于莎莎
- 作品数：4 被引量：19H指数：4
- 供职机构：中国水稻研究所更多>>
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- 相关领域：理学农业科学更多>>
- 新型亲和去垢小柱净化-液相色谱-串联质谱法分析水稻叶片蛋白质组被引量：7
- 2014年
- 采用亲和去垢小柱净化,建立了水稻叶片蛋白质组的纳升液相色谱-串联质谱分析方法。水稻叶片蛋白质分别采用酚提取法结合十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)裂解,裂解液经亲和去垢小柱净化,酶解肽段用纳升液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱组合式高分辨质谱(nanoLC-LTQ/Orbitrap MS)分析,相关数据库检索鉴定。比较了超滤辅助样品制备法(FASP法)、亲和去垢小柱法和丙酮沉淀法对SDS去除效率及对蛋白质鉴定结果的影响。结果表明:3种方法均有较好的SDS去除效果(去除效率均大于95%);尽管3种方法鉴定的蛋白质种类具有一定的互补性,但以亲和去垢小柱法鉴定的蛋白质数目最多,为563种,远多于FASP法和丙酮沉淀法的196和306种;此外,亲和去垢小柱法适合于各种相对分子质量和不同pI值蛋白质的净化,而FASP法和丙酮沉淀法中不同相对分子质量和pI值蛋白质均有类似程度的损失。采用本文建立的方法,一次进样分析可鉴定出水稻叶片蛋白质多达588种;肽段匹配数≥2的296个蛋白质的生物学功能主要分为结合活性、酶活性、转移运输活性和结构组成等。该蛋白质分析方法可为开展水稻蛋白质组学研究提供技术参考。
- 曹晓林巩佳第陈铭学于莎莎卞英芳曹赵云
- 关键词：鸟枪法水稻叶片
- 固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定水稻中17种细胞分裂素被引量：4
- 2015年
- 建立了利用固相萃取-液相色谱-串联质谱同时测定水稻中17种细胞分裂素含量的分析方法。水稻样品经冷冻研磨，用甲醇-水（80∶20，v／v）溶液浸提，经聚合物阳离子交换树脂（PCX）纯化，采用 ZORBAX Extend-C18色谱柱，以甲醇和5 mmol／L甲酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾正离子模式电离，选择反应监测模式扫描，外标法定量。优化了色谱分离条件，研究了不同提取溶剂对17种细胞分裂素的提取效率，并考察了 PCX 固相萃取柱的纯化效果。结果表明，17种细胞分裂素在线性范围内的相关系数（ r）均大于0.9984，方法检出限为0.01～0.05 ng／g。水稻根、茎和叶基质在0.2、1和5 ng／g 3个添加水平的平均回收率为60.2％～125.4％（ n＝6），相对标准偏差（ RSD）为5.4％～29.7％。在水稻样品中检出5种细胞分裂素，其含量为0.02～0.93 ng／g。本方法纯化效果好、灵敏度高，可用于水稻中多种痕量细胞分裂素的同时分析。
- 曹赵云马有宁牟仁祥于莎莎陈铭学
- 关键词：液相色谱-串联质谱水稻细胞分裂素
- 高效液相色谱-高分辨质谱法鉴定水稻稻曲病菌毒素被引量：4
- 2015年
- 建立了高效液相色谱-线性离子阱高分辨质谱（HPLC-LTQ/Orbitrap MS）鉴定稻曲球中5种稻曲病菌毒素的方法。样品匀浆后以水为提取剂超声提取10 min,混合阳离子交换柱PCX净化,采用Xselect HSS T3色谱柱（150mm×2.1 mm,3.5μm）分离,以水（含0.1%（v/v）甲酸）和甲醇为流动相,梯度洗脱。在m/z 200~1 000范围内进行一级质谱全扫描,结合准分子离子峰的精确质量数和同位素相对丰度进行质谱分析。结果表明,鉴定到5种稻曲病菌毒素,质量准确度小于1×10^-6（1 ppm）,同位素相对丰度偏差绝对值≤3.3%,二级质谱碎片离子与理论裂解一致,回收率为90%~105%。该方法简便,灵敏度高,定性准确,为稻曲病菌产毒能力等相关研究提供了技术手段。
- 卞英芳于莎莎牟仁祥曹赵云孙伟华杨欢林晓燕陈铭学
- 关键词：高效液相色谱高分辨质谱水稻
- 镉胁迫下锌对水稻植物螯合肽合成的影响被引量：4
- 2015年
- 以水稻品种9311为试验材料,采用水培试验研究了镉（Cd）离子胁迫下水稻幼苗根部和地上部生物量、重金属含量、植物螯合肽（PCs）及谷胱甘肽（GSH）含量的变化,及添加锌（Zn）离子对Cd胁迫作用的调节。结果显示,Cd胁迫降低了水稻生物量,下降幅度达27.6%～37.0%;随Cd处理浓度的增加,水稻根部和地上部PCs含量分别增加了93.7%和84.7%;Zn可以降低Cd胁迫水稻根部PCs和GSH的合成水平以及Cd的含量。一定浓度范围内,Cd-Zn高量表达PCs,PCs与重金属Cd结合,缓解了重金属Cd的毒害。
- 于莎莎卞英芳杨欢孙伟华曹赵云
- 关键词：镉锌水稻植物螯合肽谷胱甘肽
