刘晓蕾
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中南大学湘雅医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 含EGFP报告基因单顺反子HCV亚基因组复制子载体的构建和表达
- 2014年
- 目的构建含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的HCV复制子表达载体,并实现其在细胞中的复制表达。方法用分子生物学基因克隆技术对HCV 2a型复制子的基因进行改造,用EGFP基因替代HCV基因组中的包膜基因(E1和E2)体外构建重组单顺反子HCV亚基因组复制子真核表达质粒pcDNA-JFH1-EGFP,经限制性内切酶酶切分析和测序鉴定;脂质体介导转染人肝癌细胞系Huh-7细胞,用荧光显微镜观察EGFP表达,采用半定量RT-PCR方法检测重组复制子的HCV RNA负链,采用Western blot检测HCV NS3蛋白的复制表达,并观察IFN-α对重组质粒表达的HCV RNA复制的抑制作用。结果构建的4个重组质粒酶切分析与预期相符,HCV亚基因复制子表达载体中未发生EGFP和HCV编码区读码框架改变,转染重组载体Huh-7细胞检测到HCV负链及EGFP和HCV NS3蛋白表达。转染后48h,1 000IU/ml和2 000IU/ml IFN-α处理的细胞HCV RNA表达水平分别为未处理组的20.0%和7.6%。结论含EGFP报告基因的单顺反子HCV亚基因组复制子表达载体pcDNA-JFH1-EGFP构建成功,在Huh-7细胞中能有效复制表达,为进一步研究HCV提供了实验平台。
- 陈中湘刘晓蕾刘丽莎崔光晶邬国军马琼山刘水平
- 关键词：丙型肝炎病毒复制子绿色荧光蛋白基因表达
- 女性与肺癌被引量：1
- 2010年
- 肺癌是全球癌症死亡的首要原因,全世界每年约有120万人死于肺癌.近年来,肺癌发病率呈上升的趋势,在女性中尤为明显.自1950年来,女性肺癌的病死率大幅度升高,并且在1987年超过乳腺癌成为美国女性癌症死亡的首要原因[1].据我国肿瘤防治办公室的统计数据显示,2000-2005年,我国男性肺癌增幅为16.9%,女性肺癌则是38.4%,明显高于男性肺癌.吸烟被认为是导致肺癌的重要原因,
- 赵夏琰于倩刘晓蕾羊媛苑杨亚柳张雷
- 关键词：女性肺癌癌发病率数据显示肿瘤防治病死率
