陈甜甜
- 作品数：14 被引量：43H指数：3
- 供职机构：山东农业大学更多>>
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- 低酸度酒精阳性乳患牛血清蛋白组成分析被引量：1
- 2009年
- 本实验采用醋酸纤维素薄膜电泳法分离了低酸度酒精阳性乳患牛血清中各蛋白组成成分,并测定了血清蛋白组份的相对百分含量。结果表明:酒精阳性乳患牛血清总蛋白含量没有显著变化(P>0.05);各血清蛋白组分中,清蛋白、α-球蛋白没有显著的变化(P>0.05);但β-球蛋白极显著升高(P<0.01),γ-球蛋白显著升高(P<0.05)。由此可见,酒精阳性乳患牛体内血清蛋白组分发生了变化,这种变化可能是酒精阳性乳患牛体内氧化损伤及甲状腺机能降低所致。
- 马健王振勇王允田杨笃宝刘操高媛媛张西营陈甜甜
- 关键词：酒精阳性乳血清蛋白
- 猪附红细胞体ORF4基因片段的人工合成及基因表达
- 2011年
- 目的本研究通过人工合成猪附红细胞体ORF4基因,使其在大肠杆菌中高效表达。方法选择GenBank注册的AJ504999序列的ORF4基因,应用Graphical Codon Usage Analyser选择大肠杆菌偏爱的密码子,改变基因的transl_table,设计并合成3对寡核苷酸链,用PCR-based accurate synthesis（PAS）法进行人工合成。经测序正确后,连接到表达载体PET28a,获得重组表达质粒PET28a/ORF4,导入大肠杆菌BL21（DE3）,在30℃,IPTG终浓度1mmol/L的条件下诱导表达,经SDS-PAGE分析,在11 kDa附近出现目的片段。结果结果表明ORF4基因在大肠杆菌中能够得到高效的表达,通过生物信息学软件分析表明,该蛋白存在19个配基结合位点;在21~22位氨基酸可能存在信号肽裂解位点;为胞内蛋白,没有糖基化位点。结论 ORF4基因能够在大肠杆菌中表达,推测其在M.suis蛋白质的形成,M.suis的生物功能方面有着重要的作用。
- 周栋陈甜甜刘建柱成子强张利刘海涛张璐刘永夏柴同杰
- 关键词：猪附红细胞体
- 猪传染性水疱病的流行机制及预防控制
- 疱病病毒感染猪体后，在机体随血液、淋巴液迅速扩散至其他组织器官，并排出大量病毒，进而借助其他媒介引起疫病的流行，给养猪业造成了不小的危害，现通过对其病原特点、流行病学特征的研究，总括了猪水疱病的流行概况，并根据本病的发病...
- 刘永夏刘海涛周栋陈甜甜周川
- 关键词：猪水疱病流行病学病原特征
- 猪沙门氏菌病与易混淆疾病的鉴别诊断被引量：2
- 2010年
- 猪沙门氏菌病又称仔猪副伤寒,其临床主要表现以顽固性腹泻和回肠及大肠固膜性肠炎为特征,有时会出现干酪性及卡他性肺炎,且此类症状与仔猪黄白痢、梭菌性肠炎、猪痢疾、猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪轮状病毒病在临床上容易出现混淆。
- 刘海涛周栋陈甜甜刘永夏周川
- 关键词：猪沙门氏菌病猪传染性胃肠炎梭菌性肠炎疾病仔猪副伤寒顽固性腹泻
- 猪附红细胞体病免疫调节剂的筛选被引量：5
- 2010年
- 【目的】探讨猪附红细胞体病对仔猪非特异性免疫功能的影响,并筛选有效的免疫调节剂作为辅助治疗药物。【方法】选取20头40日龄个体质量相近、无附红细胞体感染的健康仔猪,随机分为5组,1-3组为试验组,4组为阳性对照组,5组为阴性对照组。1-4组人工接种附红细胞体菌血5 mL/头,5组同时注射等量生理盐水。随后1～3试验组分别给予防风多糖溶液0.1 mL/kg、黄芪多糖注射液0.1 mL/kg和左旋咪唑注射液0.05 mL/kg,阴性和阳性对照组给予生理盐水各0.1 mL/kg,连用7 d,分别于第0,4,7,14天自猪前腔静脉采血,测定红细胞感染率、血清溶菌酶活力、淋巴细胞总数、血清总蛋白含量、血清球蛋白含量、血清免疫抑制酸性蛋白（IAP）含量。【结果】阳性对照组、防风多糖组、左旋咪唑组和黄芪多糖组的红细胞感染率分别为62.75%,52.25%,51.25%和40.00%。仔猪感染附红细胞体后,阳性对照组血清总蛋白含量、球蛋白含量显著降低,IAP含量显著升高（P〈0.05）,淋巴细胞总数略有下降,血清溶菌酶活力无显著变化（P〉0.05）。黄芪多糖、左旋咪唑能显著提高感染仔猪的血清总蛋白含量和溶菌酶活力（P〈0.05）,3种免疫调节剂均能显著提高感染仔猪的血清球蛋白含量（P〈0.05）,降低IAP含量（P〈0.05）。【结论】3种免疫调节剂均能提高感染仔猪的非特异性免疫,其中以黄芪多糖的效果最好。
- 刘操王振勇杨笃宝雷留真高媛媛陈甜甜夏俊峰朱辉
- 关键词：附红细胞体病仔猪非特异性免疫免疫调节剂
- 猪附红细胞体MSG1基因人工合成、克隆、表达及免疫原性分析被引量：2
- 2011年
- 目的利用引物重叠扩增法人工合成猪附红细胞体粘附蛋白基因MSG1,并检测其免疫原性。方法将人工合成的猪附红细胞体粘附蛋白基因MSG1产物插入到pMD18-T载体中,亚克隆至原核表达载体pET28c,构建pET28c_msg1表达载体,转入E.coli BL21,IPTG诱导表达。用SDS-PAGE,Western-blot方法分析鉴定,表达产物具有很好的抗原性。纯化后的重组蛋白接种昆明小白鼠后,用重组蛋白作为抗原包被酶标板,以检测接种昆明小白鼠血清抗体的产生。结果结果表明MSG1基因在大肠杆菌中能够得到高效的表达,并能够刺激小鼠产生较好的抗体。结论人工成功的合成了猪附红细胞体粘附蛋白基因MSG1,其基因可在大肠杆菌中高效表达,并可刺激小鼠产生较好的抗体。
- 陈甜甜刘建柱成子强张利周栋王振勇刘海涛刘永夏王淑静柴同杰
- 关键词：猪附红细胞体ELISA
- 低酸度酒精阳性乳患牛乳汁蛋白组分及氨基酸含量变化被引量：3
- 2010年
- 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和酸水解法对低酸度酒精阳性乳患牛乳汁中蛋白组分及17种氨基酸含量进行了测定。结果显示,酒精阳性乳患牛乳汁中总蛋白、SA、lgG-H、-αLG、-βLG相对百分含量无显著变化(P>0.05),tCN相对百分含量显著降低(P<0.05);在酪蛋白中,-αCN相对百分含量无显著变化(P>0.05),-βCN相对百分含量上升(P<0.05),-κCN相对百分含量极显著下降(P<0.01);17种氨基酸中,Cys含量极显著下降(P<0.01),而Arg含量极显著上升(P<0.01),Leu含量亦呈上升趋势(P<0.05)。结果表明,酒精阳性乳患牛乳汁中主要蛋白组分及氨基酸的含量均发生了变化,乳汁中酪蛋白微球的稳定性遭到了严重破坏,乳汁胶体的稳定性降低,导致酒精试验呈阳性反应。
- 王允田王振勇马健刘操高媛媛张西营陈甜甜
- 关键词：酒精阳性乳乳蛋白氨基酸
- 猪大肠杆菌病研究进展被引量：23
- 2008年
- 本文对猪大肠杆菌病的流行特点,病原学特性,发病机理,仔猪白痢、仔猪黄痢、猪水肿病的症状、病理变化,及猪大肠杆菌病的治疗方法进行了系统的综述。
- 陈甜甜杨忠福刘建柱
- 关键词：猪大肠杆菌仔猪白痢仔猪黄痢猪水肿病
- 猪细小病毒NS1基因和VP2基因的克隆与序列分析被引量：5
- 2009年
- 根据GeneBank上发表的猪细小病毒（PPV）的基因组序列,分别设计扩增非结构蛋白NS1基因和结构蛋白VP2基因的特异性引物,采用PCR方法扩增PPV泰安株（PPV-TA）NS1基因和VP2基因。结果表明,PPV-TANS1基因长1989 bp,编码662个氨基酸,与参考PPVNS1基因核苷酸同源性在98.3%～99.9%之间。PPV-TA NS1蛋白有3个糖基化位点分别是356NIS、446NFS、513NLT,除PPV Tomau/1/02在356位缺失了一个糖基化位点之外,PPV-TA与其他PPV参考毒株一致;这表明不同毒株NS1蛋白调节功能可能有差异。PPV-TA NS1蛋白的潜在磷酸化位点是Thr435和Ser473,与PPV参考毒株相同。NS1基因系统发生分析表明,PPV-TA与PPV china亲缘关系最近。PPV-TAVP2基因长1740 bp,编码579个氨基酸,与PPV参考毒株VP2基因核苷酸同源性在98.3%～99.8%之间。PPV-TA VP2蛋白的378D、383H、436S氨基酸残基决定了PPV的组织嗜性,与PPV-NADL-2和PPV-china相同,这表明这3个毒株的组织嗜性是一致的。但与其他PPV参考毒株有差异,这表明不同毒株在动物体内的组织分布是有差别的。PPV-TA VP2蛋白有9个线性抗原位点,与PPV NADL-2和PPV china的线性抗原位点是一致的,这表明具有相同的抗原特性。VP2基因系统发生分析表明,PPV-TA与PPV NADL-2亲缘关系较近。
- 邱莹胡传伟朱晓林谢之景赵宏坤姜世金张兴晓陈甜甜
- 关键词：猪细小病毒NS1基因VP2基因
- 猪附红细胞体MSG1部分基因片段的全基因合成及克隆表达被引量：1
- 2010年
- 通过人工合成猪附红细胞体MSG1基因的编码序列,以提高目的基因在大肠杆菌中的高效表达。根据Gen-Bank注册的AM407404的544～942氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了12条寡核苷酸片段。用重叠区扩增法(PAS)全基因合成MSG1部分目的基因,克隆入pjet1.2/blunt载体。经测序证实正确后,构建原核表达载体pET-28c/MSG1,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,获得含重组表达质粒的转化子,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE分析。测序、酶切鉴定等结果表明,表达载体构建成功,诱导表达后大约在16000的位置出现明显的蛋白条带。
- 陈甜甜刘建柱周栋刘海涛成子强郭慧君王振勇张利柴同杰
- 关键词：猪附红细胞体
