刘磊
- 作品数：22 被引量：69H指数：5
- 供职机构：国家海洋环境监测中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海洋公益性行业科研专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：环境科学与工程医药卫生生物学天文地球更多>>
- 快速检测滴滴涕代谢物的免疫胶体金试纸条以及其制法
- 本发明涉及检测有机氯农药滴滴涕(1，1，1-trichloro-2，2-bis-p-chlorophenyl-ethane，DDT)代谢物的检测器具。一种快速检测DDT代谢物的免疫胶体金试纸条，包括样本垫、胶金垫、赛多利...
- 刘仁沿梁玉波刘磊许道艳
- 文献传递
- 北黄海慢原甲藻形态结构与腹泻性贝类毒素组成被引量：4
- 2018年
- 慢原甲藻鉴定的报道不仅少见也存在分歧,其产毒特征也因不同地理种而存在差异,形态学和分子生物学应用与毒素分析相结合进行分析的报道更是少见。本研究对采集自温带的中国北黄海海域的疑似慢原甲藻株系,利用光学显微镜(LM)、荧光显微镜(FM)和扫描电子显微镜(SEM),对其形态学进行仔细观察;经核糖体18S rRNA序列分析,建立该株系的系统发生树,判定该藻株与其他藻株的亲缘关系;通过液相色谱质谱联用法(LC-MS/MS)检测该藻株产生毒素的主要成分。观察发现该慢原甲藻长为(33.20±1.25)μm,宽为(24.50±1.39)μm;与墨西哥原甲藻相比,细胞表面分布有整齐排列的刺胞孔,无更小的拟孔。18S rRNA序列分析结果表明此株藻与P.rhathymum(EU287487)和P.tsawwassenense(EF657885)遗传相似性最高,因此判定此藻为慢原甲藻。LC-MS/MS检测发现了其可产生疑似DTX1(Dinophysis toxin 1)的衍生物。本研究将为进一步了解慢原甲藻的地理分布和分类地位以及毒素特征提供参考。
- 勾玉晓刘磊李冬梅梁玉波
- 关键词：北黄海系统进化树
- 麻痹性贝毒单克隆抗体的制备和酶联免疫检测方法的建立被引量：8
- 2013年
- 目的:利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备麻痹性贝毒(PSP)的单克隆抗体,以便建立快速、灵敏、有效的毒素检测方法。方法:采用甲醛法将半抗原石房蛤毒素(STX)与血蓝蛋白(KLH)偶联制备成完全抗原STX-KLH,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,HAT选择培养杂交瘤细胞,利用ELISA方法筛选出分泌抗STX-McAB的杂交瘤细胞株,并通过小鼠体内诱生腹水的方法获得单克隆抗体。结果:共获得4株能稳定分泌麻痹性贝毒抗体的阳性细胞株,建立了分析检测麻痹性贝毒的间接竞争酶联免疫方法。对PSP中STX组分的检出限为20 ng/ml,IC50为220 ng/ml;对GTX2/3的检出限为10 ng/ml,IC50为50 ng/ml。结论:所制备抗体具有高特异性和灵敏性,可用于研制高质量的国产快速检测麻痹性贝毒ELISA试剂盒。
- 许道艳刘磊刘仁沿梁玉波
- 关键词：麻痹性贝毒单克隆抗体酶联免疫吸附分析
- 滴滴涕代谢物DDA单克隆抗体的制备及其酶联免疫检测方法的建立被引量：3
- 2014年
- 为建立一种快速检测生物体中有机氯农药滴滴涕(DDT)代谢物DDA的酶联免疫检测(Enzyme-linked immunosorbant assay,ELISA)方法,利用碳二亚胺(EDC)法将DDT代谢产物半抗原DDA(2,2-双(4-氯苯基)乙酸)与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,分别作为免疫抗原和包被抗原.采用杂交瘤技术制备特异性抗DDA单克隆抗体,同时建立DDA间接竞争ELISA检测方法,并应用到海产贝类DDA的检测分析中.结果显示,本研究制备抗体所建立的ELISA方法在优化条件下对DDA的半抑制浓度IC50和检测限(Limit of Detection,LOD)分别为110 ng/mL和7.5ng/g,具有高灵敏度.该抗体同DDT其他几种同系物的交叉反应率都较低,只对DDA具有较强的特异性.本研究所制备抗体能够满足海产贝类DDT代谢物DDA的检测.
- 刘磊刘仁沿许道艳江天久梁玉波
- 关键词：DDADDT单克隆抗体海产贝类ELISA
- 免疫亲和色谱分离纯化PSP贝毒GTX23,的研究被引量：3
- 2011年
- 目的:分离纯化有毒塔玛亚历山大藻中麻痹性贝毒GTX2,3组分。方法:采用免疫亲和色谱方法,对有毒塔玛亚历山大藻中麻痹性贝类毒素进行分离纯化。结果:通过HPLC检测,免疫亲和柱有效的将麻痹性贝毒的GTX2,3与GTX14,分离,获得了一定数量但具有高纯度的麻痹性贝毒GTX23,。结论:初步建立了免疫亲和色谱技术对麻痹性贝类毒素GTX23,分离纯化的方法。
- 于广磊刘磊于姬刘仁沿梁玉波
- 关键词：麻痹性贝毒分离纯化高效液相色谱
- 快速检测膝沟藻毒素GTX2/3的酶联免疫试剂盒及其制法
- 本发明涉及检测麻痹性贝毒的检测技术，特别是涉及一种利用蛋白偶联合成抗原，制备抗麻痹性贝毒的单克隆抗体，并涉及利用单克隆抗体与膝沟藻毒素GTX2/3抗原结合，而分析生物样品中膝沟藻毒素GTX2/3含量的快速检测试剂盒的制法...
- 梁玉波刘仁沿许道艳刘磊
- 文献传递
- 抗有机氯农药DDT代谢物DDA多克隆抗体的制备及其在酶联免疫检测方法的应用被引量：2
- 2010年
- 目的:制备抗有机氯农药DDT代谢物DDA的多克隆抗体,从而建立DDA的ELISA检测方法,并将其初步应用于贝类样品中的DDA检测。方法:采用碳二亚胺法制备DDA-BSA完全抗原,对兔进行免疫,得到兔抗DDA多克隆抗体,并应用于建立DDA的间接酶联免疫检测方法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)。结果:成功制备抗DDA多克隆抗体,其IC50为115.30 ng/ml,最低检出限(IC20)为20.88 ng/ml,回收率为90.05%～106.38%,批内变异系数为1.25%～6.77%。结论:制备的抗DDA多克隆抗体及建立的ELISA检测方法可用于贝类样品中DDA含量的检测。
- 李伟刘仁沿许道艳刘磊梁玉波
- 关键词：DDA多克隆抗体酶联免疫检测
- 快速检测滴滴涕及其代谢物的酶联免疫试剂盒及其制法
- 本发明涉及检测有机氯农药滴滴涕(1，1，1-trichloro-2，2-bis-p-chlorophenyl-ethane，DDT)及代谢物的检测技术，特别是涉及一种利用蛋白偶联合成抗原，制备抗有机氯农药滴滴涕及代谢物的...
- 刘仁沿梁玉波许道艳刘磊
- 文献传递
- 快速检测麻痹性贝毒的免疫胶体金试纸条及其制法
- 本发明涉及检测赤潮毒素的检测器具。一种快速检测麻痹性贝毒的免疫胶体金试纸条，包括样本垫、胶金垫、赛多利斯NC膜、吸水垫和PVC背衬；其具体结构是在PVC背衬上按顺序依次粘附有样本垫、胶金垫、赛多利斯NC膜、吸水垫，胶金垫...
- 刘仁沿梁玉波刘磊许道艳
- 文献传递
- 紫贻贝体内麻痹性贝毒在自然条件下的排出被引量：2
- 2014年
- 2009年4月中旬在大连大窑湾海域采集了750只含麻痹性贝毒的紫贻贝吊养于大连棋盘磨附近海域,使其体内麻痹性贝毒在天然海域内自净。研究结果表明:试验所用紫贻贝软体部中麻痹性贝毒以N-磺酰氨甲酰基类毒素C1/C2和膝沟藻类毒素GTX2/3为主,其中后者占总毒素的65.08%,且降解速度较快;消化腺中毒素成分复杂,毒素含量高,是紫贻贝体内麻痹性贝毒的主要富集器官,在排出过程中毒素含量变化复杂;紫贻贝闭壳肌中毒素成分以新石房蛤毒素neo-STX为主,占总毒素含量的96.59%,其在试验过程中并没有明显降低趋势,反而波动上升,实验结束时其含量增加了34.75μgSTXeq/100 g;在性腺、鳃、外套膜中没有检测到任何形式的麻痹性贝毒成分。
- 许道艳刘磊于姬刘仁沿梁玉波
- 关键词：紫贻贝
