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高远东
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
山东省农业科学院
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发文基金:
山东省自然科学基金
山东省科技攻关计划
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相关领域:
农业科学
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合作作者
王立群
东北农业大学生命科学学院
宋玲玲
山东省农业科学院
王洪梅
山东省农业科学院
李欣
山东省农业科学院
何洪彬
山东省农业科学院
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作者
1篇
仲跻峰
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高远东
1篇
何洪彬
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李欣
1篇
王洪梅
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宋玲玲
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王立群
传媒
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安徽农业科学
年份
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2011
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具有绿色荧光标记的表达T7 RNA聚合酶稳定细胞系的建立
被引量:1
2011年
[目的]建立具有绿色荧光标记表达T7 RNA聚合酶的稳定细胞系。[方法]从BL21(DE3)大肠杆菌中克隆出T7RNAP基因,定向克隆质粒FG12后,构建了表达T7 RNA聚合酶基因(T7)的Lenti-virus重组质粒FG12-T7 RNAP。用此重组质粒转染293T细胞,WB可检测出瞬时表达的T7 RNAP蛋白;利用辅助质粒对表达T7的非复制型Lenti-virus病毒进行体外包装,所获得的非复制型Lenti-virus病毒感染BHK-21细胞,利用GFP通过流式细胞分选仪筛选表达T7的细胞系,并利用WB检测基因的表达。[结果]通过WB检测出不同代次的阳性细胞中均能稳定表达目的基因T7 RNA聚合酶。[结论]T7 RNA聚合酶能顺利在真核细胞内表达,并在此基础上建立的稳定细胞系为RNA病毒体内拯救技术平台的建立奠定了基础。
宋玲玲
李欣
王洪梅
高远东
王立群
仲跻峰
何洪彬
关键词:
T7
真核表达
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