刘玮
- 作品数:6 被引量:20H指数:3
- 供职机构:宁波大学生命科学与生物工程学院更多>>
- 发文基金:宁波市重大科技攻关项目上海市教育委员会重点学科基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 嗜水气单胞菌BYKAH2008AC株外膜蛋白和溶血素双基因的融合表达及免疫原性分析被引量:4
- 2012年
- 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的外膜蛋白基因(OmpTS)和溶血素基因(Hly)是其重要的保护性抗原。根据Genbank已发表的两个基因的序列设计引物,扩增其去除信号肽部分的基因片段,再将二者通过柔性片段融合,定向插入到质粒pET32a中构建重组融合表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得与预期大小108 kD相吻合的融合蛋白条带。用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备兔抗血清。ELISA和Western Blot检测该抗体效价为1∶4000以上,且该重组蛋白与抗OmpTS兔血清和抗Hly兔血清都呈阳性反应,表明该融合蛋白保留了外膜蛋白和溶血素的免疫原性,可作为基因工程亚单位疫苗的候选成分。
- 刘玮倪穗邱军强乐韵王建平
- 关键词:嗜水气单胞菌外膜蛋白溶血素基因免疫原性
- 海水养殖细菌性疾病快速选药试剂盒的研发
- 抗生素药物治疗,是控制海水养殖过程中频发细菌性疾病的有效方法之一。快速准确选择药物,治疗成功的关键。国际上常用的药敏试验方法是K-B纸片法,该方法因为周期长,需要专业的实验室和人员,因此不适于基层工作。本研究拟研发一种可...
- 邱军强王建平刘玮付乔芳张世奇杨先乐
- 关键词:细菌性疾病试剂盒海水养殖抗生素药物
- 刺激隐核虫免疫学研究进展被引量:9
- 2011年
- 刺激隐核虫病是海水鱼类养殖中的常见寄生虫病之一。本文综述了刺激隐核虫诱导鱼类发生免疫反应的类型、机制以及刺激隐核虫疫苗的研究现状,为通过免疫学方法预防该病提供了参考。
- 邱军强刘玮杨先乐程训佳
- 关键词:刺激隐核虫免疫学疫苗
- 嗜水气单胞菌BYKAH2008AC株外膜蛋白和溶血素双基因的融合表达
- 嗜水气单胞菌的外毒素、胞外蛋白酶、S层蛋白和外膜蛋白是其重要的毒力因子。气溶素类外毒素HEC对同型和异型的嗜水气单胞菌的攻击均显示出极显著的保护作用。而溶血素作为嗜水气单胞菌气溶素类外毒素之一,广泛存在于嗜温气单胞菌中,...
- 刘玮
- 关键词:嗜水气单胞菌外膜蛋白溶血素基因免疫原性
- 文献传递
- 泥蚶金属硫蛋白的鉴定、原核重组表达及其组织细胞分布被引量:5
- 2011年
- 采用RT-PCR方法扩增、克隆和鉴定了泥蚶(Tegillarca granosa)的金属硫蛋白(Metallothionein,MT)基因(TgMT)的开放阅读框(ORF)。基于金属硫蛋白氨基酸序列构建的系统进化树表明,泥蚶和魁蚶(Scapharca broughtonii)的亲缘关系最近。利用ORF序列,构建原核重组表达质粒。重组质粒经PCR、酶切鉴定及测序验证后转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),经IPTG诱导,表达重组蛋白,重组蛋白的分子量约为28.3 kD。可溶性分析表明重组蛋白主要以可溶性形式存在。用His-tag柱亲和纯化重组蛋白,并利用重组蛋白制备了兔抗血清。Real-time PCR和Western blot实验表明,金属硫蛋白在泥蚶的各个组织中都有表达,并且在消化腺中的表达量最高。采用激光共聚焦显微镜,对泥蚶的消化腺进行免疫组化定位分析,发现泥蚶的MT主要存在于消化腺腺管上皮细胞的胞质中。泥蚶MT的克隆和表达研究为进一步研究该蛋白在环境监测中的作用、探讨细胞解毒的分子生物学机制奠定了基础。
- 解家松许婷刘玮何中央吴信忠
- 关键词:泥蚶金属硫蛋白原核表达
- 一种海水养殖中细菌性疾病快速选药试剂盒的研发被引量:2
- 2011年
- 本研究拟研发一种可用于基层的快速选药试剂盒。通过增菌液的筛选、固体培养基的筛选、药物的筛选和快速选药效果的比对,初步组建了一种海水养殖细菌性疾病快速选药试剂盒,经部分区域的中试和试验后发现,该试剂盒结果理想,操作简便,适用于基层作为防治海水细菌性疾病的选药工作。
- 邱军强刘玮付乔芳杨先乐王建平
- 关键词:细菌性疾病试剂盒