万良斌
- 作品数：7 被引量：23H指数：3
- 供职机构：贵阳医学院更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目贵州省科技厅社会发展攻关项目国家自然科学基金更多>>
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- 慢性氟中毒大鼠骨骼损伤过程中成骨细胞Wnt3a和β-catenin mRNA及其蛋白表达的研究
- 本文采用饮水加氟进行大鼠染氟实验，观察不同浓度NaF对大鼠成骨细胞染氟后Wnt3a和p-catenin的表达水平的影响，探讨慢性氟中毒骨相损害与相关调节基因的激活和表达在氟中毒发病机制中的作用。
- 陈锡山于燕妮易韦万良斌谢莹
- 关键词：慢性氟中毒成骨细胞
- 文献传递
- 氟对大鼠成骨细胞Wnt3α、β-链蛋白mRNA和蛋白表达的影响被引量：10
- 2013年
- 目的观察氟中毒大鼠成骨细胞Wnt3α、β-链蛋白（catenin）mRNA和蛋白表达，探讨氟骨症发生与Wnt通路的关系。方法健康SD大鼠36只，体质量100—120g，按体质量将大鼠随机分为3组，每组12只。对照组大鼠饮用自来水（含氟量〈1mg／L），低氟组、高氟组大鼠分别饮用含5、50mg／L氟化钠的自来水。大鼠饲养8个月，建立慢性氟中毒模型。饲养期间检查大鼠氟斑牙发生情况，股动脉放血处死大鼠前收集大鼠24h尿样，处死后取股骨组织。采用氟离子选择电极法测定尿氟和骨氟含量；固相夹心酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清骨碱性磷酸酶（BALP）和抗酒石酸酸性磷酸酶一5b（TRACP一5b）含量；光镜下观察骨组织的形态学变化，测量骨皮质厚度、骨小梁宽度及密度变化；原位杂交技术和免疫组化方法检测成骨细胞Wnt3α、β-cateninmRNA和蛋白表达。结果大鼠氟斑牙检出率低氟组为66．7％（8／12），高氟组为91．7％（11／12），对照组为0．O％（0／12），组间比较差异有统计学意义（x。：21．6，P〈0．05）。尿氟和骨氟组问比较差异有统计学意义（F=36．57、467．02，P均〈0．05），其中低氟组[（2．06±0．64）mg／L、（632．33±123．21）mg／kS]和高氟组[（7．69±1．96）mg／L、（1088．75±156．16）mg／kg]高于对照组[（1．26±0．17）mg／L、（305．58±91．26）mg／kg，P均〈0．05]，高氟组高于低氟组（P均〈0．05）。血清BALP和TRACP-5b组间比较差异有统计学意义（F=89．57、7．68，P均〈0．05）。其中低氟组[（31．47±5．30）U／L]和高氟组[（54．61±2．27）U／L]，血清BALP明显高于对照组[（16．24±1．57）U／L，P均〈0．05]，高氟组高于低氟组（P〈0．05）；血清TRACP-5b，低氟组[（3．45±1．85）U／L）明显高于对照组[（1．264±0．23）U／L]和高氟组[（2．744±1．8）]U／L，P均〈0．05]。光镜下，高
- 陈锡山于燕妮易韦万良斌谢莹
- 关键词：氟中毒成骨细胞WNT3AΒ-链蛋白
- 氟对大鼠骨组织钙调神经磷酸酶mRNA及其蛋白表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察慢性氟中毒对大鼠骨组织中钙调神经磷酸酶（CaN）mRNA及其蛋白表达的影响，探讨CaN在氟骨症发病机制中的作用。方法将36只SD大鼠按性别和体质量分为3组：对照组（饮水含氟〈0．5mg／L）、低氟组（饮水含氟5．0mg／L）、高氟组（饮水含氟50．0mg／L），每组12只。实验6个月后股动脉放血处死大鼠，收集血清，用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测骨钙素（BGP）。取大鼠股骨下端，用免疫组织化学法和原位杂交检测各组大鼠股骨组织中CaN蛋白及CaNmRNA表达。结果各组大鼠血清BGP水平比较，差异有统计学意义（均P〈0．05），与对照组（0．15±0．03）μg／L比较，低、高氟组血清BGP（1．99±O．62、2．384-0．16）μg／L明显升高（均P〈0．05），且高氟组明显高于低氟组（均P〈0．05）。各组大鼠骨组织CaN蛋白及mRNA相对表达水平比较，差异有统计学意义，与对照组（131．114-1．95、11l_82±2．39）比较，低、高氟组大鼠骨组织CaN蛋白（142．694-1．17、157．54±1．88）和mRNA表达（121．284-3．27、134．634-3．19）明显升高（均P〈0．05），且高氟组明显高于低氟组（均P〈0．05）。结论血清BGP可作为慢性氟中毒骨骼病变的代谢指标。氟可致大鼠骨组织CaNmRNA及蛋白表达水平增高，CaN可能参与氟引起的骨骼损伤的发生机制。
- 谢莹于燕妮万良斌陈锡山
- 关键词：氟中毒骨疾病
- 氟对大鼠骨组织Twist mRNA及其蛋白表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:观察氟对大鼠骨组织中Twist mRNA及其蛋白表达的影响,探讨Twist在氟中毒引起氟骨症发病中的作用。方法:36只SD大鼠按性别和体重随机分为3组,每组12只,组内雌雄各半;对照组自由饮用自来水,低氟组、高氟组分别饮用含氟水5 mg/L、50 mg/L;实验6个月后股动脉放血处死大鼠,采用氟离子选择电极法检测大鼠尿氟、骨氟含量;HE切片观察大鼠股骨下段骨组织病理学改变,测定骨皮质厚度、骨小梁宽度等骨形态学变化;采用原位杂交技术及免疫组织化学方法检测慢性氟中毒大鼠Twist mRNA及其蛋白表达水平。结果:与对照组比较,氟中毒组大鼠尿氟及骨氟含量明显升高,股骨远端骨皮质增厚、骨小梁数目增多、骨髓腔间隙变小等骨质硬化表现,形态学计量指标的差异有统计学意义(P<0.05),且随染氟剂量增加,以上病理改变逐渐加重;与对照组比较,染氟组Twist mRNA及其蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:氟可导致大鼠骨组织中Twist mRNA及其蛋白表达水平降低,Twist可能参与氟中毒引起的骨骼损伤。
- 万雯万良斌于燕妮万昌武官志忠
- 关键词：氟TWIST原位杂交
- NFATc1在氟中毒大鼠破骨细胞中表达意义被引量：3
- 2013年
- 目的探讨活化T细胞核因子(NFAT)在慢性氟中毒大鼠氟骨症破骨细胞中的作用。方法将36只SD大鼠按体重随机分为3组(每组12只,雌雄各半):对照组(饮水含氟<0.5 mg/L)、低氟组(5.0 mg/L)、高氟组(50.0 mg/L),实验8个月后股动脉放血处死大鼠,取大鼠股骨下端,抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)法进行破骨细胞分化鉴定;免疫组织化学法和原位杂交检测各组大鼠股骨组织中NFATc1蛋白及其mRNA表达。结果NFATc1在破骨细胞中表达阳性,与对照组[(135.90±1.03),(110.45±1.55)]比较,低氟组大鼠破骨细胞中NFATc1蛋白及mRNA[(156.81±1.26),(132.50±1.58)]表达均升高(P<0.05),高氟组大鼠破骨细胞中NFATc1蛋白及mRNA[(135.46±1.19),(110.26±1.37)]均呈下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论NFATc1可能是氟中毒氟骨症破骨细胞分化调节的重要环节。
- 谢莹于燕妮陈锡山万良斌
- 关键词：氟骨症破骨细胞
- 同源异型盒基因Dlx5在氟中毒骨代谢中作用被引量：4
- 2013年
- 氟是人体必需微量元素之一，是一种已知可影响骨形成的非激素因子，适量氟对人体具有重要生理功能，但长期摄人过量氟可引起以氟斑牙和氟骨症为主的慢性全身性疾病。成骨细胞活跃和骨转换加速是氟骨症特征性病变[1-2]。通过转录因子调节基因表达是控制细胞功能的重要机制之一，随着基因技术不断发展，在骨骼发育过程中关键转录因子也逐渐被发现，其中有些发挥着决定性作用。本文通过对Dlx5与骨代谢及氟骨症关系研究进展做一综述，为氟骨症防治提供参考依据。
- 万良斌于燕妮万昌武
- 关键词：氟中毒同源异型盒基因骨代谢
- 慢性氟中毒对大鼠骨组织Dlx5蛋白及其mRNA表达的影响被引量：7
- 2012年
- 目的观察慢性氟中毒对大鼠骨组织中转录因子Dlx5蛋白和mRNA表达水平的影响,探讨Dlx5在氟骨症发病机制中的可能作用。方法本研究用36只SD大鼠按性别随机分成3组,对照组(饮自来水,含氟<0.5mg/L)、低氟组(饮含氟5.0mg/L的自来水)、高氟组(饮含氟50mg/L的自来水),6个月后用氟离子选择电极法测定大鼠尿氟及骨氟含量,HE染色观察骨组织病理学改变,并采用原位杂交技术、免疫组织化学方法,对大鼠骨组织进行Dlx5蛋白及mRNA水平的定量分析。结果 HE染色显示染氟大鼠骨组织骨小梁增宽、骨皮质增厚等骨硬化表现;染氟大鼠骨组织Dlx5蛋白及mRNA表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(F低-蛋白=28.381,F高-蛋白=343.515,F低-mRNA=27.767,F高-mRNA=353.987,P均<0.05)。结论过量的氟可上调Dlx5蛋白及mRNA水平的表达,促进成骨细胞的增殖与分化,从而出现骨质硬化。
- 万良斌于燕妮万昌武谢莹陈锡山
- 关键词：氟中毒原位杂交技术免疫组化技术
