乔涵
- 作品数：31 被引量：90H指数：6
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省教育厅科学技术研究重点项目河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生环境科学与工程建筑科学更多>>
- 猪圆环病毒2型河南株全基因组的克隆与遗传进化分析被引量：13
- 2016年
- 为了解近几年河南地区猪圆环病毒2型（PCV2）的遗传进化情况,本研究对采自2011年-2015年河南省13个地区的28份疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）猪的病料样品进行PCR检测,并将检出的阳性病料样品接种无PCV的PK-15细胞,分离PCV2,进而用IPMA进行鉴定。最后对所获分离株进行全基因组克隆和序列分析。结果显示,28份样品中阳性率为75%（21/28）,并成功分离出21株PCV2,其全基因序列同源性为95.4%-99.9%;在遗传演化关系上,21株PCV2分离株分布于两个基因型（PCV2b和PCV2d）,16株属于PCV2d,而其余5株属于PCV2b基因型,这也说明PCV2d逐渐成为河南地区的优势流行株。此外,通过对其Cap蛋白氨基酸序列的预测与分析,发现其主要抗原区存在12处位点明显变异,这可能影响其抗原性及免疫原性。本研究为河南地区PCV2的防控提供了依据。
- 徐朋丽张宇韩昊莹乔涵杨兴武郭官鹏王晓星刘起涛陈红英
- 关键词：猪圆环病毒2型断奶仔猪多系统衰竭综合征
- 猪伪狂犬病毒YZ株gE全基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2015年
- 为了解猪伪狂犬病毒（PRV）gE基因的遗传变异特性,根据Gen Bank已发表的PRV gE全基因序列,设计并合成1对特异性引物,对PRV YZ株进行了gE全基因的扩增、克隆及测序,并与其他参考毒株gE基因进行比较序列分析。测序结果表明,YZ株gE全基因序列由1862bp组成,与GenBank已发表的13株PRV gE参考株序列同源性介于97.9%-99.9%。进化树分析表明,YZ株与目前国内流行的毒株在同一进化分支内,与国外分离株有一定差异。
- 朱前磊方先珍程果毕亚楠乔涵付朋飞王淑娟陈红英
- 关键词：伪狂犬病毒E基因
- 猪圆环病毒2型与猪支原体混合感染的诊断
- 2015年
- 2015年1月,河南某地猪场60日龄仔猪出现腹泻、呼吸困难并伴有后肢端坐状咳嗽为主要特征的疾病。PCR检测PCV2和MH均为阳性,结合发病情况、临床症状和剖检变化,诊断为猪圆环病毒2型与猪支原体混合感染。
- 杨兴武焦显芹潘鑫龙张宇耕乔涵陈红英
- 关键词：猪圆环病毒2型肺炎支原体
- 表达猪细小病毒VP2蛋白的重组猪伪狂犬病毒在小鼠体内的免疫反应被引量：9
- 2016年
- 为了研制出能够同时预防猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)和猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的二联活疫苗,本研究将PPV VP2基因克隆到伪狂犬病毒通用转移质粒pG中,构建重组伪狂犬转移质粒pGVP2。利用脂质体转染法将重组质粒pGVP2和PRV HB98弱毒株DNA共转染至猪睾丸(ST)细胞,使其在ST细胞内发生同源重组,经5次绿色荧光空斑纯化重组病毒rPRV-VP2。分别用重组病毒rPRV-VP2、亲本PRV HB98弱毒株、商品化PPV灭活苗和DMEM细胞培养液免疫6周龄雌性昆明小鼠,2周后进行二免。一免后第7周用PRV强毒NY株对小鼠进行攻毒。结果获得表达VP2基因的重组病毒rPRV-VP2,经ELISA试验、血清中和试验(SN)、血凝抑制试验(HI)和流式细胞检测发现,重组病毒rPRV-VP2株可有效刺激小鼠机体产生抗PPV和PRV抗体,同时具有增强小鼠机体细胞免疫反应的能力,且对PRV强毒攻击具有保护作用。结果表明,重组病毒rPRV-VP2可作为同时预防PPV和PRV感染的重组疫苗候选株。
- 付朋飞潘鑫龙乔涵杨兴武朱前磊郭晓庆张宇陈红英
- 关键词：猪细小病毒猪伪狂犬病毒VP2蛋白重组病毒免疫效力
- 表达猪细小病毒VP2蛋白的猪伪狂犬病病毒rPRV-VP2株的生物学特性被引量：8
- 2017年
- 探索重组PPV VP2基因的猪伪狂犬病病毒rPRV-VP2株作为弱毒疫苗候选株的潜在价值,对其在多种细胞上的增殖特性、病毒滴度、最适培养细胞中的遗传稳定性、一步生长曲线、转录和翻译水平等生物学特性进行研究,并初步探索对小鼠安全性。结果显示:重组病毒rPRV-VP2株在VERO、ST、PK-15和IPEC细胞上的TCID50分别为104.375/0.1mL、106.5/0.1mL、103.75/0.1mL、105.625/0.1mL。重组毒与亲本毒PRV HB-98株在ST细胞中的毒力(106.125 TCID50/0.1mL)和细胞病变相当,重组病毒保持了PRV病毒的通性。连续传毒20代后的绿色荧光观察、RTPCR、Western blot试验结果均表明重组病毒中的VP2基因得到了有效表达,且遗传稳定性良好。安全性试验结果显示:重组毒对小鼠安全。本试验为后期对PPV VP2基因重组猪伪狂犬病毒rPRV-VP2株的开发利用奠定了基础。
- 付朋飞乔涵张宇杨兴武徐朋丽陈红英
- 关键词：猪细小病毒VP2基因PRV生物学特性
- 2014-2017年中国部分地区PEDV流行株S基因遗传进化分析被引量：3
- 2019年
- 参考GenBank中PEDV经典CV777毒株基因组序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法对临床采集的疑似PEDV样品进行S基因扩增、克隆和测序,拼接获得30条完整S基因序列,并进行遗传进化及同源性分析。结果显示,获得的30条PEDV S基因与25个参考株S基因的核苷酸相似性介于93.6%~99.8%;且各流行毒株与经典毒株比较,具有多处的点突变、插入和缺失。与其他参考株相比,S1区存在157个氨基酸突变位点,占总数的65.7%(157/239),暗示PEDV的S1区域比S2区域易发生变异;表明目前中国PEDV流行株已经发生了变异,在一定程度揭示了免疫猪群仍然发病的原因。
- 郑慧华张鸿鑫韩昊莹乔涵赵宇陈红英
- 关键词：PEDVS基因遗传进化分析
- PEDV流行毒株S基因截短原核表达及生物活性分析
- 张鸿鑫韩昊莹张宇徐朋丽乔涵杨兴武陈红英
- 猪博卡病毒3/4/5型PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2016年
- 通过分析GenBank上登录的猪博卡病毒3/4/5型(PBoV3/4/5型)基因序列,发现这些基因序列中存在一段高度同源性保守序列,针对该序列设计并合成1对引物,成功建立了可同时扩增出PBoV 3/4/5型的PCR检测方法。对2013年8月至2014年5月河南省50份临床腹泻仔猪小肠样品进行检测,结果 21份为PBoV阳性,阳性率为42%,表明PBoV在河南省猪群中存在一定流行。本试验建立的PCR方法对PBoV3/4/5的检测具有简便、快速、灵敏度高和特异性强的特点,为PBoV 3/4/5型的快速检测提供了有效的技术支持。
- 付朋飞杨兴武乔涵潘鑫龙郭晓庆张宇郭珍珍陈红英
- 关键词：PCR
- 鉴别猪流行性腹泻病毒野毒株与疫苗株双重RT-PCR检测方法的建立被引量：2
- 2017年
- 为建立鉴别猪流行性腹泻病毒野毒株与疫苗株的检测方法,本研究根据GenBank中登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)M、ORF3基因序列,设计合成了2对特异性引物,通过PCR扩增条件的优化,建立了鉴别PEDV野毒株和疫苗株的双重RT-PCR检测方法。特异性试验显示,该检测方法对猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、Salmonella及E.coli等结果均为阴性;敏感性试验显示,所建立的双重PCR检测方法对M基因和ORF3基因的最低有效检测量分别为44.5拷贝/μL和481拷贝/μL。本研究建立的双重RT-PCR检测方法可实现对PEDV野毒和疫苗毒的快速检测,适合于现地猪流行性腹泻的鉴别诊断。
- 乔涵韩昊莹张鸿鑫刘秋歌郭奎朱彦宁杨明凡陈红英
- 关键词：猪流行性腹泻病毒野毒株疫苗株双重PCR
- 猪流行性腹泻病毒流行毒株S基因截短表达抗原性分析
- <正>引言猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea,PED）是由猪流行性腹泻病毒（Porcineepidemic di arrhea virus,PEDV）引起的,临床上以呕吐、腹泻及脱水为主要特...
- 张鸿鑫韩昊莹张宇徐朋丽乔涵陈红英
- 文献传递
