马德星
- 作品数：73 被引量：88H指数：6
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学医药卫生更多>>
- EtAMA1蛋白特异亲和肽抑制鸡艾美尔球虫入侵宿主细胞的作用研究
- 研究目的筛选鸡柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)顶膜抗原AMA1(Et AMA1)胞外域重组蛋白(Ecto AMA1)亲和配体,并检测其在抗球虫感染中的作用与机理。材料方法以纯化复性的Ecto AMA1蛋白为靶蛋白,噬...
- 马德星黄宇晨陈文静李光昊
- 文献传递
- 三种鸡细胞因子mRNA实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：2
- 2013年
- 为建立鸡细胞因子SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank中三种重要的鸡细胞因子即ChIL-12、ChIL-15、ChIL-18的基因序列,以鸡3-磷酸甘油脱氢酶(ChGAPDH)基因为内参,设计特异引物扩增目的基因。将四种基因克隆至pMD18-T载体上,得到各自阳性克隆质粒,以四种阳性质粒为标准品建立标准曲线并进行熔解曲线分析以及灵敏性、特异性和重复性试验。结果显示,当标准品稀释度为1×102～1×1010 copies/μL时,四种基因的Ct值与浓度间具有良好的线性关系,相关系数均大于0.985。熔解曲线分析表明,产物为特异性单峰且重复性较好。应用建立的方法对堆型艾美耳球虫核酸疫苗pcDNA-Ea3-1E免疫的SPF雏鸡脾中ChIL-12mRNA和ChIL-18 mRNA的相对表达量进行检测,免疫组ChIL-12mRNA和ChIL-18mRNA的相对表达量均极显著高于空白对照组(P<0.01)。研究结果为ChIL-12、ChIL-15、ChIL-18的定量分析提供了技术平台。
- 高铭扬马春丽马德星李广兴张瑞莉
- 关键词：细胞因子SYBR实时荧光定量RT-PCR
- 一种优化的产肠毒素性大肠杆菌多价抗原基因序列及其在预防断奶仔猪腹泻中的应用
- 本发明公开了一种优化的产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)多价抗原基因序列及其在预防断奶仔猪腹泻中的应用，属于生物技术领域。本发明根据乳酸乳球菌密码子使用偏好，大片段合成了包含引起断奶仔猪腹泻的常见ETEC优势血清型的F4<S...
- 葛俊伟马德星李巍师东方赵鹏高菲夏爽关乃瑜谷珊珊崔文姜艳平任皓威
- 文献传递
- 鸡氨肽酶N蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究
- 2015年
- 试验参考Gen Bank上鸡氨肽酶N(g APN)基因序列(登录号为NM_204861.1)设计多对特异性引物,利用RT-PCR分段克隆g APN基因各段克隆产物并利用SOE-PCR将其进行连接,得到大小为2 906 bp的全长基因。利用原核表达载体p ET-30a(+)构建重组质粒p ET-g APN并转化E.coli Rosetta,经诱导表达得到大小为113 ku目的条带。以纯化g APN重组蛋白为免疫原制备兔抗g APN多克隆抗体,间接Elisa方法检测多抗血清效价为215。Western Blot试验证明,此多克隆抗体可以与原核表达的蛋白产生特异性条带,同时与18日龄鸡肾组织中获得的天然g APN蛋白样品有良好的反应性。间接免疫荧光试验显示,多克隆抗体可检测到pc DNA-g APN转染HELA细胞所表达的g APN蛋白。上述结果可为g APN蛋白的深入研究奠定基础。
- 李广兴李兰兰潘龙洪琴张恒杨巍黄小丹马德星张瑞莉杨贵君
- 关键词：多克隆抗体间接免疫荧光
- 鸡堆型艾美耳球虫3-1E基因真核表达质粒的构建及其体外表达
- 2010年
- 为了构建鸡堆型艾美耳球虫(E.acervulina)3-1E基因真核表达质粒,试验应用RT-PCR技术从E.acervulina子孢子中扩增出3-1E基因片段,将其连接到克隆载体pMD18-T中得到重组克隆质粒pMD18-3-1E,阳性克隆质粒经鉴定正确后将3-1E基因片段亚克隆入真核表达载体pcD-NA3.1(+)中,得到重组阳性表达质粒pcDNA3.1(+)-3-1E。结果表明:阳性表达质粒经鉴定正确后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光法和免疫组织化学技术检测到了3-1E蛋白在293T细胞中的表达,说明E.acervulina3-1E基因真核表达质粒构建成功。
- 马德星潘龙杨静红李广兴
- 关键词：转染体外表达
- 鸡IFN-γ作为治疗剂的应用前景被引量：2
- 2004年
- 王海艳赵振华马德星
- 关键词：IFN-Γ治疗剂免疫佐剂基因克隆
- 新型鸡白细胞介素15真核表达质粒构建及其体外表达
- 2011年
- 应用重叠扩增PCR(SOEPCR)技术将鸡白细胞介素15(ChIL-15)的冗长信号肽序列替换为较短的鸡白细胞介素2(ChIL-2)信号肽序列,构建了一种新型ChIL-15融合基因(NChIL-15)。将其连接到克隆载体pMD18-T中得到重组克隆质粒pMD18T-NChIL-15。阳性克隆质粒经鉴定正确后将NChIL-15基因亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,得到重组阳性表达质粒pcDNA3.1(+)-NChIL-15。阳性表达质粒经鉴定正确后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了NChIL-15蛋白在293T细胞中的表达。本研究为NChIL-15佐剂作用的深入研究奠定了基础。
- 马德星李广兴马春丽杨静红
- 关键词：转染间接免疫荧光试验
- 鸡柔嫩艾美耳球虫AMA1蛋白在乳酸乳球菌中的表达
- 目的:探索鸡柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)子孢子顶膜抗原AMA1胞外域基因(EtAMA1)是否可以在乳酸乳球菌L.lactis NZ9000中表达,为鸡球虫病乳酸菌口服免疫奠定基础.
方法：将鸡柔嫩艾美尔...
- 马德星王芬张跃黄宇辰张丽丽高铭扬
- 关键词：乳酸乳球菌基因表达
- 文献传递
- 一例疑似犬苯中毒的诊治
- 2005年
- 近年来,随着人们生活水平的不断提高,新房的购置和对房屋进行高档装潢的人在不断增加.因此也出现了一些问题,如一些装潢材料对人体有害,其中装饰材料中苯和甲醛对人体的危害较大.犬、猫等动物做为人类最为喜爱的宠物伴侣,通常和主人生活在一起,因此以前很少发生在宠物身上的疾病,近年来也有发生.近日在临床工作中遇到1例疑似犬苯中毒的病例,现将该病例的诊疗过程报道如下.
- 贾海涛宋春林范宏刚李金龙马德星
- 关键词：发病情况临床症状药物治疗
- 牛白细胞介素2基因原核表达及多克隆抗体制备被引量：2
- 2011年
- 根据GenBank发表的牛白细胞介素2(BoIL-2)基因序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增出重组牛白细胞介素2(rBoIL-2)基因。将克隆片段与pMD18-T载体连接,并经过酶切及PCR鉴定,测序结果显示,克隆的BoIL-2基因与GenBank发表的BoIL-2基因序列同源性为98.7%。将测序正确的克隆片段与pET30a(+)载体连接,构建重组表达质粒pET30a(+-)rBoIL-2,通过双酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒进行序列测定后在大肠杆菌的表达,分子质量约为23.49ku;表达产物主要分布在包涵体中。Western blotting证实所得到的重组蛋白为BoIL-2重组蛋白。用镍离子亲和树脂对所得的BoIL-2重组蛋白进行纯化,并免疫新西兰兔成功制备兔抗rBoIL-2多克隆抗体,为下阶段的研究提供了重要的试验材料。
- 盖仁华王衡郎跃深李广兴张瑞莉马德星张国庆杨贵君
- 关键词：白细胞介素-2原核表达多克隆抗体
