阎丽
- 作品数:13 被引量:11H指数:3
- 供职机构:中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:北京市科技新星计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程农业科学生物学更多>>
- 人脂肪间充质干细胞体外分离、培养的方法研究被引量:3
- 2014年
- 目的探讨人脂肪间充质干细胞体外分离及培养方法。方法用消化离心的方法获得人脂肪间充质干细胞,以1×104/cm2接种于体积分数为0.1%胎牛血清的LG-DMEM培养基中,并进行细胞形态学观察,绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞表面抗原,行成脂及成骨诱导检测其多向分化潜能。结果获取的脂肪间充质干细胞大小较为均匀,呈梭形的成纤维细胞样,细胞增殖良好;细胞生长曲线测定表明接种后第4天细胞进入指数增长期,第8天后生长进入平台期,体外能长期培养存活,并保持不分化状态;流式细胞仪检测表明细胞高表达CD13、CD73,低表达CD34、CD45及HLA-DR;能诱导成脂及成骨细胞。结论利用消化离心法在体外能分离得到脂肪间充质干细胞,细胞生长良好,可作为组织工程的种子细胞。
- 张云巍徐丽娟王淑芳喻红彬阎丽
- 关键词:脂肪间充质干细胞
- CXCR4基因慢病毒表达载体的构建、包装及鉴定
- 2015年
- 目的构建CXCR4基因慢病毒过表达载体并对其进行包装、鉴定。方法首先设计合成引物,采用PCR法扩增目的基因CXCR4,将目的基因与酶切线性化的载体进行定向交换,成功构建重组载体慢病毒表达载体p GC-FU-CXCR4,将其产物转化大肠杆菌感受态细胞。对培养出的克隆先进行菌落PCR鉴定,再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析,最后将获得的病毒载体共同转染293T细胞,收集病毒颗粒,并采用Real time PCR法测定病毒滴度。结果 PCR鉴定结果显示扩增的目的基因已成功插入p GC-FU载体,Western Blot结果显示得到的片段与理论大小相符,阳性克隆测序结果与目的基因序列一致,说明重组慢病毒载体的插入序列完全正确。结论本实验成功构建了CXCR4慢病毒表达载体,并成功对慢病毒进行了包装及病毒滴度测定。
- 徐丽娟王淑芳张云巍潘美妍胡亚卓阎丽
- 关键词:慢病毒载体CXCR4基因293T细胞
- 经腹壁超声多普勒技术在早期妊娠的应用
- 1993年
- 资料和方法本文73例,年龄22~45岁,均无心血管疾病史。正常早孕35例(停经40~85天),先兆流产6例(停经50~82天);不全流产8例;胚胎停育6例(停经62~90天);输卵管妊娠5例和阔韧带妊娠1例(停经41~52天)。闭经12例经临床证实为月经不调。
- 俞雯王军燕阎丽
- 关键词:超声波诊断早期妊娠
- 人脂肪间充质干细胞体外诱导为肝脏样细胞的实验研究
- 目的:探讨人脂肪间充质干细胞体外分离、培养、鉴定及向肝脏样细胞分化的方法。方法:将脂肪组织切成小于1 mm3的碎片,用胶原酶I消化离心法获得人脂肪间充质干细胞,倒置显微镜观察细胞形态及生长情况;取第5代细胞接种于24孔板...
- 张云巍徐丽娟王淑芳阎丽
- 不同护龄护士工作压力与自测健康状况调查被引量:5
- 2010年
- 目的 调查军队医院不同护龄护士工作压力与自测健康的状况.方法 采用方便抽样的方法,对某三甲军队医院护士197名进行护士工作压力源量表和自测健康评定量表问卷调查.结果 工作压力总分:〈10年护龄护士为(2.38±0.54)分,10~20年护龄护士为(2.49±0.40)分,〉20年护龄护士为(2.46±0.44)分.不同护龄的护士工作压力与生理、心理健康均呈负相关(P〈0.05).结论 护理工作中的压力影响着护士群体的身心健康,工作压力越大,护士健康状态越差.医院管理人员应尽快建立护理人员支持系统,根据不同护龄护士采取减压措施,缓解工作压力,维护护士身心健康,提高医院护理服务质量.
- 韦文英李明子阎丽
- 关键词:护士工作压力自测健康
- 成体干细胞复合丝素蛋白纤维移植治疗急性肝损伤模型的实验研究
- 徐丽娟阎丽张耀鹏苏一男王淑芳
- 人脂肪间充质干细胞体外诱导为肝脏样细胞的试验研究被引量:3
- 2014年
- 目的探讨人脂肪间充质干细胞体外分离、培养、鉴定及向肝脏样细胞分化的方法。方法采用胶原酶Ⅰ消化离心法获得人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs),原代培养并采用流式细胞仪检测干细胞相关表面抗原白细胞分化抗原13(Cluster differentiation13,CD13)、CD73、CD34、CD45和人类白细胞DR抗原(human leukocyte antigen DR,HLA-DR)的表达,采用诱导培养基将hADSCs向成脂及成骨方向诱导。采用两阶段细胞因子诱导法诱导hADSCs,并观察其形态变化;采用实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法及细胞免疫组化法检测肝细胞相关基因甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、细胞角蛋白18抗体(cytokeratin18,CK18)、细胞角蛋白19抗体(cytokeratin19,CK19)等在肝脏样细胞中的表达;采用糖元染色法(Periodic acid-Schiff stain,PAS)检测肝脏样细胞糖原合成情况。结果用消化离心法获取的hADSCs大小均匀,呈梭形的成纤维细胞样,体外能长期培养存活,并保持不分化状态;流式细胞仪检测显示hADSCs高表达CD13、CD73,低表达CD34、CD45及HLA-DR;hADSCs体外可被诱导成脂肪细胞及成骨细胞。hADSCs经成肝诱导后,细胞形态由梭形变为多角形的肝脏样细胞,这些肝脏样细胞高表达血清白蛋白(serum albumin,ALB)、AFP、CY3P4等基因,并表达肝细胞相关性蛋白HepPar-1、AFP、CK18、CK19。PAS染色显示肝脏样细胞胞质呈红色表现。结论利用消化离心法在体外成功构建了人原代脂肪干细胞系,可长期存活,反复传代,经诱导后可转化为有功能的肝脏样细胞,为脂肪间充质干细胞作为生物人工肝及肝组织工程的种子细胞提供理论依据。
- 张云巍徐丽娟王淑芳阎丽
- 基于脱细胞方法制备3D植物肝组织工程支架及表征
- 2024年
- 背景:组织工程为肝衰竭这一临床困境带来了新的希望,通过简单的制备方法制备植物脱细胞纤维支架对肝脏组织工程具有重要意义。目的:采用新鲜苹果切片和十二烷基硫酸钠溶液制备苹果组织脱细胞支架材料,并评估其生物相容性。方法:将新鲜苹果分别采用磷酸盐缓冲液和十二烷基硫酸钠溶液进行脱细胞处理,然后用磷酸盐缓冲液进行脱毒获得处理后的苹果组织和苹果脱细胞支架材料,然后在扫描电镜下观察苹果材料的脱细胞效果。实验从BALB/C小鼠腹股沟脂肪中提取脂肪干细胞,并且通过流式细胞术鉴定其干细胞相关标记物(CD45,CD34,CD73,CD90,CD105)的表达。然后分为无支架对照组和有支架组,在两组中接种等量脂肪干细胞,通过CCK-8、苏木精-伊红染色、鬼笔环肽骨架染色评价该脱细胞支架与脂肪干细胞的生物相容性,在光学显微镜、扫描电镜下观察细胞在支架上的黏附及生长情况。然后将支架分为非诱导组和成肝诱导组,将脂肪干细胞种植在脱细胞苹果支架上,分别在普通培养基和成肝诱导培养基中培养14 d后进行对比,通过肝细胞标记物(白蛋白、细胞角蛋白18、细胞色素P450家族1亚家族1)进行免疫荧光染色,通过酶联免疫吸附实验来检测白蛋白、甲胎蛋白的分泌情况,并通过扫描电镜观察支架上诱导培养的细胞形态,验证该脱细胞支架材料上肝细胞相关蛋白的表达。最后,实验通过将钴60照射消毒后的苹果脱细胞支架移植于小鼠肝脏表面,28 d后通过大体观及苏木精-伊红染色观察该支架的降解情况。结果与结论:①扫描电镜结果显示,脱细胞后的苹果支架材料具有约100μm大小的孔隙结构,不存在残余细胞。②通过流式细胞学鉴定,提取培养的细胞为脂肪间充质干细胞。③CCK-8结果表明,所制备的苹果组织脱细胞支架材料无细胞毒性;苏木精-伊红染色和鬼笔环肽�
- 胡婧婧何松霖张大旭赵烁史潇楠李伟龙叶淑君王静怡郭全义阎丽
- 关键词:植物组织脱细胞肝衰竭脂肪间充质干细胞肝细胞样细胞
- CXC趋化因子受体4修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗肝硬化的机制
- 目的 干细胞在再生领域研究的进展为肝硬化的治疗提供了新视角,但干细胞定植数量有限,限制其作用的发挥.本研究探讨CXC趋化因子受体4(CXCR4)促骨髓间充质干细胞(BMSC)定植及其修复肝损伤的机制.方法 构建慢病毒载体...
- 阎丽徐丽娟张云巍吴本俨万军
- CXCR4修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗肝硬化的机制研究
- 研究目的:干细胞在再生领域所取得的进展为肝硬化的治疗提供了新视角,但普遍存在的问题干细胞定植数量有限,限制了其作用的发挥.本项目拟采用基因修饰的方法,将CXCR4导入到骨髓间充质干细胞(BMSCs)中,探讨其促BMSCs...
- 阎丽徐丽娟张云巍万军吴本俨