冉贵萍 作品数:18 被引量:35 H指数:3 供职机构: 上海交通大学医学院附属第九人民医院 更多>> 发文基金: 贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 更多>>
贵州地区早发性乳腺癌BRCA1基因多态性分析 2007年 目的探讨BRCA1基因突变与贵州地区女性早发性乳腺癌的关系。方法收集40岁及40岁以下的贵州地区女性乳腺癌患者外周血55份,同年龄组健康体检者外周血40份,采用聚合酶链反应-单链构像多态性分析(PCR-SSCP)、异源双链分析法(HA)和基因测序,分析BRCA1基因外显子20全长序列和外显子11的部分序列。结果健康对照组未检测出突变,乳腺癌患者组在外显子20未发现突变,仅在外显子11上有1例移框突变,为4184delTCAA,是一个高频致病突变。该突变引起了密码子1354以后的氨基酸框架移位,并在密码子1364形成终止密码,导致蛋白截短。结论外显子11上4184delTCAA与贵州地区早发性乳腺癌可能有一定的关系。 冉贵萍 黄铁生关键词:乳腺癌 乳腺癌易感基因1 多态性 突变 乳腺癌3p14区域杂合性缺失与乳腺癌发生发展的关系 被引量:2 2008年 目的:探讨乳腺癌染色体3p14区域等位基因杂合性缺失与乳腺癌发生、发展的关系及与其临床病理特征之间的关系。方法:采用聚合酶链反应银染技术结合二核苷酸(CA)n重复序列出现多态性评价杂合性缺失(Loss of heterozygosity,LOH)。分析66例乳腺癌及45例乳腺乳头状瘤病的D3S1234、D3S1300位点的LOH,用免疫组化方法观察雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和c-erbB-2在乳腺癌中的表达情况。结果:乳腺癌组D3S1234、D3S1300位点的LOH发生率分别为38.0%(22/58)、34.5%(19/55),55.0%(33/60)的乳腺癌组织至少在一个位点存在LOH;乳头状瘤病组分别为32.5%(13/40)、28.2%(11/39),42.5%(17/40)的乳头状瘤组织至少在一个位点存在LOH,乳腺癌及乳腺乳头状瘤病在两位点的LOH无统计学差异(P>0.05)。轻度和中、重度乳头状瘤病的两位点LOH率有统计学差异(P<0.05),中、重度乳头状瘤病患者LOH率高于轻度患者。乳腺癌染色体3p14区域杂合性缺失与病人年龄、肿瘤大小、病理分级、淋巴结转移、c-erbB-2无明显相关性(P>0.05),与ER(-)、PR(-)有明显相关性(P<0.05)。结论:染色体3p14区域D3S1234、D3S1300杂合性缺失是乳腺癌发生的早期和频发事件,与乳腺癌的癌变进展可能相关,与乳腺癌的预后判断可能无相关性。并提示双座位的LOH可能有助于判断高风险的癌前病变。 冉贵萍 杨眉 朱岷关键词:乳腺癌 乳腺乳头状瘤病 杂合性缺失 染色体 中国早发性乳腺癌BRCA1基因多态性分析 本文通过研究BRCA1基因在我国早发性乳腺癌的突变情况,探讨了BRCA1基因与我国早发性乳腺癌的关系。文章采用聚合酶链反应一单链构像多态性分析(异源双链分析)一测序(PCR-SSCP(HA)一Sequencuig)方法分... 冉贵萍 黄铁生关键词:乳腺癌 BRCA1基因 基因多态性 聚合酶链反应 文献传递 孕妇外周血中RASSF1A基因甲基化状态研究 2017年 目的探讨RASSF1A基因作为孕妇外周血中胎儿特异性标记物的可行性。方法随机选取43例的外周血样本,其中妊娠晚期孕妇标本40例、健康未妊娠女性标本3例,以及早期妊娠行流产的绒毛组织样本5例。利用甲基化敏感限制性内切酶PCR(MSRE-PCR)及荧光定量PCR的方法,检测血细胞、绒毛和血浆DNA的RASSF1A基因甲基化状态。结果健康未妊娠妇女血浆及孕妇血细胞中均未检出甲基化RASSF1A基因;绒毛组织中甲基化RASSF1A基因检出率为100%;孕妇血浆中甲基化RASSF1A基因检出率为92.5%。妊娠晚期孕妇血浆RASSF1A基因含量Ct平均值为30.43±2.37。结论在母体和胎儿DNA中,RASSF1A基因甲基化状态有明显差异,用实时荧光定量PCR可对孕妇血浆RASSF1A基因进行定量,提示了RASSF1A基因是无创产前诊断的一个潜在标记物。 冉贵萍 余宗蓉 袁勇 李娜 杜翠红关键词:RASSF1A基因 甲基化 游离胎儿DNA 孕妇血浆 吴茱萸的AFLP指纹图谱的初步研究(英文) 被引量:7 2008年 首次报道中草药植物吴茱萸基因组DNA指纹图谱的研究。吴茱萸是贵州省内经济价值极高的中草药之一,采用扩增片段长度多态性(AFLP)技术来分析来自不同地区的石虎、疏毛、大花吴茱萸3个品种的DNA指纹图谱,从18对引物中筛选出3对引物对19份材料的DNA检测,共得到93条带,其中多态性片段57条(平均61.3%)。3对引物组合从DNA指纹图谱上将19份材料完全区分开,结果表明AFLP技术是鉴别吴茱萸相近品种的有效方法,是形态学鉴定方法的有益补充;UPGMA方法聚类分析显示19份种质材料间的相似系数为0.235~0.941,表明吴茱萸种质间的遗传多样性丰富;余庆地区种植基地的石虎和疏毛样本聚为一类,提示人工栽培影响到吴茱萸的遗传特性。 冉贵萍 黄海 黄金宝关键词:扩增片段长度多态性 指纹图谱 聚类分析 用AFLP分子标记探讨吴茱萸的遗传多样性 被引量:3 2008年 用AFLP标记分析研究吴茱萸与其变种石虎和疏毛吴茱萸之间的遗传多样性。采用AFLP技术,从18对引物中筛选出3对引物,对19株不同地域的3种吴茱萸AFLP指纹图谱进行了分析,计算不同品种间的遗传距离和构建吴茱萸的聚类分析树状图。3对引物共扩增出93条带,其中57条(61.3%)呈多态性,吴茱萸种质内遗传距离为0.059~0.765;在相似系数0.48的水平上,19份吴茱萸材料可以大致分为2个类群。吴茱萸不同品种间遗传距离差异较大,遗传分类在一定程度上与传统的分类方法是一致的,这暗示遗传变异与地域分布有相关性。 黄海 冉贵萍 刘杨 何顺志 黄金宝 黄韵祝 张小蕾 黄健关键词:吴莱萸 扩增片段长度多态性 聚类分析 一种经济、快速的凝胶DNA回收方法 被引量:5 2010年 目的:用明胶海绵吸收法回收DNA片段,并验证该方法能否有效、快速的从电泳后琼脂糖凝胶中回收DNA片段。方法:将明胶海绵剪成楔形,在紫外灯照射下插入含有目的DNA片段的琼脂糖凝胶中,待海绵完全膨胀后取出,离心收集DNA溶液;并用该法回收的DNA片段进行PCR扩增,检验其回收的DNA质量。结果:明胶海绵吸收法回收DNA样品的得率介于63%~98%,所回收的DNA进行PCR扩增能够获得相应的目的条带。结论:明胶海绵吸收法是一种快速、有效的DNA回收方法。 黄海 冯发莉 刘杨 冉贵萍关键词:DNA 在分子诊断学教学中培养研究生科研思维能力和创新能力 2010年 分子诊断学是临床检验诊断学专业硕士研究生的必修课,为了在这门课程教学中实现对研究生科研思维能力和创新能力的培养。笔者经过不断的探索,对教学内容、教学方法和考试方法等进行改革,初步达到了预期效果。 黄海 张小蕾 黄韵祝 冉贵萍 王良宏关键词:临床检验诊断学 分子诊断学 教学改革 两种提取孕妇血浆游离胎儿DNA方法的比较 被引量:1 2018年 目的分别应用两种方法进行血浆游离胎儿DNA的提取,判定及筛选最佳的血浆游离胎儿DNA的提取方法,为后续试验提取游离胎儿DNA的方法提供参考依据。方法收集30例健康妊娠孕妇血浆,用离心柱法和磁珠法进行血浆游离DNA的提取,经甲基化敏感限制性内切酶Bst UI酶切后使用微量紫外分光光度计测量所提取的游离胎儿DNA的含量及纯度,再使用实时荧光定量PCR扩增方法测定扩增效率,进行统计学分析。结果离心柱法所提取的游离胎儿DNA的测定结果为:含量(43. 27±21. 01) ng/μl;纯度A260/A280 (0. 999 7±0. 084 42);扩增效率为94%;而磁珠法提取的游离胎儿DNA的测定结果为:含量(31. 74±12. 25) ng/μl:纯度A260/A280 (0. 878 3±0. 052 66);扩增效率为87%。两组方法提取游离DNA的浓度、纯度比较,差异有统计学意义(均P<0. 05)。结论离心柱法比磁珠法操作更简便、快捷。经测定提取的DNA的浓度及纯度,扩增效率后可判断离心柱法所提取的游离胎儿DNA的浓度、纯度及扩增效率都远远优于磁珠法;离心柱法比磁珠法更适用于后续无创产前诊断研究试验。 冉贵萍 赵海鸥 谢艳平 陈英 钟贞强关键词:游离胎儿DNA 磁珠法 产前诊断 RASSF1A基因 妊娠各期母血中胎儿RASSF1A基因含量的测定 被引量:1 2018年 目的本文旨在分析确定妊娠早、中、晚各期母血中胎儿DNA的含量,从而为利用孕母血浆循环DNA进行病理性妊娠诊断研究奠定基础。方法收集746例不同孕期孕妇抗凝血,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)技术测定高甲基化RASSF1A基因含量,确定不同孕期孕周孕妇外周血浆中胎儿DNA含量。结果孕妇早、中、晚期孕组血浆胎儿DNA平均含量分别34.68±24.76copies/μL、204.03±124.91copies/μL、338.84±345.15 copies/μL,三组比较有显著性差异(P<0.05)。孕妇血浆中的高甲基化RASSF1A水平随着孕周的增长而增高。最早可在7周检测到孕妇血浆中高甲基化RASSF1A基因,含量随妊娠的进程逐渐增加,且在分娩后三天内消失。10例健康未妊娠女性血浆均未检出高甲基化RASSF1A基因。结论用实时荧光定量PCR的方法可确定正常孕妇血浆中不同孕期孕周胎儿DNA的含量,为后续病理性妊娠诊断研究提供实验依据。 冉贵萍 黄氲 杜金龙 陈英 郭鹏 钟贞强关键词:无创产前诊断 胎儿游离DNA RASSF1A基因