黄玉敏
- 作品数：18 被引量：43H指数：5
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- 多步离心法提取K526细胞外泌体被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨多步离心提取K526细胞外泌体的实验方法。方法:选用白血病细胞株K562细胞为研究对象,取其培养上清液,经多步骤离心获取提取物,然后进行形态和蛋白成分分析。结果:形态和蛋白成分分析证实所提取到的物质正是K526细胞外泌体。结论:多步离心是一种方便实用的提取外泌体的方法。
- 陈绍倩杜英王鑫顾巧丽黄玉敏董子明
- 关键词：外泌体K562细胞离心
- 新型趋化因子对肿瘤细胞的影响被引量：1
- 2006年
- 目的探讨新型趋化因子CKLFSF8对人白血病细胞株增殖的影响。方法RT-PCR检测CKLFSF8基因在细胞株K562中的表达;利用脂质体将CKLFSF8转染K562;倒置显微镜观察细胞生长,MTT法检测CKLFSF8基因转染前后肿瘤细胞增殖的变化。结果细胞生长过程中可测到CKLFSF8表达;CKLFSF8转染对K562的增殖有抑制作用,与空白对照组和空质粒组有显著性差异(P<0.05);结论CKLFSF8基因转染对人白血病细胞株K562的增殖有明显抑制作用,可望在肿瘤治疗中发挥重要作用。
- 徐辉田培玲黄玉敏
- 关键词：趋化因子K562细胞增殖肿瘤治疗
- 新型人趋化素样因子超家族成员8对肿瘤细胞增殖和EGFR表达的影响被引量：5
- 2006年
- 目的:研究新型细胞因子CKLFSF8对肿瘤细胞增殖及EGFR表达的作用。方法:首先利用RT-PCR了解CK-LFSF8基因在肿瘤细胞株BGC823和K562中的表达,然后在脂质体介导下将CKLFSF8基因转染这两种肿瘤细胞,倒置显微镜观察细胞生长,MTT法检测细胞增殖,免疫细胞化学法检测肿瘤细胞中EGFR的表达。结果:两种肿瘤细胞生长过程中均可测到CKLFSF8基因的表达。转染CKLFSF8后对BGC823和K562的增殖均有抑制作用,与空白对照组和空质粒组有统计学意义(P<0.05);CKLFSF8转染前后BGC823和K562细胞EGFR阳性率对比有统计学意义(P<0.05)。结论:CKLFSF8基因转染对肿瘤细胞的增殖和EGFR的表达有明显抑制作用,可望在肿瘤治疗中发挥重要作用。
- 黄玉敏杜英
- 关键词：肿瘤细胞增殖EGFR
- K562细胞外泌体诱导特异性CTL生成的研究被引量：7
- 2006年
- 为了研究人白血病细胞株K562细胞分泌的外泌体(exosomes)及K562细胞总RNA刺激人树突状细胞(DC)分泌的外泌体能否诱导出K562细胞特异性CTL,采用四步离心法提取K562细胞及K562细胞总RNA刺激人树突状细胞的培养上清液中的外泌体,并诱导CTL生成,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对K562细胞的杀伤作用。结果显示K562细胞外泌体和K562细胞RNA刺激的DC和外泌体均能明显促进对K562细胞的杀伤活性,与未经外泌体作用的对照组相比有显著性差异(P<0.05)。外泌体作用后对K562细胞的杀伤作用明显比对HL-60细胞的杀伤作用强,其差异有显著性(P<0.05)。结论K562细胞外泌体能够诱导出特异性抗白血病细胞的免疫反应。
- 陈绍倩杜英王鑫顾巧丽黄玉敏董子明
- 关键词：K562细胞树突状细胞外泌体细胞毒T淋巴细胞
- 新型细胞因子CKLFSF8体外转染对肿瘤细胞生物学功能的影响
- 目的
趋化因子是由免疫活性细胞、巨噬细胞、内皮细胞、成纤维细胞及一些肿瘤细胞合成分泌的一类小分子多肽，分子量约为8～10kD。现已发现50余种，属细胞因子中的最大家族。它具有激活和趋化白细...
- 黄玉敏
- 关键词：趋化因子转染肿瘤治疗
- 文献传递
- 新型人趋化素样因子超家族8对人白血病细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响被引量：4
- 2007年
- 本研究探讨新型趋化因子CKLFSF8对人白血病HL-60细胞的增殖和表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,应用RT-PCR方法检测CKLFSF8基因在HL-60细胞中的表达;利用脂质体将CKLFSF8基因转染到HL-60细胞,在倒置显微镜下观察细胞生长;MTT法检测细胞的增殖程度;免疫细胞化学法检测CKLFSF8基因转染前后HL-60细胞EGFR的表达。结果表明:在细胞生长过程中可检测到CKLFSF8表达;CKLFSF8基因转染前后HL-60细胞的增殖受到了明显的抑制,与空白对照组和空质粒组相比有显著性差异(P(0.05);对比转染前后细胞EGFR表达的阳性率具有显著性差异(P(0.01)。结论:CKLFSF8基因转染对白血病细胞HL-60的增殖和EGFR的表达有明显抑制作用。
- 陈绍倩杜英黄玉敏王鑫顾巧丽董子明
- 关键词：HL-60细胞细胞增殖EGFR
- 人脐静脉内皮细胞分离鉴定及其膜分子的表达
- 2012年
- 背景:肿瘤微环境作用于血管内皮细胞,影响其膜表面分子的表达,与肿瘤的生长、转移及免疫逃逸作用相关,但迄今相关机制尚不完全清楚。目的:分析肿瘤微环境下血管内皮细胞的膜表面分子表达量变化。方法:原代分离培养人脐静脉内皮细胞,采用不同肿瘤培养上清,用不同时间进行诱导。记录培养血管内皮细胞形态;利用免疫组织化学方法,鉴别Ⅷ因子相关抗原;荧光实时定量PCR法测定其膜表面分子mRNA表达量。结果与结论:肝癌smmc7721细胞培养上清处理后,内皮细胞抗原提呈会随着时间延长减弱,黏附白细胞能力随着时间延长而变化。胃癌SGC7901细胞培养上清处理后内皮细胞后,抗原提呈能力无明显变化;黏附能力有关分子中,CD31和细胞间黏附分子1表达降低,CD62E表达增高。说明肿瘤微环境可能通过上述黏附分子和抗原提呈分子表达的变化影响血管内皮细胞的相应功能。
- 杨晶李倩如黄玉敏徐虹赵九洲杜英
- 关键词：肿瘤微环境黏附分子抗原提呈抗原提呈脐静脉内皮细胞
- 胶质瘤RNA致敏的人脐血树突状细胞诱导细胞毒T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用被引量：4
- 2006年
- 目的:制备人脐血来源的树突状细胞(DCs),用胶质瘤RNA诱导其成熟,并观察DCs诱导细胞毒T淋巴细胞(CTL)体外杀伤肿瘤细胞的活性。方法:以rhGM CSF、IL4诱导人脐血单个核细胞向DCs分化并鉴定。提取胶质瘤RNA与DCs混合,使DCs致敏,未致敏的DCs为对照组。观察细胞形态并检测致敏前后DCs的表型。将DCs与外周血T细胞共培养,以胶质瘤细胞为靶细胞,采用MTT比色法检测T细胞抗肿瘤活性差异。结果:人脐血单个核细胞于诱导第5d呈现典型的DCs形态;经rhGM CSF、IL4诱导培养后,CD86、CD11c、CD54、MHCⅠ、MHCⅡ类分子表达与培养前比较均明显增高(P<0.01)。负载抗原后,MHCⅠ和CD54表达与负载抗原前相比进一步增高(P<0.05)。以DCs诱导活化的T细胞与胶质瘤细胞共培养可使胶质瘤细胞的生长受到抑制,并最终导致其死亡;杀伤率与未负载抗原的对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:人脐血单个核细胞在细胞因子的诱导下扩增并分化为DCs。经抗原致敏后,能增强淋巴细胞对相应肿瘤细胞的体外杀伤效应。
- 徐虹黄玉敏孙蕾阮丽荣杜英
- 关键词：树突状细胞胶质瘤RNA细胞毒
- 3T3-F442A细胞培养弓形虫最佳条件的探索
- 2008年
- 目的:研究不同浓度的胰岛素及D-葡萄糖对弓形虫在3T3-F442A细胞内分裂增殖的影响,并确定不同条件下弓形虫的生长活力,探索弓形虫生长最佳条件。方法:采用细胞培养及细胞计数单因素方差分析方法研究不同时间内胰岛素及D-葡萄糖对弓形虫在3T3-F442A细胞内分裂增殖的影响,并采用MTIT方法确定不同条件下弓形虫的生长活力。结果:浓度为10^(-2)μg/ml^10^(-1)μg/ml胰岛素和浓度为4.5 g/L葡萄糖相结合共同作用时,弓形虫3T3-F442A增殖率达到最大,其生长活力为最高。当DMEM中不合D-葡萄糖时,胰岛素则对弓形虫的生长所起的作用较差。结论:胰岛素对弓形虫在细胞中生长具有剂量促进效应,表现在低浓度的胰岛素对弓形虫的生长发育具有促进作用,而高浓度的胰岛素则对弓形虫的生长起抑制作用。D-葡萄糖作为一种能源,也是细胞内弓形虫生长不可缺乏的。
- 朱沙李付广李三强王娜唐悦黄玉敏
- 关键词：弓形虫D-葡萄糖胰岛素
- 人胃癌BGC823细胞RNA转染脐血树突状细胞分泌的exosomes对T细胞增殖及杀瘤活性的影响
- 2007年
- 目的:探讨肿瘤细胞RNA转染脐血树突状细胞(DCs)分泌的exosomes对细胞毒T细胞(CTL)特异性抗肿瘤作用的影响。方法:分离脐血单个核细胞,经干细胞因子(SCF)、粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)诱导和BGC823 RNA转染形成成熟DCs,收集DCs培养上清,采用超速离心法分离exosomes,并用透射电镜、SDS-PAGE和Western blot进行鉴定;利用MTT比色分析法观察exosomes诱导T细胞增殖和CTL的杀瘤活性。结果:经诱导和BGC823RNA转染后DCs分泌的exosomes表达MHC-Ⅱ、CD54、CD86,对T细胞的刺激指数(SI)为(2.53±0.09),CTL杀瘤活性(64.92±0.37)%,较转染前的(1.26±0.07)和(35.28±0.16)%均增高(P<0.01)。结论:从脐血中诱导的DCs经肿瘤细胞RNA转染后分泌的exosomes,能在体外活化T细胞,有望成为新型非细胞结构的DCs亚单位疫苗。
- 杜英李倩如李付广黄玉敏孙蕾董子明
- 关键词：树突状细胞BGC823EXOSOMES脐血
