马宏涛
- 作品数：2 被引量：24H指数：2
- 供职机构：南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：天津市科技发展战略研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HBXIP基因对乙肝病毒X蛋白诱导细胞凋亡的影响被引量：11
- 2005年
- 探讨乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(hepatitisBXinteractingprotein ,HBXIP)基因在乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)诱导肝癌细胞凋亡时对细胞周期的影响.构建HBXIP基因真核表达载体pcDNA3 hbxip ,进行瞬时基因转染,将克隆有HBx基因的pCMV X (分别为1μg、2 μg和3μg)和pcDNA3 hbxip质粒分别和共转染至人H74 0 2肝癌细胞中(总体积分别为5 0 μl) .发现瞬时转染3μgpCMV X质粒后,肝癌细胞凋亡发生率为34 4 % ,肝癌细胞的细胞周期相关蛋白p2 7表达水平发生明显上调;与对照组相比,瞬时转染1μg、2 μg和3μg时,细胞周期蛋白D和细胞周期蛋白E的表达水平均发生明显上调,但随着HBX水平的增加细胞周期蛋白D和细胞周期蛋白E的表达水平发生明显下降;在稳定转染pCMV X质粒的H74 0 2 X肝癌细胞中无明显的细胞凋亡发生,研究发现p2 7的表达水平发生了明显下调,而细胞周期蛋白D和细胞周期蛋白E的表达水平发生了明显上调;当pcDNA3 hbxip质粒与pCMV X质粒进行共瞬时转染时,细胞凋亡发生率由pcDNA3质粒与pCMV X质粒共转染时的2 9 2 %下降为13 3% ,p2 7的表达水平发生了下调,但细胞周期蛋白D和细胞周期蛋白E的表达水平无明显变化.研究结果表明,瞬时转染一定剂量的x基因可导致肝癌细胞发生凋亡,细胞周期相关蛋白p2 7。
- 张晓东马宏涛叶丽虹东楠史志蔚沙丽王洪辉
- 乳腺癌MCF-7细胞系转移亚克隆的筛选及其生物学特性研究被引量：13
- 2006年
- 目的 将乳腺癌MCF-7细胞接种SCID鼠，筛选具有高转移潜能的转移亚克隆，阐明其生物学特性。方法 接种培养的乳腺癌MCF-7细胞，取接种的SCID鼠肺组织做原代细胞培养，将获得的细胞命名为LM-MCF-7对该细胞进行生物学鉴定，研究其形态学、生长、细胞周期、染色体和乳腺癌特异性标志物等特征，与其亲本MCF-7细胞进行比较，检测二者肿瘤转移相关蛋白表达的差异。将LM-MCF-7细胞回接SCID鼠，观察其成瘤和转移的能力。结果 在接种MCF-7细胞第68天时处死SCID鼠，经肺组织原代细胞培养，成功获得了MCF-7细胞的转移亚克隆LM-MCF-7。在形态学上LM-MCF-7细胞为典型的上皮样多角形；应用流式细胞仪检测分析显示，G0／G1期细胞为53．40％，s期细胞为17．10％，G2＋M期细胞为23．20％；细胞群体平均倍增时间为20h±14h；染色体分析显示为人源性异倍体，其数量为16～123条；免疫细胞化学检测显示，乳腺癌特异性标志物CA15-3在LM-MCF-7细胞中呈阳性反应；Western印迹检测结果显示，与MCF-7细胞相比，LM-MCF-7细胞中肿瘤转移抑制基因nm23和细胞周期相关蛋白p27的表达水平明显下调，而与细胞运动有关的肌球蛋白轻链激酶（MLCK）及抗细胞凋亡蛋白bcl．2和survivin的表达水平明显上调。将该细胞株接种SCID小鼠，与亲本MCF-7细胞相比，成瘤时间由7．4d±1．3d缩短至5．0d±0．0d，在肺脏、肾脏、脾脏、骨髓、淋巴结和心脏等脏器有广泛转移。结论 LM-MCF-7细胞株是乳腺癌MCFG细胞的转移亚克隆，具有高转移潜能。
- 叶丽虹吴莲英郭威马宏涛张晓东
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移细胞系
