龚青
- 作品数：8 被引量：30H指数：2
- 供职机构：广州医学院基础学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- PPARγ基因RNA干扰质粒的构建与鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的构建表达细胞转录因子 PPARγ的 RNA 干扰(RNAi)质粒,为研究 PPARγ参与的细胞信号通路以及 PPARγ为靶点的基因治疗提供稳定转染的 RNA 干扰质粒。方法选取PPARγ基因的 19 nt 特异性序列,设计针对 PPARγ的 shRNA 序列,应用基因重组技术克隆到 pSilencer 1.0-U6表达载体中,用 EcoR I、Apa I 进行双酶切和 DNA 测序鉴定重组克隆 , 在脂质体的介导下将包含 PPARγ基因的 RNAi 重组载体转染前列腺癌细胞 PC-3。转染 48 h 后 , 收集细胞裂解液,Western blotting 分析对照组与转染组 PPARγ蛋白的表达水平。结果双酶切证实 shRNA 正确插入 pSilencer 1.0-U6 质粒,DNA 测序证实插入的序列正确;含 PPARγ基因的 RNAi 载体转染前列腺癌细胞 PC-3 细胞成功;Western blotting 结果显示,与空质粒对照组相比,转染组细胞 PPARγ表达下调。结论成功构建含人 PPARγ基因的 RNAi 载体,为研究 PPARγ参与的细胞信号通路提供了稳定转染的 RNA 干扰质粒。同时,阻断PPARγ的信号通路将为基因治疗提供一个较好的靶点,研究结果为以 PPARγ为靶点的基因治疗提供了有利工具。
- 龚青徐进文徐祖敏高国全
- 关键词：PPAR-ΓRNAI
- HIF-1α基因RNA干扰质粒在胃癌细胞中的构建与鉴定
- 2012年
- 目的:构建转录因子HIF-1α表达的RNA干扰(RNA interference,RNAi)质粒,为研究HIF-1α参与的细胞信号通路及以HIF-1α为靶点的基因治疗提供稳定转染细胞的RNAi.方法:选取HIF-1α基因的19nt特异性序列,设计针对HIF-1α的shRNA序列,应用基因重组技术克隆到pSilencer1.0-U6表达载体中,利用EcoRⅠ和ApaⅠ双酶切和DNA测序鉴定重组克隆.低氧条件下,将包含HIF-1α基因RNAi序列的重组载体转染人胃癌细胞SGC-7901,转染48h后,收集细胞裂解液,Western blotting分析低氧条件下对照组与转染组HIF-1α蛋白的表达水平.结果:双酶切证实shRNA插入pSilencer1.0-U6质粒,DNA测序证实插入的序列正确;HIF-1α基因RNAi质粒转染胃癌细胞SGC-7901成功;Western blotting结果显示与空质粒对照组比转染组细胞HIF-1α表达下调.结论:成功构建人HIF-1α基因RNAi质粒,为研究HIF-1α参与的细胞信号通路提供了稳定转染细胞的干扰质粒.同时,阻断HIF-1α的信号通路将为肿瘤基因治疗提供一个较好的靶点,研究结果为以HIF-1α为靶向的基因治疗提供了有利工具.
- 龚青方淑环高国全
- 关键词：低氧诱导因子1ΑRNA干扰胃癌
- NF-κB基因RNA干扰质粒的构建与鉴定
- 2012年
- 目的构建转录因子NF-κB的RNA干扰(RNAi)质粒,为研究NF-κB参与的细胞信号通路及以其为靶点的基因治疗提供稳定转染的RNAi质粒。方法设计针对NF-κB的shRNA特异性序列,应用基因重组技术克隆到pSilencer 1.0-U6表达载体,EcoRⅠ和ApaⅠ双酶切及DNA测序鉴定重组克隆;脂质体转染RNAi重组载体至前列腺癌细胞PC-3后,Western blot分析各组NF-κB蛋白表达水平。结果双酶切和DNA测序证实shRNA正确插入pSilencer 1.0-U6质粒;Western blot结果显示与空质粒对照组比较NF-κB转染组细胞NF-κB表达明显下调。结论成功构建人NF-κB基因RNAi质粒,为研究NF-κB参与的细胞信号通路提供了稳定转染细胞的干扰质粒,为靶向NF-κB的基因治疗提供了有力工具。
- 方淑环龚青
- 关键词：核因子-ΚBRNA干扰质粒
- 藏红花素诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及其作用机制被引量：16
- 2009年
- 目的:研究藏红花素对HeLa细胞的促凋亡作用和机制。方法:设置0、0.2、0.4及0.8mmol/L4个浓度梯度,MTT法分析不同浓度藏红花素对HeLa细胞增殖的影响;设置空白阴性对照及秋水仙素(10μg/L)阳性对照,向HeLa细胞培养物分别加入0.4和0.8mmol/L的藏红花素,培养48h后用PI/AnnexinⅤ双染法分析其凋亡情况;1.6mmol/L藏红花素作用于HeLa细胞72h后,蛋白质印迹法检测Caspase-3的切割。结果:MTT实验分析显示,在0、0.2、0.4及0.8mmol/L浓度下HeLa细胞存活率分别为1、0.964、0.796和0.586。藏红花素显著地抑制HeLa细胞生长,P<0.05;各浓度组间均差异有统计学意义,P<0.05。PI/AnnexinⅤ双染法、流式细胞仪检测显示,阴性对照组、10μg/L秋水仙素阳性对照组、0.4及0.8mmol/L藏红花素处理组的细胞凋亡率分别为3.64%、15.99%、4.86%和9.28%,藏红花素促进HeLa细胞凋亡。蛋白质印迹法检测显示,藏红花素促进HeLa细胞Caspase-3切割。结论:藏红花素可明显地抑制HeLa细胞生长,并通过增加HeLa细胞Caspase-3切割促进其凋亡。
- 龚青石丁波蔡卫斌杨中汉谭维格廖彩韵彭超刘畅高国全杨霞
- 关键词：HELA细胞细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- 双语教学在生物化学教学中的应用
- 2012年
- 双语教学是我国高等教育课程教学改革的一个热点。本文就生物化学双语教学的应用现状、存在问题、策略等方面进行探讨,希望能够为双语教学的模式优化提供参考。
- 龚青
- 关键词：生物化学双语教学
- PEDF34抑制前列腺癌生长的双重作用及机制研究
- 本研究旨在探讨PEDF诱导肿瘤细胞凋亡的功能表位，明确PEDF34是否具有促进内皮细胞凋亡类似的促进前列腺癌细胞凋亡的效应和是否通过相同的死亡受体信号通路。本研究是从以下三方面展开：(1)运用基因工程方法获得PEDF、P...
- 龚青
- 关键词：血管生成前列腺癌分子机制
- 文献传递
- 香丹注射液的抗血管收缩效应及其机制被引量：1
- 2012年
- 目的观察香丹注射液的抗血管收缩效应,并且探讨其作用机制。方法利用体外血管条张力测定技术,分别用1 g/L(低剂量香丹组)及10 g/L(高剂量香丹组)香丹注射液预孵育大鼠胸主动脉体外血管模型20 min,并与对照组(以0.9%氯化钠溶液孵育20 min)比较,观察香丹注射液的抗血管收缩功能。以棉签去除32条血管环的内皮细胞(E-组),观察10 g/L香丹注射液对E-组的抗收缩效应,并与未去除内皮细胞组(E+组)进行比较。分别以四乙胺(TEA)10 mmol/L(TEA组)或磷酸盐缓冲液(PBS组)预作用20 min,再加入10 g/L香丹注射液预孵育血管环20 min后,观察并比较血管环的收缩反应率。结果高剂量香丹组与低剂量香丹组间血管环对0.01、0.1、1、10μmol/L去甲肾上腺素(PE)的收缩反应率的差异均无统计学意义(P值均>0.05),但均显著高于对照组(P值均<0.05)。10 g/L香丹注射液处理后,E^+组与E^-组间血管环对0.01、0.1、1、10μmol/L PE的收缩反应率的差异均无统计学意义(P值均>0.05),但均显著低于对照组(P值均<0.05)。TEA组的血管环对0.01、0.1、1、10μmol/L PE的收缩反应率均显著高于PBS组(P值均<0.05)。结论复方香丹注射液具有抗血管收缩的效应,这一作用呈非内皮依赖性,与开放钾离子通道有关。
- 龚青刘海梅付思莹朱丽娟许洁安梁荣裕李灼根徐进文
- 关键词：香丹注射液血管收缩钾离子通道
- 淫羊藿苷对卵巢切除大鼠胸主动脉内皮舒血管功能的影响被引量：10
- 2012年
- 目的研究淫羊藿苷对卵巢切除大鼠胸主动脉内皮舒血管功能的影响。方法将40只雌性Sprague-Dawley大鼠分为4组:对照假手术组(con)、卵巢切除组(ovx)、高剂量淫羊藿苷干预组(hica)、低剂量淫羊藿苷干预组(lica)。10周后检测不同浓度乙酰胆碱、硝普钠对各组大鼠胸主动脉的舒张效应并检测各组大鼠血脂水平。结果卵巢切除后给予高剂量及低剂量的淫羊藿苷均能显著降低大鼠血清中总胆固醇水平。补充不同剂量淫羊藿苷均能改善乙酰胆碱对大鼠胸主动脉环的舒张效应。结论淫羊藿苷可改善更年期大鼠模型胸主动脉内皮舒血管功能。
- 龚青刘海梅朱丽娟丁文婷周乐全徐进文
- 关键词：淫羊藿苷绝经卵巢切除
