公共文化服务平台

Anti-HER2-ScFv-GFP融合蛋白靶向结合体外乳腺癌细胞表面受体的研究被引量：2: 2011年; 为了研究不同表达系统获得的携带绿色荧光抗HER2单链抗体(Anti-HER2-ScFv-GFP)是否既可靶向结合HER2阳性乳腺癌细胞表面,也可通过观察绿色荧光变化直接判断抗体结合乳腺癌细胞表面后细胞的动态变化,在前期成功构建两种表达系统的基础上,利用Ni^(2+)-NTA亲和层析法纯化来源于真核表达系统pFAST Bac to Bac HT A/Tn-5B1-4和原核表达系统pBAD His B/TOP10的融合蛋白Anti-HER2-ScFv-GFP,设置HER2阳性细胞SKBR3为实验组、HER2阴性细胞MCF7为对照组,分别与之混合24 h后,1×PBS洗脱细胞3次,激光共聚焦显微镜观察到两种不同表达系统获得的融合蛋白在HER2阳性细胞SKBR3表面分布均有绿色荧光,真核表达的蛋白结合效率明显高于原核表达的蛋白,SKBR3结合高浓度的融合蛋白后细胞表现出皱缩,绿色荧光明显增强,而两种不同来源的融合蛋白与HER2阴性MCF7混合后均易被洗脱。GFP标准品与SKBR3混合后也容易被洗脱。实验表明构建的携带绿色荧光抗HER2单链抗体同时具有靶向结合和报告作用两方面的功能。; 高国辉黄奇迪王金丹杨纪锋包兵兵胡孝渠

Anti-HER2 ScFv-GFP融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其靶向结合乳腺癌细胞的初步分析被引量：2: 2011年; 目的:构建原核表达系统诱导获得携带绿色荧光的抗人表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor 2,HER2)单链抗体,分析其靶向结合HER2阳性肿瘤细胞的功能,探讨其应用于HER2阳性肿瘤分子诊断与靶向治疗的可能性。方法:将绿色荧光蛋白基因与鼠源性人抗HER2单链抗体基因拼接成融合基因anti-HER2 ScFv-GFP,构建原核表达载体重组子pBAD His B/anti-HER2-ScFv-GFP,转入大肠杆菌E.coli TOP10诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot法鉴定,Ni2+-NTA亲和层析法纯化获得目的融合蛋白。将不同浓度的融合蛋白anti-HER2 ScFv-GFP分别与HER2阳性的乳腺癌细胞SKBR3、HER2阴性的MCF7混合,观察绿色荧光在不同癌细胞表面的分布。结果:成功获得长度为1 539 bp的融合基因,原核表达系统pBAD His B/anti-HER2-ScFv-GFP/TOP10成功构建并表达携带绿色荧光的抗HER2单链抗体,融合蛋白相对分子量大小约60 kDa。HER2阳性的SKBR3细胞表面有明显绿色荧光,细胞有皱缩现象,而HER2阴性MCF7被洗脱后无荧光。结论:携带绿色荧光的抗HER2单链抗体能牢固结合在HER2阳性的乳腺癌细胞SKBR3表面,绿色荧光可以起到报告作用。; 高国辉黄奇迪王金丹杨水兵杨娟张凤立胡孝渠; 关键词：绿色荧光蛋白融合蛋白

MicroRNA-155对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖和迁移的影响及其机制研究: [目的]探讨miRNA-155对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响，研究MiRNA-155影响乳腺癌细胞功能改变的作用机制.方法：通过转染技术建立过表达及缺表达miRNA-155的乳腺癌MDA-MMB-231细胞系，并用Re...; 张玮郑书荣黄奇迪季倩青郭贵龙; 关键词：乳腺癌细胞细胞增殖细胞迁移 SOCS1

miR-155反义寡核苷酸对乳腺癌HS578T细胞增殖和凋亡的影响被引量：2: 2011年; 目的:探讨微小RNA 155(microRNA-155,miR-155)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:设计合成全硫代磷酸化修饰的miR-155 ASO,通过LipofectamineTM2000(Invitrogen)转染于乳腺癌HS578T细胞。CCK-8法检测乳腺癌细胞转染后的增殖情况,流式细胞仪分析转染率并检测细胞凋亡情况。结果:流式细胞仪检测转染率达70.5%。CCK-8试验结果显示转染miR-155 ASO后,HS578T细胞存活数明显低于空白组和脂质体组。流式细胞仪检测显示转染miR-155ASO后,HS578T细胞凋亡数明显增加。结论:miR-155 ASO可抑制乳腺癌HS578T细胞增殖,并促进其凋亡。提示miR-155可能成为乳腺癌治疗的靶基因。; 张寅郑书荣张玮黄奇迪郭贵龙; 关键词：乳腺肿瘤反义寡核苷酸增殖凋亡

老年性乳腺癌的个体化治疗: 目的老年性乳腺癌患者缺乏更多的循证医学证据,治疗欠规范,如何提高老年乳腺癌的生存率及生活质量成为重要的研究课题。本研究旨在探讨老年性乳腺癌的个体化治疗。方法回顾性总结了2000年至2008年经我院诊治的106例70岁以上...; 黄奇迪郭贵龙郑苏荣张玮; 关键词：老年乳腺癌个体化治疗

乳腺癌组织中Crk蛋白的表达及其临床意义被引量：1: 2009年; 目的探讨Crk在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化方法检测Crk在125例乳腺癌和20例乳腺良性肿瘤组织中的表达,分析其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。结果Crk在乳腺癌组织中的阳性表达率为39.2%,明显高于在乳腺良性肿瘤中的表达(χ2=6.447,P=0.011),Crk表达与乳腺癌组织学分级(χ2=4.965,P=0.026)有关,与TNM分期(r=0.258,P=0.004)、淋巴结转移(r=0.261,P=0.004)和HER-2(r=0.287,P=0.021)呈正相关;Crk表达阳性组和阴性组的5年特异生存率分别为38.4%和63.4%,差异有统计学意义(P=0.018)。结论Crk蛋白在乳腺癌组织中表达上调,其高表达提示乳腺癌生物学恶性度较高,预后不良。对乳腺癌患者组织标本进行Crk检测,有助于指导乳腺癌患者的个体化治疗。; 朱进胡孝渠郭贵龙尤捷黄奇迪张筱骅; 关键词：乳腺肿瘤预后免疫组织化学

miR-155在乳腺癌组织中的表达及其临床意义被引量：11: 2010年; 目的探讨miR-155在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法收集2009年2月至6月乳腺癌手术切除标本45例，应用实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测肿瘤组织及正常乳腺组织标本中miR-155的表达水平，探讨其表达与乳腺癌临床病理参数间的关系。结果茎环RT—PCR检测miR-155表达的敏感性和特异性良好；miR-155在乳腺癌中相对表达量的中位值为0．360，显著高于其在正常乳腺组织中的表达（中位值0．135，P〈0．05）；miR-155的表达增高与TNM分期较晚（Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期的中位值分别为0．316、0．358和0．417）、淋巴结转移（转移组和非转移组的中位值分别为0．383和0．355）、高增殖指数（Ki67≤10％组和〉10％组的中位值分别为0．353和0．387）、雌激素受体阳性（阳性组和阴性组的中位值分别为0．367和0．318）及孕激素受体阳性（阳性组和阴性组的中位值分别为0．398和0．335）有关（P值均〈0．05）。结论miR-155在乳腺癌组织中表达增高，尤其是在雌、孕激素受体阳性的乳腺癌组织中表达增高更为明显。miR-155与乳腺癌的增殖、侵袭及转移密切相关，其可能成为乳腺癌治疗、预后判断的潜在牛物学指标。; 朱进胡孝渠郭贵龙张寅王瓯晨尤捷黄奇迪张筱骅; 关键词：乳腺肿瘤微RNAS MIR-155

MicroRNA-155对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖和迁移的影响及其机制研究: 目的:探讨miRNA-155对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响,研究MiRNA-155影响乳腺癌细胞功能改变的作用机制。方法:通过转染技术建立过表达及缺表达miRNA-155的乳腺癌MDA-MMB-231细胞系,并用Rea...; 张玮郑书荣黄奇迪季倩青郭贵龙; 文献传递

乳腺粘液腺癌的分子分型与临床病理特征的关系及临床意义: 目的探讨乳腺粘液腺癌(MBC)的分子分型与临床病理特征的关系及其临床意义。方法收集2004年1月至2012年4月我院收治的经手术并术后病理证实的乳腺粘液腺癌病例资料66例,回顾性分析了其临床表现、病理分型分期、治疗方法、...; 翟琪邹章勇黄奇迪郭贵龙; 关键词：乳腺粘液腺癌分子分型病理学预后; 文献传递

CC3／TIP30蛋白在乳腺癌中的表达及其与HER-2／neu基因的相关性研究被引量：12: 2012年; 目的分析CC3／TIP30蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义，并探讨CC3／TIP30与HER-2／neu的mRNA相关性。方法采用免疫组化EnVision二步法检测2004年1月至2005年1月手术治疗并病理证实的112例乳腺癌标本中CC3／TIP30、HER-2／neu蛋白的表达，分析其表达与临床病理特征及预后的相关性，同时应用化学合成靶向敲除CC3／TIP30mRNA的siRNA，并转染SK—BR-3细胞株48h后，应用real—timePCR法测定CC3／TIP30、HER-2／neu基因mRNA的表达水平。结果免疫组化显示CC3／TIP30蛋白在乳腺癌组织中表达与TNM分期、淋巴结转移、HER-2和分子分型相关（P=0．048、0．019、0．027、0．011），而与患者年龄、肿瘤大小，以及雌激素受体和孕激素受体表达状态无关。实时定量PCR结果示CC3／TIP30siRNA转染导致CC3／TIP30mRNA的表达下降，同时伴随着HER-2／neu基因mRNA水平的下降，差异有统计学意义（F=56．797，F=165．101；P均=0．000）。分子分型为HER-2阳性型的乳腺癌患者中CC3／TIP30蛋白表达阳性、阴性组患者5年总生存率差异有统计学意义（X^2=10．732，P=0．001）。结论CC3／TIP30蛋白表达缺失与乳腺癌的发生、发展有关，提示乳腺癌患者早期发生转移复发可能，可作为HER-2阳性型乳腺癌亚组分型的指标之一。; 黄奇迪胡孝渠万丽高国辉郑书荣尤捷郭贵龙; 关键词：乳腺肿瘤免疫组织化学聚合酶链反应

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

黄奇迪

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

黄奇迪

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈