冷青文 作品数:35 被引量:119 H指数:6 供职机构: 石河子大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 高层次人才科研启动基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
巴什拜羊OLA-DRB3基因多态性与绵羊肺炎支原体感染相关性研究 被引量:5 2015年 本研究旨在分析巴什拜羊DRB3基因遗传多态性与MO感染的相关性。采用PCR-RFLP方法分析巴什拜羊OLA-DRB3基因第2外显子多态性,并计算基因杂合度、多态信息含量和有效等位基因数等遗传参数;通过分析和差异性检验MO阴性和阳性巴什拜羊OLA-DRB3基因型频率和等位基因频率,初步判定MO的抗性或易感性基因。结果表明:巴什拜羊OLA-DRB3第2外显子在第122、154、168和241碱基处表现出多态性;在Taq I、Pst I位点达到Hardy-Weinberg平衡,根据基因杂合度和多态信息含量,表明巴什拜羊具有较为丰富的遗传多样性。在巴什拜羊的24种基因型中,HaeⅢBC(P<0.05)为MO抗性基因,HaeⅢDD(P<0.05)为MO易感基因型;Pst I A(P<0.01)和Pst I B(P<0.01)、HaeⅢC(P<0.01)分别是巴什拜羊MO易感和抗性相关等位基因。此结果可为绵羊抗病育种研究提供理论支持。 冷青文 闫遵祥 李志远 剡根强关键词:巴什拜羊 PCR-RFLP 重组猪干扰素α的真核表达纯化及其单克隆抗体制备 被引量:1 2023年 为了获得猪源干扰素α(PoIFN-α)的单克隆抗体,本研究首先将PoIFN-α基因连接到pcDNA3.1真核表达载体从而构建rPoIFN-α质粒,通过真核表达系统(ExpiCHOTM)表达蛋白,并用亲和层析技术纯化后对重组蛋白进行鉴定;以重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠后进行细胞融合,用建立的间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,亚克隆后通过制备腹水得到单克隆抗体,纯化制备的抗体并鉴定。结果显示,成功构建了rPoIFN-α质粒,通过ExpiCHOTM表达系统成功表达出正确大小的可溶性蛋白,分子质量为20 ku;通过间接ELISA筛选和5次亚克隆,得到1株能稳定分泌抗IFN-α蛋白的单克隆细胞株(3c6),亚型鉴定为IgG1亚型、IgGκ轻链;Western-blot结果显示,抗体可以特异识别IFN-α,抗体纯化后效价检测可达1∶256000。上述结果表明,本试验制备的rPoIFN-α蛋白纯度高,单克隆抗体特异性强,可以在以后的研究中用于建立不同的IFN分子的检测方法,为研究猪病毒感染和免疫过程中不同细胞因子的应答情况提供便利。 孙波涛 张涛清 孙冰洁 王常英 李亚军 杨锐 秦晓东 冷青文 郑海学关键词:干扰素 蛋白表达纯化 单克隆抗体 口蹄疫病毒多基因重组质粒的体外表达及衣壳组装 被引量:5 2005年 PCR扩增获得包含口蹄疫病毒P1、2A、3C、3D及部分2B编码区的目的基因片段P12X3C3D,将P12X3C3D经AflⅡ和XbaI双酶切后,定向克隆于真核表达质粒载体pcDNA3.1(+);另将PCR扩增获得的P12X3C3D直接与真核表达质粒载体pTARGETTM连接,进行筛选、鉴定及DNA序列分析,分别获得重组质粒pcDNA3.1/P12X3C3D、pTARGET/P12X3C3D。将重组质粒分别转染BHK-21细胞,通过双抗体夹心ELISA方法和间接免疫荧光标记方法检测细胞中表达的口蹄疫病毒抗原,用磷钨酸负染,以电子显微镜观察转染重组质粒的细胞中组装的口蹄疫病毒空衣壳。结果表明,口蹄疫病毒基因组片段正确克隆到真核表达质粒载体上,重组质粒pcDNA3.1/P12X3C3D、pTARGET/P12X3C3D均可在BHK-21细胞中表达FMDV目的蛋白。其中重组质粒pTARGET/P12X3C3D表达的口蹄疫病毒抗原蛋白,能够在细胞内正确组装成病毒空衣壳。 郭慧琛 刘在新 孙世琪 冷青文 刘湘涛 谢庆阁关键词:口蹄疫病毒 体外表达 衣壳 口蹄疫 基因疫苗 牛磺酸对肉仔鸡生产性能及各脏器发育的影响 被引量:1 2015年 本研究旨在探讨饲料中添加牛磺酸对肉鸡生产性能及脏器器官发育的影响。选用1日龄麻花雄性肉仔鸡120只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复10只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮基础上添加0.05%、0.10%和0.20%的牛磺酸,试验期60 d,分别在7、14、21、42和60日龄进行屠宰。试验结果显示,饲料中添加牛磺酸提高了肉鸡的增重,但差异不显著(P>0.05);对肉鸡脏器肝脏、心脏、脾脏和胰腺的发育没有显著影响(P>0.05)。以上结果表明,牛磺酸在一定程度上提高了肉仔鸡的增重,对脏器发育未产生不利影响。 刘云芳 陈祥平 冷青文 李志远 王新峰 潘晓亮关键词:牛磺酸 肉仔鸡 脏器 雪鸡的驯化及人工养殖技术 被引量:3 1999年 就雪鸡诱捕,人工驯养和1995~1996两年间先后两次采用小型电孵机孵化雪鸡种蛋及育雏工作进行了总结,人工孵化雪鸡种蛋20个,其受精率为100%,出雏20只,孵化率为100%,育雏成活率达85%以上。为今后大量人工养殖雪鸡提供了科学依据。 米来.夏日甫 乌热力哈孜 赛务加甫 冷青文 海肉拉关键词:雪鸡 人工孵化 育雏 驯化 人工养殖 野生禽类 胶质纤维酸性蛋白在新疆哈萨克羔羊肠道内的分布研究 2021年 为了探究胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在新疆哈萨克羔羊肠道中的分布表达,试验采用免疫组织化学SABC-DAB法对GFAP的表达进行了研究。结果显示,GFAP在羔羊肠道的黏膜上皮层以及黏膜固层中强表达,在固有肌层弱表达;在各个肠段均有阳性反应,且小肠段GFAP的OD值显著高于大肠段(P<0.05)。GFAP是肠神经胶质细胞的经典标记物,通过观察其阳性表达说明在哈萨克羔羊肠道中,肠胶质细胞主要活化于肠道的黏膜上皮层以及黏膜固有层。 彭凡洋 冷青文关键词:胶质纤维酸性蛋白 小肠 大肠 低聚糖对断奶羔羊瘤胃菌群的影响 被引量:27 2010年 本试验旨在研究低聚糖对断奶羔羊瘤胃菌群的影响。选取日龄、体重相近的陶赛特F2代断奶公羔40只,随机分成4组(每组10个重复,每个重复1只),分别为对照组(基础饲粮)、低聚异麦芽糖(IMO)组(基础饲粮+0.3%IMO)、低聚果糖(FOS)组(基础饲粮+0.3%FOS)和混合低聚糖组(基础饲粮+0.2%IMO+0.1%FOS),试验期42d(预试期7d,正试期35d)。采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对羔羊瘤胃内容物细菌16SrRNA的V6~V8可变区进行菌群多样性分析,利用实时定量PCR技术对瘤胃总菌、黄化瘤胃球菌(R.flavefaciens)和产琥珀酸丝状杆菌(F.succinogenes)的数量进行定量分析。结果表明:与对照相比,FOS显著降低了瘤胃菌群的多样性(P<0.05),而IMO及混合低聚糖对瘤胃菌群的多样性无显著影响(P>0.05);2种低聚糖均显著降低了DGGE凝胶上的条带数(P<0.05),而混合低聚糖处理后DGGE凝胶上的条带数则无显著变化(P>0.05);FOS提高了羔羊瘤胃总菌(P<0.05)、R.flavefaciens(P<0.05)和F.succinogenes(P>0.05)的数量,而IMO和混合低聚糖显著降低了F.succinogenes的数量(P<0.05)。由此得出:低聚糖能够改变断奶羔羊瘤胃菌群结构,FOS可提高瘤胃总菌及R.flavefaciens和F.succinogenes的数量。 王新峰 冷青文 李志远 刘云芳关键词:低聚糖 断奶羔羊 DGGE 实时定量PCR 数码显微互动系统在“动物组织胚胎学”实验教学中的应用 被引量:4 2009年 采用数码显微互动系统进行动物组织胚胎学实验教学,是教学模式的一种创新,与传统实验方法相比较,这种新模式对提高教学质量和教学效率都起到了很大的推动作用。 冷青文 李志远 米来 张莉关键词:动物组织胚胎学 实验教学 中国美利奴军垦型细毛羊繁殖周期中NAG活力与发情排卵的关系 被引量:3 2001年 1998~ 1999年测定了中国美利奴军垦型细毛羊正常繁殖周期中血清N -乙酰 - β -D 氨基葡萄糖苷酶 (NAG)活力与孕酮 (P4 )浓度 ,并探讨了它们与发情排卵的关系。结果表明 ,母羊在休情期的NAG活力为 2 6 98U/L± 1 65U/L ,P4 平均含量小于 0 1ng/ml。发情排卵当天 ( 0天 )NAD活力为 51 12U/L± 5 4 3U/L ,P4 平均含量为 0 2 36ng/ml± 0 0 7ng/ml。发情后 1天 ( +1天 )NAG活力为 38 35U/L± 3 78U/L ,P4 平均含量为 5 2 56ng/ml。经t检验 ,0天和 +1天的NAG活力和P4 含量差异十分显著 (P <0 0 1)。提示NAG活力变化可以作为简便、快速预测母羊发情排卵的指标。 王金富 冷青文 邓湘泉 孔繁军 杨勇军关键词:发情周期 NAG 发情排卵 《动物解剖学》课程教学改革与实践 2023年 该文通过对《动物解剖学》课程理论和实践教学进行改革实践,达到激发学生专业兴趣、调动学习积极性,提高教学质量的目的。采用多种方法对此课程教学进行改革探讨,让学生体验学习乐趣,有效提高课程学习质量和教学效果,为专业课程学习和培养合格的兽医专业人才筑牢基础。 冷青文 王艳萍 李志远 孙敬礼 胡月关键词:动物解剖学 教学