刘文娟
- 作品数：83 被引量：155H指数：7
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- 发文基金：四川省农业科学院青年基金四川省财政基因工程青年基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学自然科学总论更多>>
- 转Bt基因作物毒蛋白对土壤生态系统的影响被引量：4
- 2009年
- 随着商业化转Bt基因作物大面积的推广和应用,其对农田生态系统造成的潜在危害日益引起人们的重视。国内外大量研究结果表明,转Bt基因作物表达的毒蛋白会以不同方式释放到土壤并在土壤中长期残留,从而对土壤生态系统造成影响。文章综述了转Bt基因作物毒蛋白对土壤生态环境影响的研究进展,包括毒蛋白进入土壤的途径、土壤中毒蛋白的分离和检测方法、毒蛋白在土壤中的残留动态及其对土壤生物和酶活性影响,为转Bt基因作物对土壤环境的生态风险性评价提供参考。
- 刘文娟刘勇
- 关键词：转BT基因作物毒蛋白土壤残留土壤生态系统
- 无标记基因抗虫水稻外源基因向常规栽培水稻漂移研究被引量：4
- 2011年
- 本试验以抗虫转基因水稻华恢1号为研究对象,将几种非转基因常规栽培水稻种植在其周围,按不同距离收集F1代非转基因水稻种子。采用PCR技术对各点收集的水稻种子进行转基因杂种鉴定,统计并分析抗虫转基因水稻中外源基因向非转基因常规栽培水稻漂移的频率。结果表明:外源Bt基因向P13381和春江063水稻平均漂移频率皆为零。而抗虫转基因水稻华恢1号与非转基因水稻合系22-2、天香、明恢63、P1157几个品种不同程度地发生了转基因漂移,平均漂移频率最高为0.875%,并且漂移频率随着距离加大而逐渐降低,而在7 m以外的所有采样点平均转基因漂移频率为零。该研究表明抗虫水稻华恢1号外源基因的基因漂移频率非常低,其对生态环境的潜在风险很小,通过田间合理布局进行物理隔离,保持合适距离,以及科学安排农时,错开花期等方式,能有效控制转基因水稻外源基因漂移和降低因转基因逃逸带来生态风险。
- 张富丽佟洪金刘勇尹全王东宋君陶李常丽娟刘文娟李忆雷绍荣游米沙
- 关键词：转基因水稻抗虫性基因漂移生态风险
- 一种分析C4植物光合耐旱能力的方法
- 本发明公开了一种分析C4植物光合耐旱能力的方法，解决现有技术中只能分析完整叶片的叶绿素荧光和活性氧组化定位的问题。本发明的一种分析C4植物光合耐旱能力的方法，通过将暗适应后的C4植物叶片，切片观察叶肉和维管束鞘细胞的叶绿...
- 刘文娟雷绍荣郭灵安宋君张富丽常丽娟王东尹全
- 文献传递
- 多重PCR检测抗草甘膦大豆GTS40-3-被引量：2
- 2016年
- 将大豆内源参照基因(Lectin)、外源基因P-CaMV 35S、CP4-EPSPS和T-NOS作为多重PCR检测参数,建立了一种多重PCR检测抗草甘膦大豆GTS40-3-2的方法。反应条件优化结果表明:多重PCR的适宜退火温度为58℃,适宜引物终浓度(μmol·L^(-1))配比为:0.1∶0.2∶0.2∶0.2。采用已知样品对多重PCR体系进行验证,检测结果可靠,证明该多重PCR体系为一种有效的抗草甘膦大豆GTS40-3-2的检测方法。
- 尹全李忆宋君王东张富丽刘文娟常丽娟刘勇
- 关键词：多重PCR大豆
- 转Bt基因棉秸秆还田利用对土壤肥力的影响被引量：6
- 2020年
- 随着转基因的快速发展,大量转Bt棉秸秆的合理利用和处理是不可忽视的重要课题之一。为明确Bt棉秸秆还田利用的可行性和安全性,本研究以不同抗虫转Bt基因棉和常规棉花‘泗棉3号’为研究材料,在分别种植1、2年后将秸秆机械粉碎后原位还田,测试土壤中Bt蛋白残留量、土壤酶活性及养分含量的变化,分析Bt棉秸秆原位还田对土壤肥力特性的影响。研究结果表明,秸秆还田40 d后,Bt棉样地土壤中Bt残留蛋白检测值较低,均与非转基因棉样地无显著性差异。棉秸秆还田后,土壤脲酶、蔗糖酶、蛋白酶、多酚氧化酶、过氧化氢酶、碱性磷酸酶活性皆较秸秆还田前增加,但土壤纤维素酶活性较之前降低。棉秸秆还田使土壤中有机质、有效磷、碱解氮、速效钾和全氮等养分含量及pH明显增加,而Bt抗虫棉与常规棉秸秆还田后对土壤肥力的影响不存在显著差异。对土壤综合肥力指数评价结果表明,秸秆还田对土壤肥力提升与Bt棉抗虫水平无关,土壤肥力指数在两年间由Ⅲ级水平上升至Ⅱ级水平。综上,Bt棉花秸秆还田不会造成土壤综合肥力降低,相反能有效提升土壤肥力;同时还田利用措施可对转基因植株有效灭活,与转基因植物秸秆利用和无害化处理要求相契合。生产中用于Bt转基因棉花秸秆利用和处理在一定程度上是安全可行的。
- 张富丽尹全毛建霏郭灵安雷绍荣刘文娟罗苹王东宋君杨晓凤
- 关键词：转BT基因棉秸秆还田转基因植物土壤肥力
- 一种DNA提取新方法在转基因水稻种子检测中的应用被引量：1
- 2012年
- 将水稻种子打磨成粉,取100 mg粉末加入SDS和NaCl等试剂配制成高盐提取液,然后提取基因组DNA。超微量分光光度计NanoDrop 1000检测及Eco RV酶切反应的结果表明,该方法比CTAB法的DNA浓度更高、纯度更好。以提取得到的DNA为模板,采用PCR法分别对水稻特异性内源基因SPS及转基因水稻外源基因Bt进行扩增,均能扩增到清晰的目标条带。这种DNA提取新方法不仅简单快速、成本低廉,而且提取到的DNA质量高,扩增效果好,可有效地用于水稻种子转基因成分的检测。
- 张富丽刘勇宋君雷绍荣郭灵安王东尹全刘文娟常丽娟
- 关键词：DNA提取高盐转基因水稻种子
- 转基因玉米98140品系特异定量PCR精准检测的引物和探针及方法
- 本发明属于生物技术领域，涉及基因的定量分析方法，具体是指转基因玉米98140品系特异定量PCR精准检测的方法。本发明采用设计的特异性上游引物序列98140event-F、下游引物序列98140event-R、荧光探针序列...
- 张富丽宋君雷绍荣郭灵安刘勇王东尹全刘文娟常丽娟
- 文献传递
- 用于转基因植物及其产品检测的标准物质概述被引量：2
- 2011年
- 就国内外转基因及其产品检测用标准物质进行概述,重点介绍了核酸、蛋白质检测用标准物质,其中质粒标准物质的研究是今后转基因植物及其产品检测用标准物质研究的方向。
- 尹全李忆宋君张富丽常丽娟刘文娟王东刘勇
- 关键词：转基因标准物质
- 转基因玉米ND207转化事件特异性定性PCR检测方法及其标准化
- 2023年
- 转基因玉米ND207是中国农业大学研发的转mCry1Ab和mCry2Ab基因的抗虫玉米,本研究的目的是建立ND207转化事件特异性定性PCR检测方法。根据研发者提供的引物进行PCR扩增,PCR产物测序分析,获得了5’端旁侧序列262 bp,包括109 bp的载体序列和153 bp的玉米基因组序列, 3’端旁侧序列316 bp,包括76 bp的载体序列和240bp的玉米基因组序列。针对两端旁侧序列设计14条引物,组成25对引物组合进行引物筛选,选中3’端一对最佳引物优化PCR反应体系及反应条件,建立ND207的转化事件特异性定性PCR检测方法, PCR产物片段大小为166 bp。经过测试,该方法的检出限为0.1%,相当于20个拷贝的ND207特异分子片段。国内8家转基因生物安全检测机构对本方法进行了特异性测试、检出限测试和再现性测试,循环验证报告显示:该方法符合国家标准方法的各项要求,可在检测行业推广应用。ND207转化事件特异性定性PCR检测方法的建立,为我国ND207及其衍生品系的安全监管提供技术支撑。
- 常丽娟梁晋刚宋君刘文娟付成平代晓航王东魏超熊梅
- 关键词：转基因玉米旁侧序列
- 多重PCR筛查检测进口转基因玉米被引量：5
- 2016年
- 为获得进口转基因玉米筛查检测策略,并根据策略建立多重PCR方法,对15个进口转基因玉米分子特征进行分析。结果表明,将P-Ca MV 35S、T-NOS等2个基因组合作为检测策略可全部检出15个进口转基因玉米至少1次;将P-Ca MV 35S、P-ract1、T-NOS、bar、pat、PMI等6个基因组合作为检测策略,除MON810检出1次外,其他每个转化体可检出至少2次。同时,利用获得的筛查检测策略建立多重PCR体系,对2个基因组合的策略优化,结果表明适宜退火温度为58℃,适宜引物终浓度(μmol·L-1)配比为0.2∶0.2;对6个基因组合的策略优化,结果表明适宜退火温度为60℃,引物终浓度配比为0.2∶0.1∶0.1∶0.1∶0.1∶0.05。采用已知样品对多重PCR体系进行验证,图谱显示与转化体分子特征完全一致。该研究结果将为进口转基因玉米筛查检测提供参考。
- 尹全李忆宋君侯雪王东张富丽刘文娟常丽娟雷绍荣刘勇
- 关键词：转基因玉米多重PCR
