高宗侠
- 作品数：15 被引量：50H指数：5
- 供职机构：安徽省立医院更多>>
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- 子宫颈上皮内瘤变模型及模型建立方法
- 子宫颈上皮内瘤变模型及模型建立方法，其特征是将子宫颈上皮内瘤变组织，埋植到免疫缺陷小鼠体内建立子宫颈上皮内瘤变模型。建模方法的特征是子宫颈上皮内瘤变组织分别取自阴道镜下活检并经病理科确诊的组织，接种在小鼠背部皮下；本发明...
- 凌斌周颖冯定庆沈国栋赵卫东李敏高宗侠朱园园
- 文献传递
- siRNA对白血病细胞株HEL中EDAG-1基因的干涉作用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨抑制胚胎发育相关基因-1(EDAG-1)的表达对白血病细胞株生长的影响及其机制。方法收集重组质粒转染包装病毒细胞的上清转染HEL细胞株,经嘌呤霉素筛选稳定抑制EDAG-1基因表达的细胞株,RT-PCR检测EDAG-1基因的抑制情况,运用MTT检测转染细胞的增殖能力,并将稳定转染的细胞株种植到裸鼠皮下检测成瘤情况。结果成功建立了抑制EDAG-1基因表达的HEL细胞株。与HEL/negative相比,HEL/siRNA细胞株增殖速度降低(P<0.05),接种裸鼠皮下的肿瘤生长明显减慢(P<0.05)。结论沉默EDAG-1基因的表达可以抑制白血病细胞株的增殖,提示EDAG-1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点。
- 周颖程勇高宗侠肖敏冯定庆沈国栋凌斌
- 关键词：EDAG-1RNA干扰白血病
- siRNA抑制SKOV-3细胞Her2/neu表达及细胞增殖的动物实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的:通过卵巢癌细胞株SKOV-3细胞增殖及动物荷瘤实验探讨siRNA沉默Her2/neu基因的表达效果。方法:靶向Her2/neu的siRNA经脂质体L ipofectAM INE2000介导转染到SKOV-3中,通过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her2/neu基因表达的SKOV-3/siRNA细胞株,通过RT-PCR和免疫组化方法检测Her2/neu基因抑制效果,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测各组细胞增殖水平并将SKOV-3/siRNA细胞接种到裸鼠皮下检测荷瘤情况。结果:建立了稳定抑制Her2/neu基因表达的细胞株SKOV-3/siRNA,RT-PCR和免疫组化结果显示Her2/neu基因表达受到较强抑制,MTT检测结果显示SKOV-3/siRNA组细胞增殖较SKOV-3明显下调(P<0.05),其接种在裸鼠皮下形成的肿瘤生长速度明显减慢(P<0.05)。结论:靶向Her2/neu基因的siRNA可以抑制卵巢癌细胞株SKOV-3在体外和体内增殖,有望成为卵巢肿瘤治疗的新途径。
- 程志祥周颖朱园园肖敏高宗侠祝怀平凌斌
- 关键词：HER2/NEU基因RNA干扰
- 宫颈癌盆腔淋巴结微转移分子检测及其意义被引量：1
- 2007年
- 目的:研究宫颈癌患者盆腔淋巴结人乳头状瘤病毒(HPV)和端粒酶活性的表达及其临床意义。方法:应用FQ-PCR和PCR-ELISA方法检测61例Ia^IIb期宫颈癌组织和盆腔淋巴结HPV载量和端粒酶活性表达,并与常规病理结果比较。同时取15例良性疾病患者的淋巴结作为阴性对照组;分析宫颈癌淋巴结转移与各种病理因素的关系。结果:宫颈癌淋巴结HPV16/18和端粒酶阳性率显著高于常规病理阳性率(P<0.01),对照组淋巴结HPV16/18和端粒酶均为阴性。常规病理阳性的淋巴结HPV16/18拷贝数和端粒酶活性高于病理阴性的淋巴结,但低于原发灶,差异有统计学意义。淋巴结HPV16/18和端粒酶表达呈显著正相关(r=0.60,P<0.01)。临床分期晚和癌灶浸润深的患者易发生淋巴结转移。结论:与常规病理相比,采用FQ-PCR和PCR-ELISA技术检测HPV和端粒酶活性表达能显著提高宫颈癌淋巴结微转移的检出率。
- 高宗侠凌斌赵卫东周颖冯定庆雷蕾
- 关键词：宫颈肿瘤人乳头瘤病毒端粒酶淋巴结微转移
- 血清催乳激素与抗心磷脂抗体联合检测在子宫内膜异位症诊断中的应用被引量：5
- 2007年
- 目的探讨联合检测催乳激素(PRL)和抗心磷脂抗体(ACA)在子宫内膜异位症(EMS)诊断中的应用价值。方法将90例EMS患者按美国生育学会(AFS)修正的分期法分为轻度组(Ⅰ/Ⅱ期)41例和重度组(Ⅲ/Ⅳ期)49例,以10例正常生育年龄妇女做为对照组。采用时间分辨荧光免疫法检测血清PRL,ELISA法检测血清ACA。结果(1)EMS轻度组和重度组血清PRL水平及ACA阳性率分别为(642.60±419.69)u/ml、(647.97±289.76)u/ml和63.4%、71.4%,差异无统计学意义(P>0.05),但均明显高于健康对照组(P<0.05)。(2)轻度组血清ACA阳性率34.1%,显著高于重度组和对照组(P<0.05)。结论联合检测血清PRL和ACA,有助于EMS的诊断和分期。
- 高宗侠凌斌吴大保姚凤球程志祥肖敏冯定庆高婷雷蕾
- 关键词：子宫内膜异位症催乳素抗体抗心脂
- 靶向Her2基因SiRNA对人卵巢癌细胞株SKOV-3顺铂敏感性的影响被引量：5
- 2007年
- 目的通过siRNA沉默Her2基因的表达探讨其对卵巢癌细胞株SKOV-3顺铂(DDP)敏感性的影响。方法靶向Her2的siRNA通过阳离子脂质体介导转染到SKOV-3中,经过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her2基因表达的SK-OV-3细胞株,通过RT-PCR方法检测各组SKOV-3细胞Her2基因的表达。应用四甲基偶氮唑蓝检测DDP对各组SKOV-3细胞增殖水平的影响,应用膜联蛋白V异-硫氰酸荧光素细胞凋亡试剂盒在流式细胞仪上检测DDP作用后各组SKOV-3细胞凋亡水平。结果建立了稳定抑制Her2基因表达的细胞株,SKOV3/siRNA-1组和SKOV3/siRNA-2组细胞Her2基因表达分别为对照组的53.8%和38.4%,而空载体组为92.3%。在DDP作用下SKOV3/siRNA-1和SKOV3/siRNA-2的细胞存活率在4 d时分别为67.7%±4.4%和66.4%±3.3%,与未转染对照组81.7%±1.3%和空载体组81.3%±1.4%比较差异有显著性(P<0.05)。FCM分析显示SK-OV3/siRNA-1和SKOV3/siRNA-2细胞的DDP诱导凋亡率分别为38.6%±1.1%和42.8%±1.4%,明显高于未转染组9.1%±0.8%和空载体组8.8%±0.7%,差异有显著性(P<0.05)。结论靶向Her2基因的siRNA可以增强卵巢癌细胞株SKOV-3对DDP的敏感性。
- 程志祥周颖朱园园肖敏高宗侠祝怀平凌斌
- 关键词：基因,ERBB-2顺铂
- ICP患者蜕膜NK细胞表型及杀伤活性的研究
- 2008年
- 目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者蜕膜自然杀伤(NK)细胞的数量、表型特征及杀伤活性,探讨其在ICP发病中的作用。方法选取确定ICP患者15例,正常晚期妊娠妇女15例,用流式细胞仪检测两组蜕膜组织中NK细胞数量及表型,用LDH法测定NK细胞杀伤活性。结果①正常晚期妊娠蜕膜组织中CD56+CD3-NK细胞占蜕膜单个核细胞(DMC)7.82%±3.3%,ICP患者蜕膜中CD56+CD3-NK细胞含量为38.15%±5.1%(P<0.05);②正常晚期妊娠蜕膜组织中CD56+CD16-、CD56+CD16+NK亚群含量明显低于ICP组,差异有显著性(P<0.05);③ICP组蜕膜组织中NK细胞杀伤活性高于正常晚期妊娠蜕膜组,差异有显著性(P<0.05)。结论NK细胞是妊娠晚期蜕膜组织中的主要淋巴细胞,其亚群失衡及功能异常可能是ICP发病的重要原因。
- 肖敏凌斌周颖赵卫东冯定庆高宗侠程志祥
- 关键词：蜕膜流式细胞术妊娠并发症
- 荧光定量PCR检测宫颈癌旁盆腔组织中HPV-DNA的临床意义被引量：5
- 2007年
- 目的探讨FQ-PCR检测宫颈癌旁盆腔组织中HPV-DNA对预测早期宫颈癌微小转移的意义。方法采用FQ-PCR方法,检测31例Ia-IIb期宫颈癌患者的原发灶及其癌旁组织(阴道切缘、宫旁切缘、盆腔淋巴结)中的HPV亚型和DNA拷贝数,并与患者术后组织病理学结果比较。结果31例癌旁组织HPV-DNA总检出率为58.1%,其中病理检测发生癌旁转移的7例患者均检测到HPV-DNA。宫颈原发灶、组织病理学阳性和阴性的癌旁组织HPV-DNA拷贝数分别为106.75±0.72,105.70±0.87和103.70±1.22,且它们之间有非常显著性差异(P<0.01)。结论癌旁组织检出HPV早于组织病理学发现转移,检测癌旁组织中HPV对早期微小转移具有提示意义,有助于发现组织病理学不易发现的早期隐匿性转移。
- 高宗侠凌斌周颖吴大保肖敏程志祥高婷沈国栋
- 关键词：人乳头瘤状病毒荧光定量聚合酶链反应微转移
- ICP患者外周血单个核细胞Th1及Th2细胞变化被引量：5
- 2007年
- 目的研究妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者Th1和Th2型细胞免疫反应的变化,从免疫学角度探讨ICP发病机制。方法采用流式细胞术,分别检测了20例重度ICP患者与20例正常晚期妊娠妇女的外周血单个核细胞和T细胞中Th1和Th2细胞所占的比例。结果重度ICP组外周血单个核细胞中IFN-γ+细胞比例为17.82%±3.43%,明显高于正常晚期妊娠组12.66%±2.34%(P<0.01),而IL-4所占的比例为1.17%±0.26%,低于正常晚期妊娠组1.37%±0.30%,差异有显著性(P<0.05);重度ICP组PB-MC中细胞因子Th1/Th2比率为16.00±4.66,显著高于正常晚期妊娠组9.89±2.82(P<0.01);重度ICP组外周血中T细胞分泌的Th1细胞比例为14.37%±1.38%,明显高于正常晚期妊娠组10.66%±1.18%(P<0.01),而Th2细胞比例1.05%±0.19%,低于正常晚期妊娠组1.24%±0.29%,差异有显著性(P<0.01);重度ICP组T细胞Th1/Th2比率为13.99±2.46,显著高于正常晚期妊娠组8.94±1.84(P<0.01)。结论重度ICP患者与正常晚期妊娠妇女比较,其体内表现为Th1型免疫反应增强,而Th2型免疫反应减弱。体内Th1/Th2细胞平衡紊乱可能与妊娠期肝内胆汁淤积症发生相关。
- 肖敏凌斌姚风球周颖赵卫东陈铮铮程志祥沈国栋高宗侠
- 关键词：TH1细胞TH2细胞
- 针对EDAG-1基因的siRNA抑制白血病细胞的生长及IL-8分泌被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨抑制胚胎发育相关基因-1(embryonic develop-associated gene1,EDAG-1)表达对白血病细胞株生长的影响及其机制。方法:将靶向EDAG-1基因的特异序列连接到逆转录病毒载体中,将脂质体介导的重组质粒转染包装产病毒细胞株PT67;收集细胞上清液转染HEL细胞株,经嘌呤霉素筛选获得稳定抑制EDAG-1基因表达的细胞株;RT-PCR法检测EDAG-1基因的抑制情况,MTT法检测转染细胞的增殖能力,同时采用RT-PCR和ELISA法检测转染后细胞中IL-8的表达水平。结果:成功构建获得靶向EDAG-1基因的反转录病毒载体,筛选获得抑制EDAG-1基因表达的HEL细胞株。EDAG-1基因被抑制的细胞株增殖速度降低,IL-8的分泌水平同时相应减低。结论:沉默EDAG-1基因的表达可以抑制白血病细胞株的增殖和IL-8的分泌,提示EDAG-1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点。
- 周颖程勇肖敏高宗侠程志祥冯定庆凌斌
- 关键词：小分子干扰基因肿瘤抑制基因
