邵建军 作品数:12 被引量:61 H指数:4 供职机构: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 国家自然科学基金 中国农业科学院院长基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
噬菌体表面展示技术 被引量:21 2003年 噬菌体展示技术 (PhageDisplayTechniques ,PDT)是一种用于筛选和改造功能性多肽的生物技术。自问世以来 ,它已被广泛应用于生命科学的许多领域。对噬菌体展示技术的基本原理、噬菌体表面展示系统研究以及噬菌体展示技术的应用、展望等进行了探讨 ,由此可以看出 :噬菌体展示技术的进一步发展 ,必将为生命科学及相关学科的发展带来深远的影响。 丁淑燕 苗向阳 朱瑞良 高玲美 邵建军关键词:噬菌体 基因工程 抗原决定簇 噬菌体抗体库的构建及抗猪脂肪细胞膜单抗的筛选 被引量:5 2005年 用猪脂肪细胞以免疫删减法免疫小鼠,取其脾细胞,RT-PCR扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,克隆入噬菌粒表达载体pCANTAB5E中,构建单链抗体(ScFv)文库。用猪脂肪细胞,对其进行3轮吸附-洗脱-富集,筛选抗猪脂肪细胞膜单抗。经ELISA检测,51/96克隆具有与猪脂肪细胞结合活性,阳性率为53%,与猪肝细胞则成阴性反应,初步证明了单抗的特异性,为猪脂肪细胞膜单抗的制备提供了一种新的方法。 苗向阳 丁淑燕 朱玉良 郝慧芳 邵建军关键词:脂肪细胞膜 噬菌体抗体库 单抗 结合活性 脾细胞 鸡硒缺乏症的诊治 被引量:1 2003年 邵建军 李居华 朱瑞良关键词:硒缺乏症 发病特点 临床症状 剖检病变 噬菌体抗体库技术 2006年 丁淑燕 苗向阳 朱瑞良 高玲美 邵建军关键词:噬菌体抗体库技术 基因克隆技术 可变区基因 丝状噬菌体 FAB段 噬菌体展示 单精注射法生产转基因小鼠的研究 被引量:3 2007年 精子胞质内显微受精技术(ICSI)作为辅助受精的一种手段,将体外受精研究和胚胎的显微操作技术结合起来,比以往对精子质量的要求大大降低,使其无论在畜牧业生产实践还是在哺乳动物的生殖生理基础研究中都有着十分重要的意义。本研究用小鼠精子及小鼠精子与GFP基因孵育后对小鼠卵母细胞进行ICSI,获得子代鼠。提取鼠尾基因组DNA,应用PCR、Southern blot进行整合检测。在发育至成年的11只小鼠中经PCR和Southernblot检测到3只阳性(27.3%)。结果表明,利用ICSI技术可以高效地生产转基因小鼠。 苗向阳 邵建军 方昌阁 丁淑燕 任慧英 朱瑞良关键词:转基因 胚胎 天然鼠源噬菌体单链抗体库的构建 被引量:4 2005年 A murine phage antibody library was constructed.First,the total RNA was extracted from fresh spleens of nonimmunized mice,then the cDNA library was achieved via reverse transcription PCR.Gene fragments encoding V_H and V_L were amplified and assembled into a single gene using a DNA linker encoding a polypeptide of 15 amino acid residues(Gly4Ser)3 through PCR.And finally the recombinant DNA fragments were cloned into the phagemid pCANTAB5E vector and introduced into E.coli TG1.The phagemid particles displaying functional ScFv were rescued by reinfection of helper phage M13K07,thus a murine antibody library was obtained. 邵建军 苗向阳 朱瑞良 丁淑燕 陈永福关键词:单链抗体 丝状噬菌体 噬菌体抗体库 噬菌体展示技术 DNA片段 体外表达 天然鼠源噬菌体抗体库的构建及抗羊抑制素基因工程单抗的筛选 被引量:4 2009年 【目的】构建单链抗体(ScFv)噬菌体表面展示文库,从中筛选抗羊抑制素单抗并进行表达,建立制备羊抑制素单抗的新方法。【方法】用未经免疫的多种小鼠脾细胞作为基因来源,采用噬菌体抗体库技术,构建天然噬菌体表面抗体文库。用羊抑制素对其进行3轮吸附-洗脱-富集,筛选抗羊抑制素单抗,用ELISA检测其抗原结合活性。【结果】构建了天然鼠源噬菌体抗体库,为筛选和制备各种单链抗体提供了一个平台。用羊抑制素对其进行筛选,制备抗羊抑制素单抗,经ELISA检测,55/96克隆具有与羊抑制素结合活性,阳性率为57%。【结论】制备的羊抑制素可溶性ScFv及其表面展示噬菌体抗体有很好的抗原结合活性,为羊抑制素单抗的制备提供了一种新的方法。 苗向阳 邵建军 朱瑞良 王建民关键词:噬菌体抗体库 单链抗体 微生态制剂的作用及应用中应注意的问题 被引量:14 2003年 邵建军 朱瑞良关键词:微生态制剂 饲料添加剂 菌群平衡 机体免疫力 毒素 代谢产物 单精注射法生产转GFP基因猪胚胎的研究 被引量:6 2007年 卵胞质内单精子注射(ICSI)的出现为治疗人类男性不育提供了新的途径。作为一种家畜胚胎工程新技术,ICSI可以解决猪的多精子受精问题。本研究用冷冻/解冻的猪精子与GFP基因孵育后对猪IVM卵母细胞进行ICSI,通过对猪ICSI卵母细胞发育能力和基因表达效率的分析,初步研究以精子为载体的转基因与卵细胞质内单精注射相结合的技术(SMGT-ICSI)生产转基因猪胚胎的技术路线的可行性。用GFP基因转染的精子注射后化学激活的ICSI卵母细胞基因表达率显著高于电激活处理的ICSI卵母细胞的基因表达率。用精子头部注射的猪卵母细胞和用完整精子注射的猪卵母细胞总基因表达效率无显著差异(P>0.05)。结果表明,用冷冻/解冻后的猪精子或精子头部与外源DNA孵育后通过ICSI方法生产转基因胚胎是可行的。 苗向阳 方昌阁 邵建军 朱瑞良 任慧英关键词:卵母细胞 胚胎 抗猪脂肪细胞膜抗体库的构建 2005年 通过免疫方法降低猪脂肪含量、提高胴体品质成为人们研究的一个新课题,噬菌体展示技术的完善与发展为实现这一研究目的提供了条件,成为制备高亲和性抗体的有力工具。用猪脂肪细胞免疫小鼠,提取mRNA,反转录成cDNA。通过PCR扩增出重链可变区基因VH和轻链可变区基因VL,再用编码(Gly4Ser)3的Linker将VH、VL连接在一起,克隆入pCANTAB5E中,转化大肠杆菌,经辅助噬菌体M13K07超感染,构建噬菌体抗体库并进行筛选。 丁淑燕 苗向阳 朱瑞良 邵建军关键词:畜牧 兽医科学基础学科 猪脂肪细胞膜 抗体库 噬菌体展示技术