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提高抗体库容量和亲和力方法的新进展被引量：1: 2012年; 抗体库为抗体工程带来了革命性的突破,其核心是将抗体的基因型与表型耦联,从抗体库中找到针对特异抗原的抗体基因。但是抗体工程发展所面临的两大难点是如何构建大库容量的抗体库和提高抗体的亲和力。抗体库方法和技术的出现使得改造工程抗体更方便、更有效。利用不同抗体库方法构建大库容量的突变抗体库,然后通过抗体库技术在体外模拟抗体亲和力成熟过程获得高亲和力的抗体。本文简要综述了抗体库方法和技术的最新进展。; 代鹏周广青马军武; 关键词：库容量

单链抗体的表达: 2011年; 单链抗体(scFv)是具有抗体活性的最小功能结构单位,是基因工程抗体研究领域中的热点,具有比单克隆抗体在生物病原体、微生物污染和寄生虫病等预防、检测和治疗的独特优点和应用前景。鉴于其重要性,单链抗体在不同的表达系统中得到表达与研究。简要综述了scFv的表达。; 代鹏周广青马军武; 关键词：单链抗体外源基因

核糖体展示口蹄疫单链抗体库的构建被引量：2: 2011年; 目的:构建库容量大、多样性好的核糖体展示口蹄疫单链抗体(scFv)库。方法:分离口蹄疫病毒免疫的兔脾细胞,提取总RNA,用RT-PCR扩增兔抗体的重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因,同时扩增作为间隔区的兔抗体Ck基因;采用重叠延伸PCR(简称SOE-PCR)技术连接VH-VL基因,同时引入T7启动子和核糖体结合位点序列,体外构建核糖体展示scFv库模板,连接pMD18-T载体转化E.coli DH5α大肠杆菌,挑取阳性克隆测序以鉴定scFv组装。结果:成功构建了库容量达8.21×1013的兔源口蹄疫核糖体展示scFv库。结论:构建的大容量兔源性口蹄疫核糖体展示抗体库可以成为进一步筛选特异性口蹄疫单链抗体的实验平台,为开发诊断性口蹄疫单链抗体奠定了很好的实验基础。; 杨双马军武周广青林密冯霞刘涛代鹏; 关键词：核糖体展示技术重叠延伸PCR 单链抗体库口蹄疫病毒

抗口蹄疫病毒单链抗体cDNA T7噬菌体展示文库的构建被引量：2: 2013年; 为构建抗口蹄疫病毒单链抗体cDNA T7噬菌体展示文库,利用Trizol试剂提取BALB/c鼠脾B淋巴细胞RNA,采用RT-PCR两步法扩增BALB/c鼠重链可变区和轻链可变区基因,用重叠延伸PCR技术构建抗口蹄疫病毒scFv基因库;在scFv cDNA双链末端加上EcoRⅠ/HindⅢ接头,用内切酶EcoRⅠ和HindⅢ消化接头,形成的双链cDNA两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ黏性末端;将其与含EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7Select 10-3b载体连接,经体外包装,BLT5403菌株增殖,文库扩增,进行体外亲和筛选。所构建的文库库容量的原始浓度为1×107 PFU/mL,扩增后文库浓度为9.6×1013 PFU/mL。随机挑取50个噬菌斑进行PCR鉴定,均为阳性,大小约800bp。经测序,序列完全正确。结果表明,成功构建了抗口蹄疫病毒单链抗体cDNA T7噬菌体展示文库。; 张晓霞马军武周广青代鹏林密冯霞; 关键词：口蹄疫单链抗体

RNA编辑功能和RNA干扰: 2011年; RNA编辑被认为是生命体一种新的基因加工与修饰现象,是指DNA转录成RNA后除RNA剪切外的其他加工过程,以核苷酸的删除、插入或替换等方式改变遗传信息,揭示生物进化过程中基因修饰和调控的另一个重要途径,是对中心法则的重要补充。而RNAi是一种由dsRNA介导的,在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因表达的基因调节途径。着重介绍RNA编辑功能、RNA编辑与RNA干扰关系。; 代鹏沈辉马军武刘光远; 关键词：RNA编辑 RNA干扰

B细胞抗原受体信号转导途径研究进展被引量：1: 2011年; B细胞抗原受体（B cell antigen receptor,BCR）是由膜免疫球蛋白（mIg）和Igα/Igβ组成的异源寡聚复合体。前者识别抗原,后者转导mIg接受抗原刺激信号。BCR和一些辅助受体及辅佐分子共同完成对抗原的识别及信号转导。BCR信号转导与细胞增殖、分化,生物个体的生长、发育、遗传、疾病、衰老乃至死亡息息相关^[1]。; 代鹏马军武杨双; 关键词：B细胞信号转导

利用核糖体展示技术筛选口蹄疫病毒单链抗体基因: 2013年; 目的：利用核糖体展示技术筛选口蹄疫病毒特异性单链抗体基因。方法：在己构建好的核糖体展示文库的基础上，利用核糖体展示技术，经过5轮的体外转录、体外转译、亲和筛选和RT－PCR，将得到的序列进行测序分析。结果：筛选到FMDV scFv基因，且基因得到富集。结论：实验运用核糖体展示技术，以FMDV抗原和纯化的146S病毒粒子为靶标筛选到了FMDV scFv基因，将为scFv用于FMD的基础研究、免疫学研究以及为预防、治疗和诊断提供帮助，也为研制FMD的快速诊断技术奠定先前基础。; 代鹏; 关键词：核糖体展示技术单链抗体基因口蹄疫病毒 FMDV RT-PCR

利用核糖体展示技术筛选口蹄疫病毒单链抗体基因: 2012年; 目的:利用核糖体展示技术筛选口蹄疫病毒特异性单链抗体基因。方法:在已构建好的核糖体展示文库的基础上,利用核糖体展示技术,经过5轮的体外转录、体外转译、亲和筛选和RT-PCR,将得到的序列进行测序分析。结果:筛选到FMDV scFv基因,且基因得到富集。结论:实验运用核糖体展示技术,以FMDV抗原和纯化的146S病毒粒子为靶标筛选到了FMDV scFv基因,将为scFv用于FMD的基础研究、免疫学研究以及为预防、治疗和诊断提供帮助,也为研制FMD的快速诊断技术奠定先前基础。; 代鹏周广青林密冯霞马军武张晓霞; 关键词：口蹄疫病毒单链抗体核糖体展示

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代鹏