何凤
- 作品数：7 被引量：6H指数：2
- 供职机构：南昌大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省卫生厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氯化镧对IκB激酶复合物活化的抑制作用
- 目的 分析氯化镧对IκB激酶复合物(IKKβ)活化的调控作用.方法 以1×106个/ml接种Hela细胞于含10％胎牛血清的RMPI1640液体培养基中,于5％C02、37℃恒温培养,随机分组如下：①TNF-α...
- 郭菲何凤娄远蕾汪泱李国辉胡意
- 免疫荧光检测核因子-κB活化的定量分析被引量：1
- 2015年
- 免疫荧光可定性分析细胞内蛋白核转位现象,NF-κB/p65蛋白核转位提示NF-κB信号通路的活化,我们尝试运用自主研发设计的免疫荧光分析软件计算荧光图像中胞核和胞质位置的荧光值变化,定量分析核转位情况,并通过蛋白质免疫印迹法验证软件分析结果。应用该软件分析内毒素诱导0.5、1、2和4h后原代人脐静脉内皮细胞的NF-κB信号通路活化,结果提示2h为核转位高峰期,与蛋白质免疫印迹法验证结果一致,表明自主研发的免疫荧光分析软件可应用于免疫荧光的定量分析。
- 修敏何凤娄远蕾徐露熊洁琦王平刘丝荪郭菲
- 关键词：免疫荧光NF-ΚB人脐静脉内皮细胞内毒素
- 二氧化硒调控凋亡相关蛋白诱导宫颈癌细胞凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨二氧化硒(SeO2)对宫颈癌细胞株Hela凋亡的诱导作用及其对凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、P53表达的影响。方法用光学显微镜观察Hela细胞经过SeO2处理24h后的形态学变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测SeO2对Hela细胞增殖及活力的影响;利用流式细胞术(FCM)检测Hela细胞凋亡率;用Western blot检测Hela细胞内caspase-3、P53蛋白表达的变化。结果光学显微镜下SeO2可对Hela细胞生长形态产生明显影响,大量细胞变圆皱缩,失去正常形态,贴壁细胞减少,增殖减慢;MTT结果显示SeO2对Hela细胞的抑制作用呈量效依赖关系,其中7.500、15.000、30.000μmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);0、1.875、3.750、7.500、15.000、30.000μmol/L SeO2诱导Hela细胞凋亡率分别为3.12%、30.56%、33.42%、37.50%、45.43%、69.38%,呈明显上升趋势。Western blot分析显示SeO2可上调caspase-3与P53蛋白水平,并于7.500μmol/L处达到峰值。结论 SeO2可能通过上调caspase-3、P53的表达诱导宫颈癌细胞凋亡。
- 刘丝荪熊洁琦闵庆华郭玲修敏何凤娄远蕾郭菲
- 关键词：二氧化硒细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3P53
- MiR-135a与糖尿病肾病肾脏纤维化的相关性研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨miR-135a与糖尿病肾病肾脏纤维化关系及其具体作用机制。方法通过RT-PCR技术测定糖尿病肾病患者血清及肾脏组织中miRNA-135a(miR-135a)的含量。采用荧光素酶报告基因实验验证miRNA-135a的靶基因。构建miR-135a过表达质粒,上调肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞中miR-135a的表达,通过蛋白印记及免疫荧光法检测与肾脏纤维化相关蛋白的表达,运用荧光素报告基因及免疫印记的方法寻找、确定miR-135a。结果从糖尿病肾病患者以及db/db小鼠的血清和肾组织的miR-135a水平来看,miR-135a表达显著上调。我们证实了瞬时受体电位阳离子通道,亚家族C,成员1(Transient receptor potential channel,subfamily C,member 1,TRPC1)是miR-135a的靶基因。TRPC1的过度表达能够逆转miR-135a对促进肾小球系膜细胞增殖以及增加胞外基质蛋白合成的病理效应。在糖尿病患者肾组织中miR-135a的减少使得TRPC1回到正常水平,并减少了纤维连接蛋白和胶原蛋白I在人体内的合成。抑制TRPC1水平可能是miR-135a在糖尿病肾损伤中促肾纤维化的一种机制。结论 miR-135a可通过靶向调节TRPC1参与糖尿病肾病肾脏纤维化的发生,这些发现表明miR-135a在肾脏纤维化中有重要作用,抑制miR-135a的表达可能成为治疗糖尿病肾病的一种有效方法。
- 刘思逸何凤陈钦开魏昕张莉杨玉娟
- 关键词：糖尿病肾病纤维化
- 氯化镧抑制Hela细胞中TNF-α诱导的NF-κB信号通路的活化
- 冯年花何凤娄远蕾汪泱郭菲
- 关键词：氯化镧IKKΒIΚBΑ
- 镧化合物对肿瘤与正常组织细胞活力作用差异的体外观察被引量：1
- 2013年
- 目的探讨氯化镧体外对不同肿瘤及正常组织细胞活力的影响。方法采用MTT法检测氯化镧对肿瘤细胞系Hela、Caski的体外抑瘤效应及对正常细胞系HUVEC、脂肪干细胞ADSCs体外毒性。结果氯化镧浓度大于5μmol/L时对宫颈癌细胞Hela即有明显的抑制作用(P<0.05);低浓度组(5μmol/L)对Caski生长略有促进作用,其后随着氯化镧浓度的增高抑制作用愈见明显,与对照组有显著差异(P<0.05)。而这一浓度范围内的氯化镧对正常细胞系HUVEC、ADSCs无明显毒副作用,相反可促进细胞生长。结论一定浓度的氯化镧对肿瘤细胞的生长增殖有明显抑制作用,而对正常细胞的生长则有一定的促进作用。
- 熊洁琦刘丝荪何凤胡国文修敏胡意
- 关键词：稀土镧细胞活力MTT
- 氯化镧对肿瘤坏死因子α诱导的核因子κB抑制因子激酶β活化的调控作用
- 2013年
- 目的分析氯化镧对TNF—α诱导的NF—KB抑制因子（IKB）激酶B（IKKβ）活化的调控作用。方法（1）体外培养Hela细胞，按照随机数字表法分为TNF-α对照组，以含20ng／mL TNF-α【的无血清RMPI1640培养液恒温培养30min；小剂量氯化镧＋TNF-α组、中等剂量氯化镧＋TNF-α组、大剂量氯化镧＋TNF-α组，3组细胞分别以含5、25、100txmol／L氯化镧的无血清RMPI1640培养液恒温培养4h后，加入含20ng／mLTNF-α的无血清RMPI1640培养液继续培养30min；氯化镧对照组，以含100Ixmol／L氯化镧的无血清RMPI1640培养液恒温培养30min；空白对照组，以无血清RMPI1640培养液恒温培养30rain，各组样本数均为3。收集各组细胞，免疫细胞荧光染色观察NF—KB／p65蛋白转位情况。（2）另取Hela细胞，同上分为5组，即TNF-α【对照组、小剂量氯化镧＋TNF．a组、中等剂量氯化镧＋TNF-α组、大剂量氯化镧＋TNF-α,组、空白对照组并行相同处理，各组样本数均为3，采用蛋白质印迹法检测胞核中NF—KB／p65蛋白表达以及胞质中IKBtx、IKKD与磷酸化IKKβ、IKKp（p-IKKβ、p-IKKp）蛋白表达；采用NF—KB／p65转录因子试剂盒检测胞核中NF—KB／p65蛋白与靶基因结合的活性，数据以吸光度值表示。对数据进行方差分析、LSD—t检验。结果（1）空白对照组胞质中NF—KB／p65表达较强；TNF-α对照组胞核中NF-KB／p65表达较强；氯化镧对照组胞质中NF—KB／p65较空白对照组减弱；3种剂量氯化镧＋TNF一“组间比较，胞核和胞质中的NF—KB／p65表达量随着氯化镧浓度的升高而减弱，总体表达明显弱于TNF-“对照组。（2）空白对照组胞核中也有一定量的NF．KB／p65蛋白表达，TNF-α对照组胞核中NF—KB／p65蛋白表达强于空白对照组；3种剂量氯化镧＋TNF-α组间比较，胞核中NF．KB／p65蛋白表达随着氯化镧浓度升高逐渐减弱。TNF-α对照组IKBCt表达水平较
- 郭菲何凤修敏娄远蕾谢安刘芬李国辉
- 关键词：烧伤镧肿瘤坏死因子ΑNF-KB
