陈浩浩
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：浙江大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲醛吸入对大鼠嗅球和海马神经细胞的影响被引量：6
- 2010年
- 目的:观测甲醛吸入对海马神经细胞形态和谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、一氧化氮合酶(NOS)含量的影响,探讨甲醛影响学习记忆的可能机制。方法:20只大鼠随机分成2组,每组10只,对照组通以正常空气;甲醛染毒组连续7 d静态吸入(12.5 mg/m3,4 h/d)甲醛。实验结束立即处死大鼠,制作嗅球和海马的冰冻切片进行尼氏染色、免疫组化,实施全蛋白免疫印迹分析,观察两组大鼠嗅球、海马的神经细胞形态,测定其Glu、GABA、NOS含量的变化。结果:甲醛染毒组的大鼠嗅球和海马切片的尼氏染色显示,神经细胞排列混乱、胞体皱缩;免疫组化和蛋白印迹显示,Glu和NOS的阳性细胞数以及染色强度和蛋白含量有不同程度的降低,GABA蛋白含量也下降。结论:甲醛吸入能改变大鼠嗅球和海马的神经细胞形态,使嗅球和海马的Glu、GABA、NOS合成量改变,进而影响大鼠的学习记忆。
- 李一乔陈浩浩尹一飞韩飞叶学松凌树才
- 关键词：嗅球海马Γ氨基丁酸一氧化氮合酶谷氨酸
- FasL相关蛋白SH3P12影响FasL细胞膜表达效应研究
- 2006年
- 目的研究FasL相关蛋白SH3P12对FasL表达的影响。方法构建SH3P12真核细胞表达载体,并与FasL共同短暂表达于人胚肾细胞293T细胞。以免疫共沉淀和免疫印迹法确定目的蛋白之间的相互作用,以免疫荧光染色结合激光共聚焦显微镜观察SH3P12与FasL在细胞内表达。结果在转染的293T细胞中,SH3P12与FasL可形成免疫共沉淀的蛋白-蛋白复合物。荧光蛋白标记结合显微镜观察提示在无SH3P12存在时,FasL主要分布于293T细胞膜,并伴随部分蛋白表达在细胞内高尔基体或内含体样颗粒中；在有SH3P12存在时,FasL与SH3P12形成复合体,共同定位于细胞膜,此时细胞内表达FasL量明显降低。结论SH3P12为FasL细胞内结合蛋白,其生物学活性可能为稳定FasL在细胞膜上的表达。
- 钱景彭慧琴周倩王巧玲陈浩浩严杰
- 关键词：FAS配体蛋白质转运蛋白-蛋白相互作用
- 胚胎期小鼠皮肤与羊水接触神经末梢发育规律的研究
- 2010年
- 目的:研究胚胎期小鼠皮肤表面与羊水接触神经末梢发育规律,探讨其与羊水的相互关系。方法:分别取胚胎12,13,14,15,16,17d小鼠,冰冻切片,行神经特异性标记物NF免疫组织化学染色,在光镜下观察皮肤表面神经末梢的分布情况并摄片。为了阐明胚胎期小鼠皮肤神经末梢是否与羊水接触,将荧光金在体注射到胚胎羊水中,切片后用荧光显微镜观察神经元被标记情况。结果:胚胎期小鼠表皮表面存在有大量的神经末梢,以胚胎第15d最多。在胚胎的背根神经节,神经根及腹背侧灰质中均发现有明显的荧光标记。结论:胚胎期小鼠皮肤神经末梢与羊水有一定的接触关系,胚胎皮肤神经末梢可以感知羊水成分的变化或者向羊水中释放某些物质,但羊水成分中何种物质对于周围神经生长起作用的具体机制尚需进一步研究。
- 赵克芳周婧陈浩浩李一乔姜平凌树才
- 关键词：羊水神经末梢荧光金小鼠
- 重组激活基因1shRNA慢病毒载体的构建与鉴定
- 2009年
- 构建3对针对大鼠海马神经元重组激活基因(Rag1)的RNA干扰重组表达载体及1对无关序列的载体,分别命名为shRNA1、shRNA2、shRNA3及negative。经基因测序确认后,采用慢病毒载体系统分别包装4个载体,而后分别感染体外培养的大鼠原代海马神经细胞,收集感染后96h的细胞,通过免疫荧光观察细胞感染情况,并且利用RT-PCR和Western印迹检测Rag1mRNA及蛋白质的表达。经测序鉴定合成的shRNA序列正确,并且慢病毒感染细胞效果良好。LV-shRNA1组、LV-shRNA2组、LV-shRNA3组与正常对照组相比,Rag1mRNA表达都明显减少(P<0.01),其中LV-shRNA3组的抑制效率最高为(76.4±3.5)%,Western印迹结果与其基本一致,而LV-negative组对Rag1mRNA及其表达的蛋白质都无明显影响。实验结果表明,我们成功构建了能特异性抑制大鼠海马神经元Rag1表达的shRNA慢病毒表达载体。
- 陈浩浩周星娟周婧李一乔韩曙凌树才
- 关键词：神经元SHRNART-PCRWESTERN印迹
