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wzzE不影响禽致病性大肠杆菌雏鸭分离株LPS的表型被引量：2: 2016年; 【目的】wzz参与很多革兰氏阴性菌O抗原的合成,并对细菌的致病性具有调控作用。在禽致病性大肠杆菌（Avian pathogenic Escherichia coli,APEC）中,存在Wzz蛋白超家族基因wzz E,目前尚未开展该基因对APEC脂多糖（LPS）的合成及致病作用研究,因此本研究开展了wzz E对APEC LPS合成以及生物学特性影响的研究。【方法】通过构建APEC DE17株的wzz E缺失株,开展对野生型和缺失株的LD50、黏附与入侵DF-1细胞、脂多糖表型及内毒素毒价等相关生物学特性的影响研究。【结果】结果表明,缺失wzz E的APEC,不影响细菌的生长特性。野生型、缺失株及回复株的LPS表型无明显差异。DE17Δwzz E与DE17的黏附与入侵结果无显著差异。血清型鉴定结果表明,缺失wzz E,不影响细菌的血清型。内毒素毒力检测结果DE17、DE17Δwzz E及CΔwzz E内毒素的毒价一致,为4×10~5 EU/mg。对7日龄樱桃谷鸭进行攻毒,测定各菌株的LD50,结果表明,与野生型相比,DE17Δwzz E缺失株毒力下降了10倍。【结论】wzz E缺失对LPS的表型无显著影响,但wzz E参与APEC的致病过程,然而wzz E对APEC毒力的调控机制仍有待进一步研究。; 左佳坤韩月张宇曦杨立军徐达王少辉祁克宗韩先干于圣青; 关键词：禽致病性大肠杆菌脂多糖

rmlA基因缺失影响禽致病性大肠杆菌的生物被膜形成: 构建禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)rmlA基因缺失株,研究该缺失株的生物学特性[1].利用Red重组系统构建rmlA缺失株[2,3]；比较野生株与缺失株在...; 韩月韩先干白灏王少辉孟庆美丁铲于圣青

rmlA基因缺失影响禽致病性大肠杆菌的生物被膜形成被引量：5: 2013年; 【目的】构建禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)rmlA基因缺失株,研究该缺失株的生物学特性。【方法】利用Red重组系统构建rmlA缺失株;比较野生株与缺失株在生长特性、运动性和生物被膜形成能力等方面的差异;运用Real-time PCR技术,比较野生株与rmlA缺失株对APEC部分毒力基因转录的影响。【结果】rmlA缺失株,不影响APEC的生长和运动特性,但生物被膜形成能力显著增强,且使luxS、irp2基因转录水平分别上调2倍、1.8倍,iucD、fyuA则下调25倍。【结论】APEC的rmlA基因可以影响禽致病性大肠杆菌的生物被膜形成能力及部分毒力基因的转录水平;而对APEC的生长、运动特性没有影响。; 韩月韩先干白灏王少辉孟庆美丁铲于圣青; 关键词：基因缺失生物被膜

wzzE对禽致病性大肠杆菌LPS合成及致病作用研究: 病性大肠杆菌(Awain pathogenic Escherichia coli,APEC)为一类能引起禽类大肠杆菌病的革兰氏阴性菌,是禽类最常见的传染病之一[1].脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)...; 左佳坤韩月张宇曦杨立军徐达王少辉于圣青韩先干; 关键词：禽致病性大肠杆菌脂多糖致病作用

禽致病性大肠杆菌脂多糖核心型分布与毒力基因的相关性分析: 引言禽致病性大肠杆菌(APEC)可导致鸡、鸭及其他禽类的肠道外疾病,如心包炎、气囊炎、关节滑膜炎等,甚至引起败血症性急性死亡.脂多糖(LPS)是APEC的一个重要致病因子且是内毒素的主要成分.LPS由类脂A、核心多糖和O...; 张宇曦韩月左佳坤范国博王少辉田明星丁铲祁克宗韩先干于圣青

禽致病性大肠杆菌毒力基因多重PCR方法的建立和应用被引量：20: 2014年; 【目的】建立禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)黏附相关基因、侵袭及毒素相关基因、抗血清存活相关基因及铁转运相关基因的多重PCR方法,实现禽致病性大肠杆菌毒力基因的简便、快速检测。【方法】根据GenBank公布的基因序列,设计合成18对特异性引物,通过条件优化,建立四组多重PCR体系,并通过模板倍比稀释检测各组多重PCR的灵敏性。利用多重PCR检测100株APEC毒力基因的分布,验证多重PCR方法的可行性。【结果】根据PCR扩增片段大小判定,上述四组多重PCR体系均能同时扩增出该组中的各个毒力基因,且灵敏度分别为:103CFU、103CFU、105CFU、105CFU细菌和1ng、1ng、10ng、10ng DNA。100株APEC的毒力因子检测结果显示,多重PCR和单基因PCR结果一致。【结论】建立的四组多重PCR方法能够简便、快速地检测禽致病性大肠杆菌的毒力基因,可用于毒力基因的鉴定以及流行病学调查。; 孟庆美王少辉韩先干韩月丁铲戴建君于圣青; 关键词：禽致病性大肠杆菌毒力基因多重PCR

禽致病性大肠杆菌gspL基因缺失株构建及生物学特性被引量：3: 2015年; 【目的】研究gsp L基因缺失对禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)生物学特性的影响。【方法】利用Red重组方法构建禽致病性大肠杆菌DE17株的gsp L缺失株;分析野生株与缺失株的生长特性、黏附和入侵DF1细胞的差异;采用荧光定量PCR的方法比较野生株和缺失株毒力基因转录水平的变化;比较野生株与缺失株的半数致死量(LD50)差异。【结果】gsp L缺失不影响DE17的生长特性,但其黏附和入侵DF1细胞能力显著下调。荧光定量PCR检测结果表明,缺失株毒力基因lux S,pfs,fyu A和iss转录水平明显上调,tsh的转录水平明显下调,而vat,ibe A,stx2f和omp A的转录水平无显著变化;LD50检测结果表明,缺失株比野生株毒力增强了12倍。【结论】gsp L基因的缺失不影响禽致病性大肠杆菌的生长特性,但能减弱其黏附和入侵能力,且可以正调控禽致病性大肠杆菌部分毒力基因的转录水平,推测gsp L基因可能与APEC对宿主的致病性有关。; 范国博韩月张宇曦韩先干王少辉白灏孟庆美祁克宗丁铲于圣青; 关键词：禽致病性大肠杆菌

禽致病性大肠杆菌脂多糖核心型分布与毒力基因的相关性分析被引量：11: 2015年; 【目的】大肠杆菌脂多糖(LPS)核心型根据其化学结构的不同分为5种,即R1、R2、R3、R4和K12。通过对禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)安徽、江苏、上海和河南等省市分离株的脂多糖核心型分布情况的研究,分析其与大肠杆菌主要毒力基因之间的潜在联系,以期为APEC的研究和防治提供参考。【方法】对分离到的76株APEC,利用PCR方法开展对LPS核心型分型鉴定和毒力基因检测;分析LPS核心型的分布和毒力基因、致病性之间的相关性。【结果】在76株APEC分离株中,68.4%(52株)为R1核心型,15.8%(12株)为R3型,11.8%(9株)为R4型,3.9%(3株)为R2型,未检测到K12核心型。毒力基因鉴定结果中yijp、mat、fim C、ibe B和omp A的检验阳性率均达到90%以上,可作为APEC的保守基因。其中LPS核心型R1与neu C、cva/cvi、irp2均具有显著正相关性(P<0.05),R3与iro N、irp2均具有显著负相关性(P<0.05),R4核心型与aat A显著正相关(P<0.05)。【结论】APEC的LPS核心型主要为R1。LPS核心型对部分毒力基因分布具有显著影响。; 张宇曦韩先干左佳坤龚建森韩月范国博王少辉田明星丁铲祁克宗于圣青; 关键词：禽致病性大肠杆菌毒力基因

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