闫恩志
- 作品数：47 被引量：277H指数：11
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- 阿魏酸钠对淀粉样β蛋白片段1～40引起的大鼠海马MAP激酶信号传导通路及凋亡蛋白表达的影响被引量：12
- 2007年
- 目的观察阿魏酸钠(SF)是否对淀粉样β蛋白(Aβ)所致的海马损伤具有保护作用及其信号转导机制。方法大鼠灌胃给予SF(50,100和250mg.?-1),连续应用3周,左侧脑室内单次注射Aβ1-40(10μL,1.0mmol.L-1)制备大鼠痴呆动物模型,注射后6h,取海马CA1区。Western印迹观察有丝分裂原活化蛋白p38(p38MAP)激酶、丝裂原激活的蛋白激酶的激酶4(MKK4)、c-Jun氨基末端激酶(JNK1/2)、P53蛋白、FasL和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase3)蛋白表达。应用caspase3活性测定试剂盒分析caspase3活性变化。结果脑室内注射Aβ1-40可引起大鼠海马CA1区磷酸化p38MAP激酶表达明显增加,从正常0.127±0.018增加到0.95±0.12(n=4,P<0.01)。也可使磷酸化MKK4和JNK1/2表达明显增加。这些MAPK信号传导通路改变伴随有促凋亡蛋白P53和FasL表达明显增加,caspase3蛋白表达和活性均明显增加,P53从正常0.053±0.012增加到0.30±0.07(n=4,P<0.01),FasL从正常0.25±0.04增加到0.51±0.05(n=4,P<0.01),caspase3从正常0.036±0.007增加到0.63±0.041(n=4,P<0.01),caspase3活性从正常0.38±0.04增加到0.86±0.09(n=4,P<0.01)。SF(50、100和250mg.kg-1)连续应用3周,能明显抑制Aβ1-40引起的p38MAP激酶、磷酸化MKK4和JNK1/2表达明显增加,同时促凋亡蛋白p53和FasL表达明显增加,降低caspase3的活性。结论SF通过抑制Aβ1-40引起的p38MAP激酶和JNK1/2信号传导通路,产生抗凋亡作用,保护海马免除Aβ1-40引起的神经毒性。
- 闫恩志金英范莹杨菁宗志红齐志敏
- 关键词：阿魏酸钠P38MAP激酶半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- 知母皂苷对Aβ_(25-35)引起小脑颗粒细胞损伤的保护作用及其机制探讨被引量：6
- 2012年
- 目的观察知母皂苷对淀粉样β蛋白25-35(Aβ25-35)激活小鼠巨噬细胞引起小脑颗粒细胞损伤的保护作用及探讨其作用机制。方法小鼠小脑颗粒细胞与腹腔巨噬细胞联合培养及腹腔巨噬细胞单独培养,损伤组加入Aβ25-35(20μmol/L),保护组同时加入不同质量浓度知母皂苷(10、30、100μmol/L)。联合培养的细胞通过免疫组化染色观察微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达和测定乳酸脱氢酶(LDH)。单独培养的巨噬细胞用ELISA法和Griess法分别测定培养液中白细胞介素-1β(IL-1β)和一氧化氮(NO)。Western blot检测巨噬细胞磷酸化p38MAPK表达水平。结果知母皂苷组可使MAP-2表达阳性的小脑颗粒细胞数目较Aβ25-35组明显增加,LDH漏出量减少;巨噬细胞培养液中IL-1β和NO生成量减少以及巨噬细胞磷酸化p38MAPK表达水平明显降低。SB203580也能抑制Aβ25-35引起的IL-1β和NO生成量增加。结论 知母皂苷通过抑制Aβ25-35激活巨噬细胞p38MAPK通路,使IL-1β和NO表达水平降低,从而对小脑颗粒细胞起到保护作用。
- 刘卓金英隋海娟闫恩志
- 关键词：知母皂苷炎症白介素-1Β微管相关蛋白-2
- 知母皂苷对脂多糖引起巨噬细胞分泌TNF-α和NO的影响及机制被引量：14
- 2013年
- 目的:观察知母皂苷是否能抑制脂多糖引起的小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子TNF-α和NO释放并探讨PI3K/Akt/p70S6K信号转导通路的影响。方法:小鼠腹腔巨噬细胞培养24 h,加入不同浓度知母皂苷(1、10和100μmol/L)或加入不同的阻断剂(PI3K特异性阻断剂LY294002、Akt特异性阻断剂TCBN),之后加入脂多糖(10 mg/L)继续培养。ELISA法和Griess法分别测定巨噬细胞培养上清液中TNF-α和NO的含量;免疫化学荧光染色法观察巨噬细胞磷酸化p70S6K表达水平的改变。结果:加入脂多糖作用2 h巨噬细胞上清液中TNF-α开始含量明显增加,24 h达高峰。知母皂苷(1、10和100μmol/L)、LY294002(20μmol/L)和TCBN(10μmol/L)均可不同程度的抑制脂多糖引起的巨噬细胞TNF-和NO产生增加。知母皂苷(100μmol/L)可减少脂多糖引起的小鼠腹腔巨噬细胞磷酸化p70S6K表达增加。结论:知母皂苷显著抑制脂多糖引起的巨噬细胞炎症因子TNF-α和NO释放,其作用机制与知母皂苷下调PI3K/Akt/p70S6K信号转导通路表达有关。
- 刘卓隋海娟闫恩志刘婉珠金英
- 关键词：知母皂苷巨噬细胞脂多糖肿瘤坏死因子-Α
- 吡格列酮对谷氨酸诱导皮质神经元损伤保护作用及其抑制JNK信号的机制被引量：7
- 2010年
- 目的观察吡格列酮对谷氨酸所致培养皮质神经元损伤的保护作用及作用机制。方法大鼠乳鼠大脑皮质神经元,培养7d后用于实验。实验分为对照组、谷氨酸组、谷氨酸+吡格列酮组、谷氨酸+SP600125组、SP600125组。用MTT法测定细胞活力;Hoechst33258核染色观察细胞凋亡的形态学改变;免疫荧光染色法检测磷酸化活化转录因子2(phospho-ATF2)的表达;Western blot检测磷酸化JNK1和JNK1总量的蛋白表达水平。结果谷氨酸(100μmol.L-1)作用24h可使体外培养的皮质神经元细胞活力明显下降,细胞凋亡百分比明显增加,磷酸化JNK1蛋白水平(谷氨酸作用2h后检测)和磷酸化ATF2表达明显增加。吡格列酮明显对抗谷氨酸引起的皮质神经元损伤,同时明显抑制谷氨酸引起的磷酸化JNK1及磷酸化ATF2表达增多。JNK抑制剂SP600125明显对抗谷氨酸引起的神经元损伤及phos-pho-ATF2表达增多。结论吡格列酮对谷氨酸引起的培养皮质神经元损伤具有明显的保护作用,吡格列酮的保护作用与抑制JNK信号转导通路有关。
- 王蕊金英闫恩志隋海娟刘婉珠齐志敏
- 关键词：吡格列酮谷氨酸神经元C-JUN氨基末端激酶
- 香菇多糖单糖组成及含量的测定方法研究被引量：29
- 2005年
- 采用高压液相色谱、气相色谱、气相色谱-质谱联用等方法分析了香菇多糖中单糖组成及其含量。结果表明,用高压液相色谱测定由于葡萄糖和甘露糖的流出时间仅相差1min,在混合标样图中这两个单糖峰叠加在一起,没有分开。但是,据图能证明香菇多糖里含有木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖,并且其相关比例为:木糖∶阿拉伯糖∶葡萄糖∶半乳糖=2∶13∶73∶12;用气相色谱测定和气质联用测定都含有阿拉伯糖、木糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖,其比例分别为:阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=13∶2∶29∶39∶17;阿拉伯糖:木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=12∶4∶24∶45∶15。
- 李健刘宁陈平闫恩志安广军
- 关键词：香菇多糖单糖组成甘露糖质谱联用木糖标样
- 阿魏酸钠抑制脂多糖引起的星形胶质细胞IL-1β的表达
- 2013年
- 目的研究阿魏酸钠(SF)对脂多糖(LPS)引起的培养星形胶质细胞(AC)白细胞介素-1β(IL-1β)表达的抑制作用及机制。方法 将培养星形胶质细胞分为对照组、LPS组、SF(50,100,200μmol·L-1)组。细胞成熟后分组给药处理,ELISA法测定培养液中IL-1β表达,Western蛋白印迹法检测细胞IL-1β、磷酸化JNK1和磷酸化C-Jun蛋白表达。结果 星形胶质细胞在LPS(10 mg·L-1)刺激下IL-1β的释放量、IL-1β蛋白以及磷酸化JNK1、磷酸化C-Jun蛋白表达水平较对照组明显增高(P<0.01)。应用SF(50,100,200μmol·L-1)预处理6 h明显降低培养液中IL-1β含量,抑制星形胶质细胞IL-1β、磷酸化JNK1和磷酸化C-Jun蛋白表达水平。结论 SF可能通过下调JNK信号通路抑制星形胶质细胞IL-1β表达。
- 黄军张有志闫恩志
- 关键词：阿魏酸钠脂多糖星形胶质细胞炎症反应IL-1Β
- 吡格列酮对谷氨酸引起皮质神经元损伤的保护作用及其机制
- 2010年
- 目的观察吡格列酮对谷氨酸引起皮质神经元损伤的保护作用及机制。方法初生大鼠乳鼠的皮质神经元体外培养7 d后用于实验,建立谷氨酸损伤模型,用Hoechst33258核染色观察细胞凋亡的形态学改变,MTT法测定细胞活力,W estern印迹法检测磷酸化p38MAP激酶蛋白水平。结果谷氨酸组细胞存活率较对照组明显降低(P<0.01),吡格列酮、SB203580和一氧化氮合酶抑制剂(SMT)提高细胞存活百分率(P<0.01)。谷氨酸组细胞凋亡百分比较对照组增加(P<0.01),吡格列酮SB203580和SMT均能降低细胞凋亡百分比(P<0.01)。谷氨酸组磷酸化p38MAP激酶蛋白水平较对照组明显升高(P<0.01),吡格列酮明显降低磷酸化p38MAP激酶蛋白水平(P<0.01)。结论吡格列酮对谷氨酸引起体外培养皮质神经元损伤具有保护作用,此作用与降低磷酸化p38MAP激酶蛋白水平有关。
- 王蕊金英闫恩志刘卓隋海娟齐志敏
- 关键词：吡格列酮谷氨酸神经元P38MAP激酶
- 阿魏酸钠对脂多糖引起的大鼠海马炎症反应的抑制作用及其机制探讨被引量：6
- 2013年
- 目的研究阿魏酸钠抑制脂多糖所致大鼠海马炎症反应的信号传导机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、阿魏酸钠组(100、200 mg/kg)。对照组、模型组大鼠灌胃等量生理盐水,阿魏酸钠组大鼠灌胃给予不同剂量阿魏酸钠(100、200 mg/kg)。3周后,模型组、阿魏酸钠组脑室注射脂多糖建立损伤模型,对照组注射等量生理盐水。取海马CA1区,Western蛋白印迹观察白介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶3/6抗体(MKK3/MKK6)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶P38(p38MAPK)、磷酸化活化转录因子2(ATF-2)表达。RT-PCR检测IL-1β和iNOS的mRNA表达水平。结果阿魏酸钠(100、200 mg/kg)可对抗脑室内注射脂多糖引起的IL-1β、iNOS表达增加,抑制磷酸化的MKK3/6、p38MAPK和ATF-2表达(P<0.01)。结论阿魏酸钠通过抑制p38MAPK信号传导通路激活对抗脂多糖引起的海马炎症反应。
- 闫恩志范莹隋海娟刘婉珠刘卓金英
- 关键词：阿魏酸钠脂多糖海马
- MAP激酶家族在淀粉样β蛋白片段25～35引起的大鼠海马炎症反应及细胞凋亡中的作用(英文)被引量：11
- 2005年
- 目的 研究淀粉样β蛋白片段2 5～35(Aβ2 5～35)引起的大鼠海马炎症反应、细胞凋亡机制及抗炎药物布洛芬的保护作用。方法 大鼠灌胃给予布洛芬7.5mg·kg- 1,连续应用3周,脑室内单次注射Aβ2 5～35(10 μL ,1mmol·L- 1) ,注射后继续应用布洛芬1周后,取脑,进行尼氏染色和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色,研究海马CA1区锥体神经元形态学改变和星形胶质细胞激活。Western印迹观察白细胞介素 1β(IL 1β) ,胞外信号调节激酶1/ 2 (ERK1/ 2 ) ,有丝分裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK) ,蛋白激酶C(PKC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(caspase 3)蛋白表达。RT PCR分析IL 1βmRNA表达水平。结果 脑室内注射Aβ2 5～35可引起海马CA1区星形胶质细胞激活和浸润,IL 1β蛋白表达和IL 1βmRNA表达水平明显增加,这种炎症反应伴有海马CA1区锥体神经元损伤。另外,Aβ2 5～35也能引起磷酸化的p38MAPK蛋白表达较对照组明显增加,从对照组0 .16 7±0 .0 91增加到0 .4 97±0 .0 5 9(P <0 .0 1,n =4 )。使磷酸化的ERK1/ 2蛋白表达下调,ERK1的表达从对照组0 .14 6±0 .0 10下降到0 (P <0 .0 1,n =4 )。ERK2表达从对照组的0 .4 12±0 .0 5 4下降到0 .131±0 .0 38(P <0 .0 1,n =4 )。这些改变伴随有caspase
- 金英范莹闫恩志宗志红包翠芬李智
- 关键词：淀粉样Β-蛋白MAP激酶信号系统MAP激酶半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶细胞凋亡
- 香菇多糖口服液的研制被引量：8
- 2005年
- 以香菇子实体中提取的香菇多糖为原料,采用均匀设计方法确定口服液中关键性物料的配方。该产品适用于各年龄阶段的人们服用。
- 李健陈平刘宁闫恩志
- 关键词：均匀设计香菇多糖口服液
