高琪乐
- 作品数：90 被引量：498H指数：13
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人雌激素β受体RNAi反转录病毒载体在人成骨样MG63细胞中的表达被引量：2
- 2012年
- 背景:目前已有较多关于雌激素α受体基因如何参与骨代谢的研究,而对雌激素β受体基因如何参与骨代谢的研究则相对较少。目的:构建人雌激素β受体RNAi反转录病毒表达载体,并通过病毒介导其在人成骨样MG63细胞中表达。方法:根据GeneBank数据库提供的雌激素β受体基因核苷酸序列,选择设计3条针对人雌激素β受体干扰靶序列,并与pRNAT-H1.4/Retro质粒定向连接,构建真核表达载体pRNAT-H1.4/Retro-雌激素β受体-shRNA,经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。将pRNAT-H1.4/Retro-雌激素β受体-shRNA经脂质体转染至293细胞包装成反转录病毒。将包装好的反转录病毒,以空白及非特异性shRNA作为对照,感染人成骨样MG63细胞株。结果与结论:3个连接了雌激素β受体-shRNA的重组质粒经酶切鉴定分析证实目的序列己插入到预计位点,符合设计要求,测序鉴定表明重组质粒中含有针对雌激素β受体基因目的序列,表明重组质粒构建成功。并经脂质体转染至293细胞后成功包装成反转录病毒。反转录病毒载体能高效、稳定的感染人成骨样MG63细胞株,感染效率为70%左右。包装后的3种雌激素β受体-shRNA反转录病毒均能高效、稳定的感染人成骨样MG63细胞,并显著抑制雌激素β受体的表达。其中以雌激素β受体-shRNA3为最佳的干扰序列。
- 王昱翔张宏其郭超峰唐明星刘少华邓盎高琪乐刘金洋吴建煌
- 关键词：雌激素受体Β人成骨样细胞反转录病毒载体
- 扩大的经椎弓根椎体楔形截骨技术治疗先天性重度胸椎角状后凸畸形被引量：6
- 2017年
- 目的 探讨应用扩大的经椎弓根椎体楔形截骨（expanding pedicle subtraction osteotomy,E-PSO）技术截骨矫形治疗先天性重度胸椎角状后凸畸形的可行性及其临床疗效.方法 回顾性分析2010年1月至2015年6月13例我院收治的先天性重度胸椎角状后凸畸形患者资料,男5例,女8例;年龄15～55岁,平均（34.9±20.5）岁.病变节段分布：T7～83例,T8～93例,T9～102例,T10～114例,T9～111例.术中使用E-PSO技术进行截骨矫形,将多个畸形椎体视为病椎复合体,在病椎复合体内两侧分别行楔形截骨,截骨平面下方与病椎复合体最邻近下一正常椎体的终板毗邻,截骨平面上方达病椎复合体最邻近上一正常椎体的终板毗邻,截骨完成后交替加压抱紧闭合.结果 所有病例均获得随访,随访时间10～42个月,平均32个月.术前节段后凸角为107.0°±3.5°,术后23.5°±1.5°,末次随访23.5°±0.2°.矢状面参数：术前胸椎后凸角（thoracic kyphosis,TK）为98.1°±7.6°,术后28.9°±3.0°,末次随访29.5°±0.1°;术前腰椎前凸角（lumbar lordosis,LL）为94.1°±1.5°,术后43.7°±1.3°,末次随访44.1°±5.3°;术前矢状面平衡（sagittal vertical axis,SVA）为（-0.6±39）mm,术后（1.6±7.9） mm,末次随访（6.0±0.7） mm.脊柱骨盆参数：术前骨盆入射角（pelvic incidence,PI）为28.9°±1.6°,术后31.7°±12.3°,末次随访31.9°±2.1°;术前骨盆倾斜角（pelvic tilt,PT）为17.7°±1.9°,术后13.4°±3.4°,末次随访13.1°±4.2°;术前骶骨倾斜角（sacral slope,SS）为11.3°±0.4°,术后18.2°±1.1 °,末次随访为18.7°±2.1°.术后及末次随访的矢状面参数、脊柱骨盆参数较术前均有明显改善,与术前相比,术后矢状面及脊柱骨盆各参数,除SVA外的差异均有统计学意义.至末次随访,均无明显矫正丢失,与术后相比,差异均无统计学意义.术前视觉模拟疼痛评分法（visual analogue scale,VAS）评分为（5.7±1.4）分,末次随访为（1.9±0.7�
- 张宏其肖力戈郭超峰唐明星刘金洋吴建煌邓盎王昱翔高琪乐
- 关键词：脊柱后凸胸椎椎体后凸成形术
- 宏基因二代测序技术对脊柱感染的诊断效率及预后的影响被引量：2
- 2022年
- 目的:脊柱感染是一种比较少见且治疗棘手的感染性疾病。由于经验性使用抗生素使多重耐药菌感染发生率增加,同时检测技术进步导致检出率增加,因此脊柱感染的发病率呈上升趋势。传统检测方法诊断脊柱感染存在敏感性低和耗时长等局限性。在脊柱感染的临床诊疗中,判断病原体的类型从而有针对性地使用抗生素一直是重点和难点。许多患者在脊柱感染早期因传统检测方法的局限性不能得到快速精准的诊断,造成诊断延迟,错过最佳治疗时间,给患者带来灾难性后果。临床上急需一种高特异度、高灵敏度、耗时少的检测脊柱感染病原体的技术。宏基因二代测序技术(metagenomic next-generation sequencing,m NGS)是近几年新兴的前沿技术,其可以检测样本中已知的所有病原体,已应用于诊断临床上非典型的、罕见的感染性疾病。本研究旨在分析mNGS技术在脊柱感染术后诊断病原体中的敏感度,以及其对预后的影响。方法:回顾性分析2019年1月至2021年12月中南大学湘雅医院收治的82例脊柱感染患者的临床资料,术前检测其外周血C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、降钙素原(procalcitonin,PCT),在术中取得患者病灶组织标本,并进行微生物培养、组织病理学检查和mNGS检测。根据mNGS检测结果,将82例患者分为针对用药组(n=71)和经验用药组(n=11)。术后定期随访,根据病理学及病原学检查结果,评价m NGS检测脊柱感染病原体的敏感度及其对预后的影响。结果:mNGS检测脊柱感染病原体的阳性率(86.59%,71/82)显著高于微生物培养(18.99%,15/79)和PCT检测(30.23%,13/43)。针对用药组与经验用药组的术前体温、白细胞计数、中性粒细胞比值和入院视觉模拟评分差异均无统计学意义(均P>0.05);术前是否使用抗生素对mNGS检测结果和微生物培养结果阳性率无明显影响(
- 郭超峰张广胡小江徐东宬唐博张宏其张宏其刘少华唐明星高琪乐
- 关键词：脊柱感染预后
- 小鼠脊柱结核模型的构建及椎体骨密度改变的初步研究被引量：3
- 2018年
- [目的]构建脊柱结核小鼠模型并分析其椎体的骨密度改变。[方法]60只8周龄雌性C57BL/6小鼠随机分成实验组和对照组,每组30只。实验组小鼠脊柱局部注射浓度为108CFU/ml的H37Rv标准菌株悬液0.1 ml,对照组注射生理盐水0.1 ml。饲养12周后取脊柱标本送Micro-CT扫描。获得三维松质骨图像后,评估两组小鼠椎体骨小梁数量及骨小梁厚度差异。[结果]共6只小鼠在Micro-CT上发现了脊柱破坏的病灶。破坏的椎体骨小梁数及骨小梁厚度显著低于未受累的椎体(t=-5.710,P<0.001)和对照组相同节段椎体(t=-6.771,P<0.001),脊柱结核小鼠的椎体平均骨小梁数量较对照明显下降(t=-4.716,P<0.001)。虽然病灶椎的总体骨小梁数量及厚度降低,但在病灶周围存在大量硬化骨形成,病灶局部骨小梁数量及厚度显著增高(t=8.987,P<0.001)。[结论]小鼠脊柱结核病椎平均骨小梁密度下降,但病灶局部骨小梁密度增高。
- 高琪乐张宏其郭超峰唐明星李艳冰易小平刘少华王昱翔邓盎肖力戈
- 关键词：脊柱结核小鼠模型骨小梁骨密度
- 分期后路短节段固定前路病灶清除植骨融合治疗儿童下腰椎结核
- 目的：探讨一期后路钉钩棒短节段内固定、二期前路病灶清除植骨融合术治疗儿童下腰椎结核的手术方法及疗效.方法：2004年5月～2008年2月共收治儿童下腰椎结核患者9例,其中男5例,女4例,年龄5～11岁,平均7.8岁.术前...
- 张宏其李劲松郭超峰林旻中高琪乐郭虎兵陈筱
- 关键词：下腰椎短节段固定
- Magerl技术治疗儿童寰枢关节旋转半脱位被引量：9
- 2016年
- 目的探讨Magerl技术治疗儿童寰枢关节旋转半脱位的可行性及其疗效。方法2004年12月至2014年9月收治儿童寰枢关节旋转半脱位患者63例，其中16例行后路经寰枢椎侧块关节UCSS空心螺钉固定（Magerl技术）、植骨融合术，男9例，女7例；年龄8-14岁，平均（11±2．3）岁。寰枢关节旋转脱位按Fielding分型：Ⅱ型10例，Ⅲ型6例。其中1例（6．3％）单纯表现为头晕，11例（68．8％）存在斜颈畸形；14例（87．5％）出现枕颈部疼痛；1例患者（6．3％）存在高位脊髓压迫症状。所有患者术前均行颅骨牵引，再行Magerl技术固定融合寰枢椎。采用寰枢椎张口位、颈椎侧位x线片及寰枢椎三维cT评估螺钉位置和植骨融合情况。临床疗效评价采用Symon和Lavender临床功能评定标准，影像学评价采用寰齿前间隙（atlas．densinterval，ADI）和脊髓有效空间（spaceavailableforthecord，SAC）。结果所有患者术中均顺利完成双侧UCSS螺钉固定，未发生神经、血管损伤等并发症。术后患者症状明显改善，无神经症状加重表现，影像学检查证实UCSS螺钉均通过寰枢椎侧块关节，所有置入螺钉位置准确，无寰枕关节活动受限。随访时间3—98个月，平均（38±14．6）个月。骨性融合时间为术后3-6个月。末次随访时临床功能改善率为93．8％。术后SAC较术前平均增加（6．06±1．29）mm，差异有统计学意义；末次随访时为（15．31±0．79）mm，与术后比较差异无统计学意义。术后ADI较术前平均减少（5．75±1．53）mm，差异有统计学意义；末次随访时ADI为（1．94±0．57）mm，与术后比较未见明显丢失。结论术前颅环弓牵引结合Magerl技术治疗儿童寰枢关节旋转半脱位是安全、有效的方法。
- 唐明星张宏其刘金洋王昱翔郭超峰刘少华邓盎高琪乐王龙杰郭强
- 关键词：寰枢关节脱位儿童内固定器脊柱融合术
- 后柱缩短钛网植骨治疗活动期胸腰段结核成角后凸被引量：1
- 2020年
- [目的]探讨后柱缩短钛网植骨治疗活动期胸腰段结核成角后凸的临床疗效。[方法]2010年1月~2016年12月,共对25例活动期胸腰段结核成角后凸患者行病灶清除后柱缩短钛网植骨术,总结分析围手术期、随访与影像资料。[结果]所有患者术中未出现严重并发症,均安全度过围术期。手术切口均达一期愈合。病例均获得随访,平均(36.25±6.32)月。末次随访时,25例患者VAS、ODI及JOA评分均显著改善(P<0.01)。影像方面,与术前相比,术后即刻局部后凸Cobb角、胸椎后凸角(TK)、腰椎前凸角(LL)、矢状面偏移(SVA)及骨盆倾斜角(PT)显著减小(P<0.05),而骨盆入射角(PI)和骶骨倾斜角(SS)显著增加(P<0.05)。与术后即刻相比,末次随访时上述指标无显著变化(P>0.05)。至末次随访时,25例患者无断钉断棒、拔钉等内固定失败情况,无钛网断裂、移位、沉降;所有患者结核病灶静止,达到骨性融合,无假关节形成。[结论]后柱缩短病灶清除钛网植骨技术是一种治疗活动期胸腰段结核成角后凸安全有效的方法。
- 李昱张宏其王昱翔郭超峰刘少华邓盎高琪乐徐鹏
- 关键词：后凸胸腰段
- 经后路多点锚定技术治疗Ⅰ型神经纤维瘤病伴营养不良性脊柱侧凸的临床疗效被引量：4
- 2015年
- [目的]探讨经后路多点锚定技术治疗Ⅰ型神经纤维瘤病伴营养不良性脊柱侧凸的临床疗效。[方法]回顾性研究2005年1月～2013年12月本科收治的Ⅰ型神经纤维瘤病伴营养不良性脊柱侧凸23例;年龄10～22岁,平均13.6岁;其中胸弯13例,胸腰双主弯4例,胸腰弯3例,双胸弯2例,腰弯1例;术前冠状面Cobb角48.9°～91.4°,平均68.3°;凸侧Bending相Cobb角40°～79.2°,平均57.4°;柔韧性8.3%～28.1%,平均15.7%;顶椎旋转度2°～3°,平均2.3°;矢状面胸椎后凸Cobb角46.4°～79.6°,平均58.2°,胸腰段后凸Cobb角21.1°～35.7°,平均28.3°。均采用经后路多点锚定技术进行矫形融合固定。[结果]随访12～96个月,平均52个月。术后冠状面Cobb角16.3°～46.7°,平均28.4°;顶椎旋转度1°～2°,平均1.2°;矢状面胸椎后凸Cobb角16.1°～38.3°,平均25.3°,胸腰段后凸Cobb角-4.3°～18.7°,平均8.9°;术后各指标均获得良好的矫正,侧凸矫正率为46.3%～74.1%,平均56.9%。末次随访时侧凸矫正丢失率仅3.1%,无神经系统并发症,仅1例假关节形成。[结论]经后路多点锚定技术治疗Ⅰ型神经纤维瘤病伴营养不良性脊柱侧凸可获得较满意的矫形融合效果。
- 邓盎张宏其郭超峰唐明星刘少华王昱翔高琪乐吴建煌刘金洋
- 关键词：神经纤维瘤病后路
- 单纯后路、单纯前后及前后联合术式治疗成人胸椎结核的5年以上随访疗效
- 数脊柱结核可通过保守治疗达到痊愈。但一些对化疗药物不敏感，合并后凸畸形及神经功能障碍的病人，则需要手术治疗。目前对于胸椎结核的手术选择争议较大。外科手术的目的是清除结核脓肿，坏死组织，重建脊柱稳定性，神经减压及后凸矫正。...
- 张宏其王龙杰唐明星刘金洋吴建煌高琪乐
- 关键词：胸椎结核后路内固定术
- 雌激素受体β基因沉默对人成骨细胞转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响被引量：5
- 2016年
- 背景:雌激素受体β基因参与骨代谢的研究较少,其对骨代谢的具体调节机制仍不清楚。目的:分析雌激素受体β基因沉默对人成骨细胞转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。方法:实验分3组:空白对照组(即h FOB 1.19,未感染任何反转录病毒)、阴性对照组(即含无效干扰片断雌激素受体β-sh RNA-nc)、最佳RNAi组(即ERβ-sh RNA-3)。将前期最佳RNAi组的雌激素受体β-sh RNA反转录病毒载体感染人成骨细胞,通过抗性筛选并扩大培养,利用MTT法检测雌激素受体β稳定抑制后对细胞增殖的影响;随后在雌激素干预下,通过Western blot技术检测雌激素受体β蛋白表达的稳定抑制效率,并使用半定量RT-PCR和Western blot技术检测雌激素受体β稳定抑制后对转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。结果与结论:(1)成功筛选出稳定感染ERβ-shR NA-3反转录病毒载体的人成骨细胞,MTT法检测显示雌激素受体β稳定抑制后对细胞的增殖没有明显影响(P>0.05);(2)在雌激素干预下,雌激素受体β蛋白的抑制率为(93.11±0.57)%(P<0.05),且雌激素受体β稳定抑制后对转化生长因子β1 mR NA和蛋白的上调率分别为(26.65±3.81)%和(23.79±3.76)%,骨形态发生蛋白2 mR NA和蛋白的上调率分别为(16.62±1.71)%和(18.08±3.20)%(均P<0.05);(3)结果提示雌激素受体β可能通过调控转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2的表达在骨代谢中发挥作用。
- 邓盎张宏其郭超峰王昱翔高琪乐唐明星刘少华刘金洋
- 关键词：雌激素受体Β成骨细胞骨形态发生蛋白2骨细胞人成骨细胞基因沉默雌激素反转录病毒
