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别藻蓝蛋白标记抗鸡IgG荧光抗抗体的高效制备与鉴定被引量：1: 2011年; 将别藻蓝蛋白(Allophycocyanin,APC)与抗鸡IgG抗体交联制备荧光抗抗体,用于鸡疫病的间接荧光检测。首先采用羟基磷灰石层析和阴离子交换层析法高效制备APC,然后利用蛋白质交联技术高效制备荧光抗抗体。分别用摩尔比50∶1、100∶1的交联剂3-(2-吡啶二巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP)将APC、抗鸡IgG抗体衍生,衍生物以摩尔比1∶1液相交联,经高压液相色谱(HPLC)纯化制备出APC标记的抗鸡IgG荧光抗抗体,最后对制备的荧光抗抗体从荧光特性、吸收光谱特性、抗体活性、稳定性及纯度等方面进行鉴定。结果表明,APC标记的抗鸡IgG荧光抗抗体交联效率达95%以上,纯度达电泳纯,红色荧光明亮,抗体活性高,4℃保存90 d荧光亮度和抗体活性稳定。研制的APC标记的抗鸡IgG荧光抗抗体可作为通用荧光抗抗体用于鸡传染性疾病的间接免疫荧光检测。; 朱丽萍颜世敢李雁冰张玉忠; 关键词：别藻蓝蛋白

一种检测猪链球菌2型胞外蛋白因子和溶血素基因的多重PCR方法: 本发明涉及一种检测猪链球菌2型胞外蛋白因子EF和溶血素基因SLY的多重PCR方法。根据GenBank公开的猪链球菌2型EF、SLY基因保守序列，分别设计、合成1对特异引物，优化多重PCR反应体系和反应条件，建立了同时检测...; 颜世敢朱丽萍陆承平陈正涛张秀美胡北侠许传田杨少华张琳

一种快速分离纯化R－藻红蛋白、R－藻蓝蛋白的方法: 一种快速分离纯化R－藻红蛋白、R－藻蓝蛋白的方法，属于红藻分离纯化技术领域。本发明以红藻为材料，应用经冻溶和低离子强度溶涨提取R－藻红蛋白、R－藻蓝蛋白，经硫酸铵沉淀进行初步纯化，然后使用阴离子交换层析吸附富集R－藻红蛋...; 张玉忠颜世敢张熙颖陈秀兰周百成; 文献传递

鸡大肠杆菌多价油乳剂灭活疫苗的研制及应用被引量：2: 2000年; 筛选多株从山东各地分离的鸡源大肠杆菌菌株 ,复壮提纯后 ,通过增菌培养、甲醛灭活后制成灭活疫苗 ,经实验室检验合格后进行田间试验。 2年多 15 0万羽鸡的试验证明 ,该疫苗保护率 80 %以上。; 崔锦鹏颜世敢徐培莲任素芳李月梅; 关键词：鸡大肠杆菌灭活疫苗

一种复合微生物活性添加剂及其应用: 本发明涉及畜禽用中药技术领域，特别涉及一种复合微生物活性添加剂：称取山楂、当归、五味子、黄芪、枸杞子、茵陈、淡竹叶、生地，粉碎至60目，灭菌，按比例加入乳酸菌，混匀后发酵，即得发酵中间品；将发酵中间品与地衣芽孢杆菌、枯草...; 赵新华骆延波刘凤彩刘玉庆齐静胡明李璐璐颜世敢; 文献传递

一株H9N2禽流感病毒疫苗株及其在免疫保护上的应用: 本发明涉及动物病毒学领域，本发明提供了一株重组的鸡源H9N2禽流感病毒毒株，及其分离鉴定和纯化方法，并研究了其生物学特性特别是作为疫苗株的特点和在SPF鸡上免疫效果评价，其保藏号为CCTCCNO：V201030，本发明从...; 许传田张秀美胡北侠鲁梅颜世敢杨少华张琳

R-藻红蛋白标记抗体荧光探针的高效制备及其在禽流感病毒检测中的应用被引量：12: 2009年; 用适宜摩尔浓度的异型双功能交联剂SPDP将R-藻红蛋白与纯化的禽流感病毒H9亚型多克隆抗体交联,并经高效液相色谱纯化制备R-藻红蛋白标记抗体荧光探针。以溴化氰活化的琼脂糖微球为固相载体,采用双抗体夹心法建立固相免疫荧光检测法,以制备的R-藻红蛋白标记抗体荧光探针检测禽流感病毒H9尿囊毒。结果表明,阳性微球在蓝、绿光激发下发射桔黄色荧光,荧光明亮,无背景光干扰,特异性好,灵敏度高,可检测蛋白浓度为1.85×10-5mg.mL-1的H9亚型尿囊毒。R-藻红蛋白标记探针的检测灵敏度高于FITC标记探针,R-藻红蛋白可替代FITC或与FITC等荧光染料一起用于多色荧光免疫检测。; 颜世敢朱丽萍张玉忠周百成张秀美李雁冰; 关键词：R-藻红蛋白荧光标记禽流感病毒

抑制E.coli的SOS应答对恩诺沙星抗药性的影响: 2015年; 通过敲除SOS应答启动蛋白基因rec A,探讨SOS应答对E.coli恩诺沙星抗药性的影响,并体外评价Rec A抑制剂和恩诺沙星联用对细菌协同抑制作用的影响.利用Red重组系统,构建E.coli ATCC 25922的rec A缺失菌株E.coli ATCC 25922/?rec A;在恩诺沙星压力下,利用荧光定量PCR测定SOS应答系统相关基因rec A和umu C表达量的变化.用微量肉汤稀释法测定恩诺沙星等常用抗生素对两个菌株的MIC变化;利用梯度平板法测定恩诺沙星对两个菌株抗药性变异的影响;合成Rec A抑制剂,并评估其与恩诺沙星联合抑制E.coli生长及其抗药性的作用.结果表明,E.coli ATCC 25922/?rec A菌株对恩诺沙星的最低抑菌浓度值降低至原始菌株的1/8;经药物处理后,在梯度平板上,rec A缺失菌株较野生型不易产生抗药性;荧光定量PCR表明,rec A缺失菌株或在Rec A抑制剂作用下,SOS应答系统受到一定的抑制.敲除rec A,使菌株对恩诺沙星的抗药性和抗药率均明显降低;Rec A抑制剂在一定程度上能抑制SOS应答,起到协同抑菌作用.; 王进文胡明白华颜世敢李璐璐骆延波齐静韩哲刘玉庆; 关键词：E.COLI RECA 恩诺沙星抗药性 RECA 抑制剂

2012年第一季度山东省肉鸡集团公司鸡源大肠杆菌抗药性监测报告被引量：1: 2012年; 大肠杆菌是肉鸡的主要致病菌，对其抗药性和毒力机制研究较为系统，但仍然无法找到一劳永逸的杀菌药物，因为决定抗药性毒力的基因储存在肠道和环境的菌群基因库中，是变异、流动的，且细菌还存在生理性适应。针对抗药性和毒力的动态变化，除了增加药物种类，根本的办法是进行系统的抗药性监测和流行病学调查工作。; 刘玉庆骆延波齐静颜世敢胡明张秀美吴聪明; 关键词：抗药性监测鸡源大肠杆菌肉鸡流行病学调查

一种检测禽流感病毒的荧光抗体的制备方法及固相免疫荧光检测试剂盒: 本发明涉及一种检测禽流感病毒的荧光抗体的制备方法及固相免疫荧光检测试剂盒。本发明采用别藻蓝蛋白(Allophycocyanin，APC)标记抗禽流感病毒抗体制备荧光抗体，分别用化学交联剂SPDP将APC、抗体衍生，衍生物...; 颜世敢朱丽萍李雁冰张玉忠周百成胡北侠张秀美许传田杨少华; 文献传递

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颜世敢