于红静
- 作品数：8 被引量：29H指数：4
- 供职机构：广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：广西医学科学实验中心开放基金国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 趋化因子CCL18、CXCL1促进卵巢癌增殖和转移分子机制初探
- 目的:趋化因子CCL18和CXCL1，被认为是卵巢癌早期诊断的潜在临床标志物。课题组前期研究表明，CCL18与卵巢癌细胞转移相关，而CXCL1与卵巢癌细胞增殖相关。本研究通过分析CCL18、CXCL1对其他趋化因子及受体...
- 于红静
- 关键词：卵巢癌细胞增殖分子机制
- 文献传递
- 小分子蛋白慢病毒表达系统的构建被引量：9
- 2011年
- 目的构建趋化因子蛋白慢病毒表达系统,建立稳定表达GFP的卵巢癌细胞系,为研究趋化因子蛋白的功能及作用机制打下基础。方法趋化因子CCL18、IL-8、CXCL1基因克隆质粒经PCR扩增、酶切,与慢病毒载体PWPI连接,构建的重组慢病毒质粒按比例与包膜质粒PCMV-dR8.74及包装质粒PMD2.G混合,LipofectinTM2000共转染293T细胞系包装病毒颗粒,病毒液感染卵巢癌SKOV3细胞后,采用流式细胞仪分选出GFP表达的细胞作为转染成功的细胞。实时荧光定量PCR验证转染后目的基因的表达,Westernblot验证目的蛋白的表达。结果重组慢病毒基因能高效地转导入靶细胞,转导效率达95%以上,并稳定表达;实时荧光定量PCR检测结果显示:细胞和组织中转染目的基因组与对照组比较,均见目的基因的表达显著增高(P<0.05);Westernblot验证转染目的基因组小分子蛋白成功表达。结论本实验成功构建了小分子蛋白慢病毒表达系统,为进一步研究小分子蛋白在人体的功能及作用机制建立了实验基础。
- 尹巧云李力于红静王琪
- 关键词：慢病毒卵巢癌
- CCL18介导肿瘤微环境趋化因子网络导致卵巢癌不良预后的研究被引量：5
- 2018年
- 目的分析血清CC趋化因子配体18(CC-chemokine ligand 18,CCL18)与卵巢癌预后的关系及其对卵巢癌微环境中其他趋化因子及受体的调控作用,探讨CCL18促进肿瘤生长和转移的可能机制。方法采用流式荧光微球法检测320例卵巢癌患者、150例盆腔良性肿块患者及100名正常对照女性血清样本中CCL18的表达,分析基因表达谱(Gene Expression Omnibus,GEO)以及癌症基因图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中CCL18基因表达与卵巢癌患者预后的关系。采用过表达CCL18的卵巢上皮癌细胞SKOV3-GFP-CCL18建立裸鼠皮下移植瘤模型,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测移植瘤内其他趋化因子及受体的表达。结果卵巢癌患者血清中CCL18的表达水平显著高于盆腔良性肿块患者和正常对照女性[(238.04±93.59)ng/mL vs(94.36±59.17)ng/mL,P<0.001;(238.04±93.59)ng/mL vs(31.68±26.10) ng/mL,P<0.001],且高表达CCL18的卵巢癌患者中位无疾病进展生存期较低表达者短(15.0个月vs18.2个月,HR=1.25,95%CI:1.08～1.44,P=0.003)。CCL18激活卵巢癌微环境的XCL1-XCR1、XCL2-XCR1、CCL2-CCR2、CCL11-CCR3、CCL17-CCR4、CXCL9-CXCR3、CXCL11-CXCR3、CXCL12-CXCR4趋化因子-受体轴表达,抑制了CXCL1-CXCR2、CXCL6-CXCR2、CXCL8-CXCR2、CCL5-CCR1、CCL5-CCR5、CCL27-CCR10、CCL28-CCR10趋化因子-受体轴的表达。结论 CCL18促进卵巢癌细胞转移可能与激活转移趋化因子-受体XCL1-XCR1、XCL2-XCR1、CCL2-CCR2、CCL17-CCR4表达和下调CCL5-CCR5、CCL27-CCR10和CCL28-CCR10表达有关,其可能造成卵巢癌患者不良预后。
- 汤钰琪于红静石丽君邹玉鹏冯雁王琪
- 关键词：卵巢肿瘤趋化因子肿瘤微环境预后
- 铂类耐药相关基因在卵巢癌顺铂耐药形成过程中表达量的动态变化被引量：9
- 2013年
- 目的了解卵巢癌患者在铂类治疗过程中产生获得性耐药相关基因表达动态变化的情况,为临床预后的预测及个体化治疗奠定理论基础。方法采用Benjamini-Hochberg(BH)法对源于TCGA数据库(The Cancer Genome Atlas)的256例敏感和耐药患者的卵巢癌全基因表达谱数据进行差异表达基因筛选。采用DAVID软件中的KEGG模块对筛选出的差异基因进行通路富集,筛选出P<0.05的通路,对筛选出的通路所包含的基因采用成组t检验找出差异显著的基因(P<0.05)。对筛选出的基因采用COREMINE工具进行文本挖掘,找出与多药耐药及肿瘤耐药存在线性相关的基因,将其与患者预后进行分析,确定存在差异显著的基因。采用实时荧光定量PCR法检测所筛选出的基因在裸鼠诱导耐药模型不同给药阶段的表达变化情况。结果 BH法共筛选出306个差异表达基因,其中上调基因110个,下调基因196个。DAVID软件的KEGG模块分别筛选出5条上调及4条下调通路,成组t检验筛选出有差异的基因共37个,其中上调基因18个,下调基因19个。COREMINE工具检索出与多药耐药及肿瘤耐药存在线性相关的上调基因为ITPA、IMPDH2、RPS7、PDE5A和PDE4D,下调基因为GNAS、CFTR、BUB3、PRKDC、RBL2、SMC1A、CALR、CCNE2及CHEK1。生存分析结果提示CALR及PRKDC基因的表达与患者生存时间有关,CALR和PRKDC基因高表达组的患者生存时间长于低表达组。qRT-PCR检测发现,CALR和PRKDC基因随顺铂注射次数增多,在SKOV3-GFP及SKOV3/DDPⅱ肿瘤组织中的表达量逐渐降低。结论 CALR与PRKDC基因可能与卵巢癌铂类耐药及患者的预后密切相关,且随着耐药的产生,CALR和PRKDC基因的表达量逐渐降低。
- 石丽君于红静李力王琪
- 关键词：卵巢肿瘤卵巢上皮性癌耐药相关基因顺铂
- 顺铂作用于耐顺铂卵巢上皮癌细胞后其细胞生物学特性的改变被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨耐顺铂卵巢癌SKOV3/DDPⅡ细胞对于顺铂作用后其细胞周期、凋亡、增殖及铂类耐药相关基因ARHGDIB和CCND1表达量的变化。方法:采用流式细胞术检测不同浓度和时间顺铂作用后SKOV3/DDPⅡ细胞周期和凋亡率的变化,并与标记GFP的上皮性卵巢癌细胞株SKOV3-GFP(敏感株)相比较;通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测不同浓度和时间顺铂作用后细胞增殖的变化;实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测裸鼠体内瘤块耐药基因CC-ND1和ARHGDIB基因的表达情况。结果:半抑制浓度的顺铂作用48h后,SKOV3-GFP和SKOV3/DDPⅡ两株细胞分布于G0/G1期的比例相对于无顺铂处理组明显下降(P<0.01,P<0.05),SKOV3/DDPⅡ细胞分布于G2/M期的比例则相对于无顺铂处理组明显升高(P<0.01);而顺铂作用48h内SKOV3-GFP和SKOV3/DDPⅡ两株细胞凋亡率随时间和浓度的增大而增大;以9.9,19.8,29.7μmol/L浓度的顺铂处理6d以后,SKOV3/DDPⅡ的增殖抑制得到解除,并继续生长,而SK-OV3-GFP细胞则随顺铂作用时间延长增殖持续受到抑制。顺铂作用体内移植瘤5次后,CCND1在SKOV3/DDPⅡ-5的相对表达比SKOV3/DDPⅡ-0增高92.98倍,作用第8次后,ARHGDIB在SKOV3/DDPⅡ-8的相对表达比SKOV3/DDPⅡ-0增高2.51倍。结论:具有耐药表型的卵巢上皮癌细胞在顺铂作用下降低分布于G0/G1期细胞数使细胞生长受到一定程度的抑制,但在顺铂刺激后肿瘤细胞过度表达CCND1基因使细胞顺利通过G1/S检查点促进肿瘤细胞增殖,同时上调表达ARHG-DIB基因抵抗顺铂诱导的肿瘤细胞凋亡。
- 石丽君于红静李力王琪
- 关键词：顺铂增殖凋亡
- 趋化因子CCL18、CXCL1促进卵巢癌增殖和转移分子机制初探
- 王琪于红静李力张玮黎丹戎尹富强
- 顺铂耐药卵巢上皮性癌细胞株及其裸鼠移植瘤模型的建立及耐药特性探讨被引量：4
- 2014年
- 目的：建立顺铂耐药性稳定的卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞株及其裸鼠移植瘤模型并探讨其耐药特性，为研究体内微环境耐药机制及逆转靶基因筛选奠定基础。方法采用体内外交叉诱导和连续体内诱导两种方法，以绿色荧光蛋白（GFP）标记的卵巢癌细胞株SKOV3/GFP分别建立两株顺铂耐药的卵巢癌细胞株SKOV3/DDPⅠ（为耐药细胞的对照）和SKOV3/DDPⅡ及其裸鼠移植瘤模型。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法和流式细胞仪检测细胞耐药指数，流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期比例，高效液相色谱仪检测细胞内顺铂积量；透射电镜观察移植瘤组织的超微结构，实时荧光定量PCR技术检测移植瘤组织中铂类耐药相关基因——PTEN、STAT5、XIAP、BRCA1和MDR1 mRNA的表达水平。结果成功构建顺铂耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDPⅠ和SKOV3/DDPⅡ及其裸鼠移植瘤模型。MTT比色法和流式细胞仪检测显示，SKOV3/DDPⅡ细胞的耐药指数分别为2.83±0.12和3.82±0.19，SKOV3/DDPⅠ细胞的耐药指数分别为2.20±0.16和3.40±0.20，两种检测方法分别比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）。流式细胞仪检测显示，29.7和39.6μmol/L顺铂处理36 h后， SKOV3/DDPⅠ、SKOV3/DDPⅡ细胞的凋亡率[分别为（57.0±1.4）%、（74.4±2.3）%和（37.6±4.4）%、（50.5±3.4）%]均显著低于SKOV3/GFP细胞[（83.1±2.7）%和（87.4±4.0）%；P=0.024，P=0.001]，且SKOV3/DDPⅡ细胞的凋亡率明显低于SKOV3/DDPⅠ细胞（P=0.020）；SKOV3/DDPⅠ、SKOV3/DDPⅡ细胞G2/M期比例与顺铂处理时间（为0、12、24、36和48 h）呈正相关（R=0.800，P=0.104；R=0.915，P=0.029）。高效液相色谱仪检测显示，以9.9、19.8、29.7和39.6μmol/L的顺铂分别处理12、24、36和48 h后，SKOV3/DDPⅠ、SKOV3/DDPⅡ细胞内顺铂积量均显著低于SKOV3/GFP细胞（P〈0.05）。透射电镜观察，接种SKOV3/GFP细胞的裸鼠移植瘤组织中，在
- 石丽君于红静张玮李力王琪
- 关键词：卵巢肿瘤顺铂
- CXCL1表达促进卵巢癌细胞增殖与ADAM10-EFGR通路的关系被引量：3
- 2013年
- 目的探讨趋化因子联接因子1(CXCL1)促进卵巢癌细胞增殖与解整合素—金属蛋白酶(ADAM)10-表皮生长因子受体(EGFR)通路的关系。方法 SPF级免疫缺陷型SCID雌性小鼠9只,随机分为三组:卵巢上皮癌(SKOV3)细胞组采用体外培养的卵巢癌细胞系SKOV3,GFP-SKOV3细胞组采用体外培养的卵巢癌细胞系GFP-SKOV3,CXCL1过表达(CXCL1-GFP-SKOV3)细胞组过表达CXCL1基因的CXCL1-GFP-SKOV3建立裸鼠皮下成瘤模型,30 d后取皮下瘤组织,采用脊髓离断法处死裸鼠,无菌剥离瘤体,比较各组肿瘤生长重量;采用实时荧光定量PCR法检测ADAM10、肝素结合表皮生长因子样生长因子(HBEGF)、EGFR及CXCL1基因表达。结果 CXCL1-GFP-SKOV3组产生的移植瘤重量显著高于GFP-SKOV3细胞组和SKOV3细胞组(P均<0.01);ADAM10、HBEGF、EGFR及CXCL1四个基因在CXCL1-GFP-SKOV3细胞的表达均显著高于GFP-SKOV3细胞组和SKOV3细胞组(P均<0.01)。结论趋化因子CXCL1可能通过激活ADAM10-EGFR途径进而促进卵巢癌细胞的增殖。
- 于红静尹巧云王琪
- 关键词：卵巢癌
