刘先艮
- 作品数：25 被引量：29H指数：2
- 供职机构：南通市第三人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Circ-0033074靶向miR-296-5p对前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响
- 2023年
- 目的探讨Circ-0033074对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养前列腺癌细胞DU-145、22Rv1和LNCaP及前列腺上皮细胞RWPE-1,RT-qPCR法检测细胞中Circ-0033074和miR-296-5p表达水平。以前列腺癌细胞DU-145为研究对象,分为si-NC组、si-Circ-0033074组、si-Circ-0033074+anti-miR-NC组和si-Circ-0033074+anti-miR-296-5p组。CCK-8试剂盒、Transwell小室、流式细胞术分别检测细胞增殖、细胞迁移和侵袭及细胞凋亡,Western印迹检测CyclinD1、P21、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Bax和Bcl-2蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证Circ-0033074和miR-296-5p调控关系。结果前列腺癌细胞系DU-145、22Rv1和LNCaP中Circ-0033074的表达显著高于前列腺上皮细胞RWPE-1(P<0.05),而miR-296-5p的表达显著低于RWPE-1细胞(P<0.05)。与si-NC组比较,si-Circ-0033074组OD值、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9和Bcl-2的蛋白表达显著降低,细胞凋亡率及P21、Bax蛋白表达显著升高(均P<0.05)。Circ-0033074靶向负调控miR-296-5p,沉默miR-296-5p逆转沉默Circ-0033074对DU-145细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。结论沉默Circ-0033074可靶向上调miR-296-5p表达抑制前列腺癌细胞DU-145增殖、迁移和侵袭,并诱导DU-145细胞凋亡。
- 于峰刘先艮杨帆谈树宾徐钱
- 关键词：前列腺癌细胞增殖迁移凋亡
- CXCR4-siRNA逆转录病毒载体体外靶向抑制hTERT^+肿瘤细胞CXCR4基因的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,并研究其在hTERT+前列腺癌细胞、乳腺癌细胞中的表达。方法:用PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(smallinterferingRNA,siR-NA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的Pgensil-1质粒,以hTERT启动子代替U6启动子,再将重组基因片段导入到逆转录病毒真核表达载体PLXSN中,行限制性酶切鉴定。转染PA317病毒包装细胞,收获病毒上清分别转染前列腺癌细胞PC-3m、LNCaP及人胚肺成纤维细胞MRC5和人乳腺癌细胞MCF7,RT-PCR检测CXCR4mRNA表达。结果:限制性酶切鉴定该重组质粒,成功构建了PLXSN/EGFP-hTERT-siCXCR4。与空载体组比较,PC-3m、LNCaP、MCF7细胞中CXCR4-siRNA对CXCR4mRNA的48h抑制率分别为(87.02±10.34)%、(61.70±9.77)%、(88.31±9.20)%。MRC5细胞中PLXSN-hTERT-siCXCR4对CXCR4mRNA不抑制。结论:该逆转录病毒系统中hTERT启动子调控的下游RNA干扰序列可选择性地在hTERT+前列腺癌细胞、乳腺癌细胞中表达,在hTERT-MRC5细胞不表达,具有显著的靶向性。
- 杜岳峰邢毅飞曾甫清王美玉陆鹏刘先艮
- 关键词：趋化因子受体4人端粒酶逆转录酶
- Syndecan-1、MMP-1在肾癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2006年
- 应用免疫组化SP法检测细胞黏附分子Syndecan-1和基质金属蛋白酶-1(MM P-1)在正常肾组织和肾癌组织中的表达。结果为Syndecan-1在肾癌中低表达者预后差,MM P-1在肾癌中高表达者预后差,二者表达呈负相关(rs=-0.651,P<0.001)。认为二者联检可预测肾癌的转移潜能及评估预后。
- 杜岳峰邢毅飞曾甫清陆鹏王美玉刘先艮
- 关键词：肾细胞癌细胞黏附分子基质金属蛋白酶-1
- 经尿道等离子体电切术治疗高龄高危前列腺增生症的体会被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨经尿道等离子体双极电极汽化电切术(TUPKVP)治疗高龄高危前列腺增生症(BPH)的安全性及疗效。方法:采用TUPKVP治疗高龄高危BPH患者61例。结果:手术切除前列腺重量(14.1～90.0)g,平均53g,出血量30～100ml,未出现TURS、真性尿失禁,术中、术后无输血,所有患者术后均排尿通畅,随访3～12个月,IPSS评分由术前(22.4±4.2)分,降至术后(7.2±3.3)分。结论:TUPKVP是高龄高危BPH的安全有效的治疗方法,TUPKVP的汽化止血效果更好,更能减少TURS的发生,对高龄高危的BPH患者安全性更高。
- 刘先艮谈树宾朱慧徐钱
- 关键词：前列腺增生症高龄高危
- 钬激光治疗输尿管粘连包裹性结石临床体会被引量：1
- 2010年
- 目的:观察分析输尿管镜下钬激光治疗输尿管包裹粘连性结石的效果,总结手术技巧。方法:利用Wolf8/9.8CH10°输尿管硬镜。人工注水扩张输尿管口,直视入镜。钬激光设备采用美国科威中30W碎石机。处理粘连息肉功率23W,脉宽700,碎石功率16W,脉宽350。先清除息肉再碎石,最后处理与输尿管粘连的残留结石。结果:123例患者中,一次性成功113例,4例因视野不清改开放手术,穿孔1例改开放手术,5例残留结石漂移入肾盂后期行体外冲击波碎石术(ESWL)成功。术后输尿管狭窄1例。结论:钬激光治疗输尿管内包裹粘连性结石,如条件许可应作为首选治疗方法。能够将息肉与粘连一同处理,较其他碎石设备更具高效性。术前常规静脉肾盂输尿管造影(IVP)了解尿路情况。对病史长,反复ESWL结石位置无改变,结石造成上尿路积水较重或结石有中空改变者,应考虑此类情况。
- 徐钱谈树宾朱慧刘先艮
- 关键词：输尿管疾病结石钬激光
- 小干扰RNA对LNCaP细胞CXCR4基因表达的影响
- 目的：研究小干扰RNA(siRNA)对前列腺癌(Prostatecancer，Pca)细胞株LNCaP细胞中CXC趋化因子受体4(CXCR4)mRNA表达的影响。
方法：选择人CXCR4基因的一个靶点，体外合成...
- 刘先艮
- 关键词：前列腺癌小干扰RNALNCAP细胞基因表达
- 文献传递
- 人前列腺特异性抗原启动子调控的CXCR4-siRNA逆转录病毒载体的构建及其对前列腺癌细胞的生物学效应被引量：5
- 2007年
- 目的构建人前列腺特异性抗原(hPSA)启动子调控的趋化因子受体4(CXCR4)的RNA干扰逆转录病毒载体,并探讨其对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞CXCR4基因表达的靶向抑制作用。方法PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(siRNA),转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的pGensil-1质粒,以hPSA启动子代替U6启动子,再将重组基因片段导入到逆转录病毒真核表达载体pLXSN中,进行限制性酶切鉴定。转染。PA317包装细胞,收获病毒上清,分别转染前列腺癌细胞PC-3m、LNCaP和人乳腺癌细胞MCF7。采用RT-PCR、Western blot检测CXCR4基因表达。Transwell小室侵袭实验检测前列腺癌细胞体外侵袭能力的变化。结果通过限制性酶切鉴定该重组质粒,成功构建了CXCR4的RNA干扰质粒pLXSN/EGFP-hPSA-siCXCRd。与空载体组比较,CXCRd-siRNA对LNCaP细胞CXCR4 mRNA和蛋白表达抑制显著,48 h抑制率分别为(81.53±10.22)%和(90.52±9.31)%;对PC-3m、MCF-7细胞CXCRd mRNA和蛋白表达无抑制作用。Transwell侵袭实验结果显示,LNCaP细胞干扰组微膜下孔细胞数为(139.9±14.2)个,空载体组为(348.4±36.4)个,两组差异有统计学意义(P<0.05);PC-3m、MCF-7细胞干扰组微膜下孔细胞数与空载体组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论该逆转录病毒系统中,hPSA启动子调控的下游RNA干扰序列特异性地抑制激素依赖前列腺肿瘤细胞的CXCR4基因表达,具有明显的靶向性。hPSA启动子调控的靶向CXCRd基因的RNA干扰技术在激素依赖性前列腺癌的基因治疗中具有一定价值。
- 杜岳峰邢毅飞曾甫清陆鹏刘先艮肖亚军
- 关键词：趋化因子受体4
- 肾结石患者血清中Klotho、VDR的表达水平及其临床意义被引量：1
- 2023年
- 目的探究肾结石患者血清中Klotho、维生素D受体(VDR)的表达水平及其临床意义。方法选取2019年1月至2020年1月本院泌尿外科确诊的100例肾结石患者(肾结石组)及同期与肾结石组的一般资料相匹配的75例体检健康者(对照组)为研究对象。检测研究对象的血清Klotho、VDR水平,并分析Klotho与VDR的相关性以及Klotho、VDR对肾结石的诊断价值;采用logistic回归分析影响肾结石的相关因素。结果肾结石组患者的血清Klotho水平显著低于对照组,VDR水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);logistic回归分析结果显示,Klotho、体重指数(BMI)、血尿酸、VDR、血钙、糖尿病史是肾结石发生的影响因素(均P<0.05);肾结石患者的血清Klotho与VDR呈负相关(r=-0.682,P<0.05);Klotho、VDR诊断肾结石的受试者工作特征(ROC)曲线下面积分别为0.830、0.910,两者联合诊断的曲线下面积为0.943。结论肾结石患者的血清Klotho水平降低,VDR水平增加,Klotho与VDR呈负相关,二者均是影响肾结石的相关因素,并对肾结石有一定的诊断效能。
- 徐钱刘先艮朱慧
- 关键词：肾结石KLOTHO
- 小干扰RNA对LNcap细胞CXCR4基因表达的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:研究小干扰RNA(siRNA)对LNcap细胞中CXC趋化因子4(CXCR4)基因表达的影响。方法:用针对CXCR4基因的siRNA表达质粒pSilencer-CXCR4转染人前列腺癌细胞株LNcap细胞,用RT-PCR方法检测其CXCR4基因表达水平的变化。结果:重组体pSilencer-CXCR4转染LNcap细胞后,能明显抑制CXCR4基因的表达;转染48 h后,其表达水平下降75%,与空白对照组和阴性对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.01)。结论:利用RNA干扰技术能有效抑制靶基因的表达,为下一步有关CXCR4的研究奠定一定的基础。
- 刘先艮肖亚军邢毅飞杜岳峰
- 关键词：前列腺癌小干扰RNA基因表达
- RNAi表达载体对前列腺癌细胞CXCR4基因表达的抑制作用
- 2007年
- 趋化因子CXC受体4及其配体基质细胞衍生因子1（SDF-1）相互构成的反应轴与肿瘤的恶性表现密切相关。它们不仅在肿瘤细胞的迁移过程中起着一定作用，而且与肿瘤细胞发生、增殖和分化等有密切关系，并可能成为肿瘤基因治疗中的一个新靶点。我们利用可在细胞内自主生成siRNA的表达质粒转染激素依赖性和非依赖性人前列腺癌细胞株LNCaP和PC-3m，观察其对CX-CR4mRNA及蛋白表达的影响。
- 杜岳峰邢毅飞曾甫清陆鹏刘先艮
- 关键词：前列腺癌细胞株CXCR4基因表达RNAI基质细胞衍生因子
