万兴旺
- 作品数：24 被引量：91H指数：6
- 供职机构：第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PTEN多克隆抗体制备和原发性肝癌组织PTEN蛋白表达的研究被引量：3
- 2003年
- 目的 :制备并鉴定抗PTEN(phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosome 10 )兔多克隆抗体 ,利用该抗体研究PTEN蛋白在原发性肝癌中表达的临床病理意义。方法 :以PCR扩增合成人PTEN全长cDNA序列 ;与 6组氨酸融合表达载体pPROEXHTb构建原核表达重组体 ,转染进大肠杆菌诱导融合蛋白表达后将其纯化 ;用融合蛋白免疫新西兰大白兔制备抗PTEN多克隆抗体 ,经Western杂交鉴定后用于免疫组织化学检测 6 0例肝癌组织中PTEN蛋白的表达。结果 :采用制备的兔多克隆抗体进行Westernblot的结果显示 ,在瞬时转染了pcDNA3 0 PTEN的MCF 7细胞裂解液中检测 1条相对分子质量约为 4 8× 10 3的特异性蛋白带 ,而转染了空载体pcDNA3 0的MCF 7细胞中未检测到该蛋白条带。免疫组化显示PTEN蛋白定位于肝细胞的胞质内 ,原发性肝癌组织内PTEN蛋白表达阳性率为4 8 33% ,显著低于对应的癌旁肝组织内 10 0 %的检出阳性率。PTEN蛋白的表达水平与肝癌患者的病理分级和有无癌栓显著相关。结论 :获得了作用特异的PTEN兔多克隆抗体 ,该抗体可应用于研究PTEN在肝癌组织中的表达分析。
- 万兴旺王红阳江明何雅琴曹慧芳刘淑琴唐亮邱秀华吴孟超
- 关键词：肝肿瘤PTEN蛋白免疫组织化学
- 一组肝癌相关基因的克隆鉴定与功能研究
- 王红阳曾锦章傅骁勇王征旭万兴旺洪毅刘淑琴邱秀华曹惠芳唐亮吴孟超
- 该研究进行了大规模肝癌相关基因的筛选，获得一批经临床样品验证的、有重要功能意义的新基因。在国际上首次报道了3个新的肝癌相关基因HCCA1、HCCA2和HCCA3，研究了这些基因在肝癌中的表达情况及病理学意义，这些基因在肝...
- 关键词：
- 关键词：原发性肝癌基因克隆鉴定信号转导
- p27^kipl在PTEN抑制肝癌细胞生长增殖中的可能作用
- 2003年
- 目的 研究PTEN对肝癌细胞生长增殖能力的影响并探讨p27^kipl在其中的可能作用。方法 采用脂质体转染法建立稳定表达野生型PTEN的肝癌细胞。采用MTT比色法和软琼脂克隆形成法研究PTEN基因转染对肝癌细胞生长增殖能力的影响。p27^kipl的表达水平采用Northern blot和Western blot检测。结果 PTEN稳定表达的Huh-7细胞增殖和软琼脂板克隆形成能力显著低于空白细胞和转染了空载体的克隆化细胞(P<0．05)，而p27^kipl表达水平则显著高于对照细胞和转染了空载体的克隆化细胞(P<0．05)。结论 PTEN上调Huh-7细胞内p27^kipl表达水平，并抑制肝癌细胞的生长增殖能力。PTEN可能在原发性肝癌的发生过程中起重要的作用。
- 万兴旺何雅琴曹慧芳刘淑琴唐亮邱秀华吴孟超王红阳
- 关键词：肝癌细胞增殖PTEN基因P27^KIPL
- 抑癌基因PTEN在人原发性肝细胞性肝癌中的表达、突变及其生物学意义
- 原发性肝细胞性肝癌（简称原发性肝癌，HCC）是我国最常见、最具有危
害性的恶性肿瘤之一，其发生和发展是一多基因参与和受多因素影响的复杂过
程。由蛋白质酪氨酸激酶和蛋白质酪氨酸磷酸酶...
- 万兴旺
- 关键词：原发性肝癌抑癌基因PTEN突变
- 文献传递
- 吗啡依赖及戒断对大鼠强啡肽原mRNA表达的影响
- 万兴旺黄矛李万亥由振东
- 关键词：吗啡依赖戒断
- 人原发性肝癌组织内抑癌基因PTEN的突变检测被引量：3
- 2003年
- 目的 检测人原发性肝细胞性肝癌(HCC)组织中抑癌基因PTEN的突变。方法 采用PCR—SSCP技术和DNA测序技术检测60例HCC组织中PTEN的突变。结果 在60例配对HCC标本中，发现了共6个突变位点的存在。其中，出现在外显子内的突变有1个，即在31B号标本第4外显子中5’—侧翼下游13bP处检测到C→T的突变(89031C→T)，该突变导致了PTEN蛋白第84伉氨基酸由精氨酸变为赖氨酸。另外5个突变均位于内含子中，包括在34B号标本的第4外显子3’-侧翼下游106bP处的5碱基(AATAG)缺失突变、在9B号标本的第4外显子3’—侧翼下游67bP处检测到的一个G→T点突变(89125G→T)、在33B号标本的第6外显子3’—侧翼下游58bP处检测到的一个T→A点突变(110285T→A)、在44B号标本的第8外显子5’—侧翼上游29bP处检测到的一个C—T点突变(118833C→T)、在22B号标本的第8外显子5’—侧翼上游82bP处检测到一个A→C点突变(118780A→C)。在我们选择的SK—HEP—1、HePG2、Huh—7、ChangliVer和WRL68肝脏细胞中未检测到PTEN基因的突变。结论 肝癌组织中PTEN突变可能参与了原发性肝癌的形成。
- 万兴旺江明邱秀华谈冶雄严中华洪毅王红阳吴孟超
- 关键词：原发性肝细胞性肝癌抑癌基因DNA测序技术
- 绞股蓝总皂苷对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响被引量：16
- 2003年
- 目的:研究绞股蓝总皂苷(GPs)对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响。方法:36只大鼠随机分为正常对照组、肝纤维化组和GPs组3组,每阻各12只。采用人血清白蛋白攻击注射大鼠建立免疫性肝纤维化模型,GPs治疗组大鼠则在连续30 d给予白蛋白攻击注射的同时给予0.5 mg GPs。采用全自动生化仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)水平以评价肝功能,应用放射免疫法(RIA)检测血清中透明质酸(HA)、Ⅲ型胶原(PCⅢ)和层粘蛋白(LN)含量以评价肝纤维化程度,并以大鼠肝组织切片病理变化验证。结果:白蛋白攻击注射可显著升高肝纤维化大鼠血清中ALT、TBIL、TBA水平和HA、PCⅢ、LN水平(P<0.01,P<0.05)。GPs治疗可显著降低大鼠血清中 ALT、TBIL、TBA水平和HA、PCⅢ和LN水平(P<0.01,P<0.05)。GPs还可显著减少白蛋白攻击所致的胶原纤维生成,并改善大鼠肝纤维化病理损伤。结论:GPs可保护大鼠肝功能,抑制大鼠肝纤维化形成。
- 万丽万兴旺胡晋红
- 关键词：绞股蓝总皂苷免疫性肝纤维化肝功能肝纤维化谷丙转氨酶总胆红素
- N-硝基-L-精氨酸抑制吗啡耐受及依赖的强啡肽机制
- 该文研究的目的在于探讨强啡肽系统及NO在吗啡耐受及依赖形成中的作用,并就他们之间的关系进行研究,实验结果如下:1.大鼠每日皮下注射吗啡3次,初始剂量每次10mg/kg,按每日15mg/kg的剂量递增,6d即可形成较强的大...
- 万兴旺
- 关键词：身体依赖二氢埃托啡吗啡强啡肽N-硝基-L-精氨酸
- 抑癌基因PTEN在原发性肝癌中的表达及意义被引量：13
- 2003年
- 目的 研究抑癌基因PTEN在原发性肝癌发生过程中的作用及意义。方法 应用免疫组织化学和northern杂交分析60例原发性肝癌及对应癌旁组织中PTEN mRNA及PTEN蛋白表达情况,结合患者的临床病理资料分析PTEN在原发性肝肝癌中的意义。结果 PTEN蛋白明确定位于肝细胞胞浆内。60例HCC的癌组织中,PTEN蛋白阳性率为48.3％(29/60),明显低于癌旁肝组织的阳性率(100％)。PTEN蛋白在肝癌组织内的表达阳性率与肝癌的病理学分级、有无癌栓有关,PTEN蛋白在肝癌组织的Ⅰ～Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的阳性率分别为84.0％、23.8％、21.4％,无癌栓形成组PTEN蛋白表达的阳性率为55.56%,有癌栓形成组PTEN蛋白表达的阳性率为26.7％。Northern杂交显示,PIEN基因在肝癌细胞内存在四个转录子,其大小分别为5.5、4.4、2.4、1.8 kb。患者肝癌组织内PTEN mRNA的表达水平明显低于对应的癌旁肝组织。PTEN 5.5 kb和4.4 kb的转录子表达水平的降低与血清中AFP水平、有无癌栓、有无卫星灶及病理学分级有关;2.4 kb的转录子表达水平降低与患者有无癌栓、有无卫星灶有关;1.8 kb转录子表达水平的降低与临床病理学指标无关。结论 PTEN在肝癌的发生过程中可能起重要作用,其表达水平有可能作为反映肝癌进展和预后的病理学指标。
- 万兴旺王红阳江明何雅琴刘淑琴曹慧芳邱秀华唐亮吴孟超
- 关键词：抑癌基因PTEN原发性肝癌
- 吗啡依赖及戒断对大鼠强啡肽原mRNA表达的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 研究吗啡依赖形成及戒断对大鼠强啡肽原mRNA表达的影响。方法 将 18只Sprague Dawley雄性大鼠随机分为吗啡依赖组、吗啡戒断组和空白对照组 ,每组 6只。采用皮下注射吗啡建立大鼠吗啡依赖模型 ,初剂量为 10mg/kg ,以后每天增加 5mg/kg ,3次 /d ,连续 6天。应用放射性3 2 磷标记的三磷酸脱氧胞苷掺入标记探针法进行Northern印迹杂交技术检测三组大鼠强啡肽原mRNA的表达水平。结果 (1)连续 6天给予吗啡 ,吗啡依赖组大鼠下丘脑 (2 3 88± 1 6 2 )、纹状体(19 87± 2 0 3)及脊髓 (13 36± 1 4 6 )的强啡肽原mRNA相对含量分别低于对照组 (分别为 34 36±1 4 6、31 2 4± 2 83和 2 7 6 0± 2 89;均P <0 0 1) ,海马 (2 9 6 7± 3 2 3)强啡肽原mRNA相对含量高于对照组 (2 5 87± 1 74 ,P <0 0 5 ) ;(2 )给予纳洛酮处理 6 0min后 ,下丘脑 (10 2 2± 1 2 2 )、纹状体(5 90± 0 84 )、脊髓 (2 99± 0 4 8)强啡肽原mRNA的相对含量低于吗啡依赖组 (均P <0 0 1) ,而垂体强啡肽原mRNA(2 6 72± 1 79)却高于吗啡依赖组 (11 6 0± 2 2 4 ,P <0 0 1)。结论 慢性给予吗啡可影响大鼠强啡肽原mRNA的表达 ,从而参与吗啡依赖形成和戒断反应。
- 万兴旺黄矛何雅琴李万亥由振东路长林
- 关键词：吗啡依赖戒断强啡肽MRNA
