA-F和sgRNA-R组成，sgRNA-F和sgRNA-R分别由101个核苷酸组成，其中5’末端20nt的RNA片段能识别绵羊染色体上DKK2基因...
- 赵金山李和刚柳楠程明刘开东刘积凤
- 文献传递
- 动物育种规划最优化研究进展被引量：11
- 1999年
- 围绕动物育种规划最优化研究进展加以综述，在回顾动物育种规划最优化方法发展过程的基础上，重点介绍了动物育种目标、杂交繁育体系的优化问题和ＭＯＥＴ核心群育种规划研究３ 个方面的内容。
- 柳楠刘积凤孙宏艳
- 关键词：动物育种规划遗传学
- EphA2及EphrinA2在敖汉细毛羊皮肤中的表达及分布规律研究被引量：1
- 2016年
- 本文旨在探究EphA2及其配体EphrinA2基因在细毛羊毛囊发生、发育过程中的表达与分布规律,为毛囊发育的分子调控机制提供理论基础。试验以敖汉细毛羊生长发育不同时期体侧部皮肤为材料,采用实时荧光定量PCR和免疫组化技术,对EphA2和EphrinA2基因的mRNA和蛋白水平在皮肤毛囊中的表达规律进行研究。实时荧光定量PCR结果显示:EphA2和EphrinA2基因的表达量在胎龄120d时显著高于胎龄90d和出生后1d(P<0.01);出生后1和30d时差异不显著(P>0.05)。免疫组化结果表明:EphA2及EphrinA2蛋白在胎龄90和120d、出生后1和30d,4个时期的细毛羊体侧皮肤毛囊发育过程中,主要在毛囊、毛母质、外根鞘和表皮中表达,且呈现一定的特异性表达。综上结果表明,EphA2及EphrinA2与细毛羊皮肤毛囊形态发生、发育过程密切相关,可为相关研究提供借鉴。
- 贺建宁王春亮赵金山程明刘开东刘积凤柳楠
- 关键词：EPHA2
- 敖汉细毛羊毛囊FGF10、FGF18和FGFR3基因差异表达的研究被引量：6
- 2015年
- 本研究旨在解析FGF家族及其受体基因在细毛羊不同部位皮肤、不同时间mRNA和蛋白的表达及与细毛羊毛囊生长发育的关系,为揭示毛囊生长发育的分子机制奠定理论基础。首先通过基因芯片技术,筛选敖汉细毛羊毛囊发育的差异表达基因,并通过qRT-PCR对基因芯片结果的准确性进行验证。之后对得到的差异表达基因作进一步分析,可知FGFs家族在颈部和腹部,羊毛毛囊的生长旺盛期和缓慢期之间的mRNA表达量存在差异的有FGF10、FGF18和FGFR3基因。最后通过二维凝胶电泳(2-DE)和质谱技术(MS),对毛囊发育的差异表达蛋白进行筛选,得出FGFs家族蛋白质在颈部和腹部、羊毛毛囊的生长期和缓慢期之间仍存在差异表达的有FGF10、FGF18和FGFR3蛋白。结果显示,FGF10mRNA在腹部表达量高于颈部,推测可能对毛囊的发育具有负调控作用;其蛋白表达量颈部均高于腹部,推测可能促进毛囊生长发育。FGF18在腹部其mRNA表达量旺盛期高于缓慢期,推测其可能维持此处毛囊的不活跃状态;其蛋白在颈部表达量均低于腹部,推测可能对毛囊的生长具有抑制作用。FGFR3mRNA和蛋白表达水平无统一趋势,可能与毛囊的生长发育存在较复杂的关系。综合以上,FGF10、FGF18和FGFR3mRNA和蛋白水平在毛囊生长发育的不同部位和不同时期存在差异表达,这提示它们可能与毛囊的生长发育具有一定的关系,并在不同水平发挥调控作用。研究结果为解析FGFs家族成员调控毛囊生长发育的分子机制奠定理论基础,为进一步加快细毛羊育种提供重要候选基因。
- 柳楠刘鲁梅程明刘开东于维敏刘积凤赵金山贺建宁
- 关键词：毛囊敖汉细毛羊
