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果蝇Bves蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备: 2013年; 目的为了进一步研究细胞粘附分子Bves在肿瘤的发生及转移过程中的作用,需要获得Bves蛋白并制备其抗体。方法根据Flybase网站所提供的Bves基因序列,以果蝇的总RNA为模板进行PCR扩增,得到Bves部分编码序列,随后将其连接到pET-28a载体上获得原核表达载体。重组表达质粒经酶切测序鉴定后,转化入大肠杆菌BL21感受态细胞中,并用IPTG诱导融合蛋白的表达,使用活化的Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,将纯化后得到的His-Bves融合蛋白免疫注射新西兰大白兔制备Bves多克隆抗体,并用Western blot对抗体效价进行检测。结果和结论获得了Bves原核表达重组融合蛋白及高效价的兔抗Bves多克隆抗体,为后期深入研究Bves基因的功能奠定了基础。; 彭佩莹赵阳王静周英郝建军曾群陈思行任恋戴悦袁婺洲吴秀山邓云戴国; 关键词：果蝇融合蛋白多克隆抗体

农村居家养老服务的发展与问题研究: 人口老龄化是我国社会发展面临的一个重要课题。能否正确处理好老龄化带来的老年人养老问题,直接关系到经济和社会的可持续发展,关系到科学发展观的实现和全面小康社会的建设。相对于城市,农村地区的人口老龄化问题更加突出。由于计划生...; 赵阳; 关键词：居家养老服务农村; 文献传递

农村居家养老服务的发展与问题研究——以湖南省浏阳市为例: 人口老龄化是我国社会发展面临的一个重要课题。能否正确处理好老龄化带来的老年人养老问题,直接关系到经济和社会的可持续发展,关系到科学发展观的实现和全面小康社会的建设。相对于城市,农村地区的人口老龄化问题更加突出。由于计划生...; 赵阳; 关键词：农村居家养老人口老龄化生育政策养老方式

gcm蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备: 2013年; gcm(glial cells missing)是调控神经元细胞和神经胶质细胞相互转化的一个基因开关.在gcm功能缺损的突变体中,预期的神经胶质细胞发育成神经元细胞;而在gcm过表达的突变体中,预期的神经元细胞转化为神经胶质细胞.此外,gcm还调控血浆细胞发育.为了进一步研究gcm在发育中的功能,需要获得gcm蛋白并制备其抗体.根据已报道的gcm基因序列,以果蝇cDNA文库为模板进行PCR扩增得到gcm部分编码区序列,然后将其连接到pET-28a载体以获得原核表达载体.重组载体经酶切测序鉴定确认后,转化大肠杆菌(E.coli)BL21,并用IPTG诱导融合蛋白表达.采用Ni-IDA凝胶柱亲和纯化蛋白,将纯化的His-gcm融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体效价.获得的gcm原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗gcm多克隆抗体,为gcm功能的进一步研究奠定了基础.; 赵阳彭佩莹王静周英张义唐超任恋彭夕洋陈思行李永青吴秀山; 关键词：GCM 融合蛋白多克隆抗体

果蝇Domeless蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备研究: 2013年; 在果蝇(Drosophila melanogaster)的研究中发现Domeless接受器参与发育期间的JAK/STAT信号调节,在心脏疾病的发生机制中发挥重要作用.为了克隆Domeless,我们利用生物信息学选择果蝇Domeless基因抗原亲水区,将扩增出的PCR片段克隆到原核表达pET-28a载体中,转入E.coli(Escherichia coli)中后通过IPTG(Isopropylβ-D-thiogalactoside)诱导融合蛋白表达,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,纯化后的His-Domeless融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.用Western blot检测抗体的效价和特异性.获得了Domeless原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗Domeless多克隆抗体,为后续Domeless功能研究奠定了基础.; 唐超任恋刘宪楚李容江志钢赵阳廖四芳袁佳佳莫小阳吴秀山; 关键词：果蝇原核表达多克隆抗体

抗果蝇MRJ蛋白单克隆抗体的制备和鉴定: 2013年; 制备抗果蝇MRJ蛋白单克隆抗体可用于研究果蝇mrj的生物学功能,使用IPTG诱导重组质粒pET28a-mrj在大肠杆菌Rosetta中表达,重组蛋白经过Ni-IDA凝胶柱亲和纯化后免疫BALB/c小鼠。然后取免疫好的小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,经克隆和筛选获得了能分泌抗果蝇MRJ蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。腹水制备后获得单克隆抗体,通过ELISA和Western Blot对所获得的抗体进行鉴定,结果表明所制备单克隆抗体能够特异性结合于原核及真核细胞表达的MRJ蛋白,可用于研究mrj基因的生物学功能。; 廖四芳刘丹宋文刘明赵阳唐超吴秀山王跃群; 关键词：细胞融合单克隆抗体

斑马鱼心脏标记基因VMHC多抗血清的制备被引量：2: 2011年; 斑马鱼基因VMHC(Ventricular myosin heavy chain)是心脏发育早期的标志基因,制备该基因多抗血清,首先通过生物信息学方法,选择VMHC基因中特异性强、具亲水性的一段核苷酸序列(3 772～4 221 bp),通过PCR扩增,将片段重组到原核表达载体pGEX-4T-1,通过原核诱导表达获得含有表达目的片段的融合蛋白,以该融合蛋白免疫小鼠,获得VMHC多克隆抗鼠血清.对该多抗血清抗体进行验证,结果具有很好特异性和较高效价,可以用作western-blot、免疫印迹等试验分析.; 王琨满贤刘华友李志李发祥赵阳廖四芳吴秀山袁婺洲; 关键词：标记基因融合蛋白

果蝇odd蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备研究被引量：1: 2011年; odd是一个新发现的心脏特异表达基因。为了进一步研究odd在心脏发育中的功能,根据已报道的odd基因序列,以果蝇cDNA文库为模板进行PCR扩增,将所得的odd部分编码区序列连接到pET-28a载体上构建原核表达载体;重组子经酶切测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21菌株,IPTG诱导融合蛋白表达,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,纯化后的His-odd融合蛋白免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体,Western Blot检测抗体活性。结果表明,获得了odd原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗Odd多克隆抗体,为后续的odd功能研究奠定了基础。; 张义叶湘漓鲁建鑫彭佩莹赵阳江志钢李发祥王跃群袁婺洲吴秀山邓云; 关键词：ODD 融合蛋白原核表达多克隆抗体

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赵阳