雷蕊霞
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 香烟烟雾提取物对A549细胞MUC5AC分泌影响的机制研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)所致人气道上皮细胞黏液高分泌的分子机制及血红素加氧酶-1(HO-1)对该分子机制的阻断作用。方法通过CSE刺激人肺A549细胞,构建气道黏液高分泌的细胞模型,给予HO-1诱导剂氯化高铁血红素(Hemin)及HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPPIX)干预,观察HO-1、双功能氧化酶1(Duox1)、黏蛋白5AC(MUC5AC)、表皮生长因子受体(EGFR)及磷酸化EGFR(p-EGFR)的表达。将A549细胞分为对照组、CSE刺激组、Hemin干预组和ZnPPIX干预组。用四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定Hemin及ZnPPIX对细胞活性的影响;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组HO-1、Duox1、EGFR及MUC5AC的mRNA水平;Western blot法检测p-EGFR、EGFR、Duox1及HO-1的蛋白水平;并用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组上清液及细胞裂解液中的MUC5AC蛋白含量。结果 CSE刺激组MUC5AC的mRNA积分吸光度值、培养上清液及细胞裂解液中MUC5AC蛋白水平分别为(0.660±0.044)、(62.80±6.85)μg/mg及(157.00±3.26)μg/mg,EGFR mRNA和蛋白的积分吸光度值分别为(0.596±0.061)和(0.620±0.051),均较对照组明显升高(P<0.05),p-EGFR蛋白水平亦明显升高,且HO-1及Duox1的mRNA和蛋白水平也较对照组增高(P<0.05)。给予Hemin预处理后,与CSE刺激组相比,HO-1mRNA及蛋白明显增多,p-EGFR蛋白水平、Duox1、EGFR及MUC5AC的mRNA和蛋白水平降低(P<0.05)。给予ZnPPIX预处理后,与对照组相比,HO-1mRNA及蛋白水平无明显增高(P>0.05),而p-EGFR蛋白水平、Duox1、EGFR及MUC5AC的mRNA和蛋白水平明显增高(P<0.05)。结论 HO-1可通过下调Duox1的表达,阻断香烟烟雾诱导的EGFR活化上游的配体依赖信号途径,减少EGFR活化,从而抑制黏蛋白MUC5AC的合成及分泌,此结果为研究香烟烟雾诱导的气道黏液高分泌的信号机制提供了新的线索。
- 雷蕊霞周向东
- 关键词：黏蛋白类表皮生长因子血红素加氧酶-1
- 血红素加氧酶-1对人气道黏液高分泌的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对炎性刺激时人气道上皮细胞黏液分泌的影响。方法通过人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)刺激人肺腺癌细胞A549,构建炎性刺激下气道黏液高分泌模型,给予HO-1诱导剂氯化高铁血红素(Hemin)及HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPPⅨ)干预,观察黏蛋白5AC(MUC5AC)、表皮生长因子受体(EGFR)、磷酸化EGFR(p-EGFR)、HO-1及双功能氧化酶1(Duox1)的表达。将A549细胞分为对照组、HNE刺激组、Hemin干预组和ZnPPⅨ干预组。用四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定Hemin及ZnPPⅨ对细胞活性的影响;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组HO-1、Duox1、EGFR及MUC5ACmRNA的转录水平;Westernblot法检测p-EGFR、EGFR、Duox1和HO-1蛋白的表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞裂解液中MUC5AC蛋白表达水平的变化;并用细胞免疫化学激光共聚焦显微镜观察不同条件下MUC5AC蛋白表达的变化。结果 HNE刺激组MUC5ACmRNA积分吸光度值和蛋白水平分别为(0.845±0.044)和(192.68±4.71)μg/mg,EGFRmRNA和蛋白的积分吸光度值分别为(0.868±0.039)和(0.623±0.052),均较对照组[(0.462±0.053)、(104.95±6.82)μg/mg和(0.528±0.054)、(0.297±0.055)]明显升高(均P<0.01);p-EGFR蛋白水平亦明显升高,且HO-1及Duox1的mRNA和蛋白水平也较对照组显著增高(均P<0.01)。给予Hemin预处理后,与HNE刺激组相比,HO-1mRNA及蛋白明显增多,p-EGFR蛋白水平、Duox1、EGFR及MUC5AC的mRNA和蛋白水平均降低(均P<0.01)。给予ZnPPⅨ预处理后,与对照组相比,HO-1mRNA及蛋白水平无明显增高(P>0.05),而p-EGFR蛋白水平、Duox1、EGFR及MUC5AC的mRNA和蛋白水平均明显增高(均P<0.01)。结论 HO-1可通过下调Duox1的表达,阻断EGFR活化上游的配体依赖信号途径,减少EGFR活化,抑制MUC5AC的表达,此机制为气道黏液高分泌疾病的防治提供了新的方向。
- 雷蕊霞周向东
- 关键词：气道上皮黏蛋白类血红素加氧酶-1
- 维甲酸在调节气道黏蛋白表达中的作用
- 2009年
- 黏液高分泌是许多慢性气道炎症性疾病的重要病理学特征，黏蛋白是气道黏液的主要成分，影响黏液的黏滞弹性和黏液纤毛清除能力。气道慢性炎症时黏蛋白过表达，使疾病加剧不易控制，增加疾病的发病率和病死率。近年来对于黏蛋白的表达调控机制研究取得很大进展，其中维甲酸是维生素A的代谢产物，在调节气道上皮分化和黏蛋白表达的过程中发挥了重要作用。了解维甲酸在黏蛋白表达调节中的作用，将为慢性气道炎症性疾病提供新的治疗方向。
- 雷蕊霞周向东
- 关键词：黏蛋白维甲酸气道炎症慢性
- 血红素加氧酶-1对人气道黏液高分泌的影响
- 目的：探讨血红素加氧酶-1在人气道黏液高分泌细胞信号通路中的调节作用,检测其对黏蛋白5AC表达水平的影响,进一步丰富和完善慢性气道炎症气道黏液高分泌发生机制的理论,为气道黏液高分泌的治疗提供新的理论依据。本研究分为三部分...
- 雷蕊霞
- 关键词：支气管疾病黏液分泌蛋白表达细胞病理学
- 文献传递
- 血红素加氧酶-1抑制香烟烟雾提取物致体外人肺A549细胞黏液高分泌被引量：6
- 2010年
- 目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对香烟烟雾提取物(CSE)所致人气道黏液高分泌的影响。方法用CSE刺激A549细胞,复制黏液高分泌细胞模型。分为对照组、CSE组、氯化高铁血红素(Hemin)组和锌原卟啉(ZnPPIX)组,观察黏蛋白(MUC)5AC、表皮生长因子受体(EGFR)、磷酸化(p)-EGFR、HO-1及双功能氧化酶1(Duox1)的表达。用MTT法测定细胞活性;RT-PCR法检测HO-1、Duox1、EGFR及MUC5AC的mRNA;Western blot法检测p-EGFR、EGFR、Duox1和HO-1蛋白;ELISA法检测细胞裂解液中MUC5AC蛋白表达。结果CSE组MUC5AC的mRNA吸光度积分相对值和蛋白水平分别为0.660±0.044和(157±3)μg/mg,较对照组0.412±0.043和(105±8)μg/mg明显升高(P<0.05),p-EGFR蛋白水平、EGFR、HO-1及Duox1的mRNA和蛋白水平也较对照组明显增高。与CSE组相比,Hemin组HO-1mRNA及蛋白进一步增高,而p-EGFR蛋白水平、Duox1、EGFR及MUC5AC的mRNA和蛋白水平明显回降。与对照组相比,ZnPPIX组HO-1mRNA及蛋白水平无明显增高,而p-EGFR蛋白水平、Duox1、EGFR及MUC5AC的mRNA和蛋白水平明显增高。结论HO-1可通过下调Duox1的表达,阻断香烟烟雾诱导EGFR活化的上游信号途径,减少EGFR活化,从而抑制MUC5AC的表达。
- 雷蕊霞周向东
- 关键词：黏蛋白类血红素加氧酶-1
