陈岚
- 作品数：2 被引量：21H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院病原生物学研究所病毒基因工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 以腺病毒为模式分析影响病原微生物2种常用灭活方法可靠性的因素被引量：3
- 2009年
- 目的以表达绿色荧光蛋白的重组腺病毒(rAdvGFP)为模式病毒,模拟实验室内利用次氯酸钠灭活含病毒废液和利用紫外线对生物安全柜台面进行消毒的实验室操作,并评价其可靠性及影响因素。方法终浓度为0(阳性对照)、0.5%、0.2%、0.1%、0.05%的次氯酸钠溶液(0.5%、0.2%、0.1%、0.05%次氯酸钠组)分别与rAdvGFP溶液(1×106TCID50)混合后,将混合液原液与混合液的1:10～1:105倍比稀释液分别接种人胚肾293细胞,在荧光显微镜下观察GFP蛋白的表达。将rAdvGFP溶液(1×103TCID50)置于紫外灯下分别照射0(阳性对照)、15、30、60、120min(15、30、60、120min照射组),各组再按垂直照射高度的不同分为5、10、20、30、67cm亚组,照射后收集各组病毒液接种293细胞,在荧光显微镜下观察GFP蛋白的表达。实验均重复3次。结果各组次氯酸钠病毒混合液原液均造成细胞不同程度的损伤,其中0.5%次氯酸钠组混合液原液对细胞的毒性作用较强;稀释10倍后,除0.05%次氯酸钠组外,其余各浓度次氯酸钠组稀释液均导致细胞不同程度的死亡;稀释102倍后,仅0.5%次氯酸钠组稀释液仍对细胞具有毒性作用。荧光显微镜下观察显示,仅0.1%次氯酸钠组的1:10、1:102倍稀释液和0.05%次氯酸钠组的1:10、1:102、1:103倍稀释液接种细胞可见绿色荧光。紫外线照射后在荧光显微镜下观察显示,15min照射组的各亚组细胞均可见明显绿色荧光;30min照射组的20、30、67cm亚组与60、120min照射组的67cm亚组细胞仍可见绿色荧光。结论有效氯浓度须在0.2%以上、安全柜内1.12mW/cm2强度紫外线照射30min以上方能有效灭活重组腺病毒,建立实验室操作的可靠性评价技术体系并据此制定标准操作规程很有必要性。
- 任丽丽陈岚肖艳王健伟
- 关键词：腺病毒科
- 用安德森空气生物采样器采集病毒气溶胶的研究被引量：18
- 2010年
- 目的以表达绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的重组腺病毒(rAdvGFP)为模式病毒,进行气溶胶的主动发生实验和模拟剧烈吹打、振荡混匀等操作,利用安德森采样器进行气溶胶的采集,以建立简单易行的病毒气溶胶采集检测体系。方法用气溶胶发生器模拟模式病毒的气溶胶主动发生,分别在距离发生器管口0、10和20cm处放置采样器及培养皿,在气溶胶发生30s时开始采集,共采集5min。在模拟吹打操作中,将10ml病毒液置于50ml离心管中,用微量移液器反复吸取吹打病毒液;在模拟振荡操作中,将10ml病毒液置于50ml离心管中盖紧,以振荡器最大速度涡旋振荡1min,立即打开管盖采集2min,然后盖紧再重复振荡30s后开盖继续采集。两种模拟操作均在距离管口0和10cm处放置采样器及培养皿,各采集5min。收集各采样器及培养皿中的液体,利用阳离子聚合物聚凝胺浓缩后用PCR方法检测病毒核酸,并接种人胚肾293细胞进行病毒的培养,在荧光显微镜下观察GFP蛋白的表达。结果模拟气溶胶主动发生时,将置于距发生器管口0、10和20cm的采样器和培养皿中的采集液接种细胞均可观察到绿色荧光,并可检测到病毒核酸。模拟剧烈吹打时,置于0cm处的培养皿内可检测到病毒,而置于0cm、10cm处采样器和10cm处培养皿中均未检测到病毒。在剧烈振荡模拟试验中,在距离管口0cm的采样器和培养皿中均可检测到病毒,在置于10cm处的采样器中未检测到病毒,在置于10cm处的培养皿中可检测到病毒。结论利用rAdvGFP模式病毒和安德森采样器初步建立了病毒学实验气溶胶收集检测体系,对模拟危险操作感染性材料所产生的气溶胶做出危险评估,为制定病毒学实验操作规范提供了依据。
- 陈岚车红任丽丽王健伟
- 关键词：空气微生物学病毒学安全管理生物气溶胶
