赵豪
- 作品数:7 被引量:8H指数:2
- 供职机构:遵义医学院第五附属(珠海)医院更多>>
- 发文基金:珠海市医学重点学科建设基金博士科研启动基金贵州省省长基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 兔成骨细胞和脂肪细胞横向分化的初步研究
- 目的探讨兔成骨细胞和脂肪细胞两者横向分化的能力和方法。方法选取3月龄新西兰大白兔,获取、分离培养脂肪细胞,天花板贴壁法使其去分化,去分化脂肪细胞进行成骨诱导3周后行茜素红、碱性磷酸酶和I型胶原酶免疫组化染色。另选取出生7...
- 王兆杰安荣泽张弛赵豪齐新文赵俊延王吉博李哲
- 兔体外成骨细胞和脂肪细胞横向分化的初步研究
- 目的:探讨成骨细胞和脂肪细胞两者间横向分化的能力和方法,为进一步行缝隙连接通讯对其调控的实验做准备。
方法:选取3月龄新西兰大白兔腹股沟处脂肪组织进行分离培养脂肪细胞,天花板贴壁法对脂肪细胞进行细胞去分化培养,利用...
- 赵豪
- 关键词:脂肪细胞去分化成骨细胞横向分化
- 文献传递
- 脂质体介导的hBMP—2基因转染对兔ADSCs的生长增殖的影响
- 目的:探讨脂质体介导的人骨形态发生蛋白—2(human bone morphogenetic protein hBMP—2)基因转染对兔脂肪干细胞(adipose—adrived stem cells ADSCs)生长、...
- 安荣泽刘凡凡王兆杰齐新文袁小洪赵俊延杨晋赵豪胡小军陈军平温广宇
- 关键词:骨形态发生蛋白脂肪干细胞脂质体转染生长增殖
- 文献传递
- 兔成骨细胞和脂肪细胞横向分化的研究被引量:6
- 2012年
- 目的探讨兔成骨细胞和脂肪细胞两者横向分化的能力和方法。方法选取3个月龄新西兰大白兔,获取、分离培养脂肪细胞,天花板贴壁法使其去分化,去分化脂肪细胞进行成骨诱导3周后行茜素红、碱性磷酸酶(ALP)和I型胶原酶免疫组织化学染色。另选取出生7d内的乳兔,取颅骨骨块利用酶消.组织块培养法培养成骨细胞并传代培养,对其进行成脂诱导3周后行油红0染色、逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA的表达。结果提取的成熟脂肪细胞去分化后为长梭形成纤维细胞状;成骨诱导后,I型胶原免疫组织化学染色显示实验组细胞内表达出I型胶原,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05);各组细胞第3天、第7天、第14天不同时段的ALP活性实验组较对照组高(P〈0.05),分别为0.165±0.007、0.253±0.005、0.345±0.007和0.067±0.004、0.076±0.006、0.082±0.003,且随着培养时间的延长实验组ALP活性逐渐增强(组内比较P〈0.05);提取的乳兔颅骨成骨细胞呈短梭形,成脂诱导3周后油红O染色阳性,PPARγ/mRNA表达阳性,对照组为阴性,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论成熟脂肪细胞可以通过体外培养实现去分化,脂肪细胞和成骨细胞在一定条件下可以相互转化。
- 王兆杰安荣泽张弛赵豪齐新文赵俊延
- 关键词:脂肪细胞去分化成骨细胞
- 兔成骨细胞和脂肪细胞横向分化的初步研究
- 目的探讨兔成骨细胞和脂肪细胞两者横向分化的能力和方法。方法选取3月龄新西兰大白兔,获取、分离培养脂肪细胞,天花板贴壁法使其去分化,去分化脂肪细胞进行成骨诱导3周后行茜素红、碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原酶免疫组化染色。另选取出生7...
- 王兆杰赵豪安荣泽赵俊延王吉博齐新文袁小洪
- 关键词:脂肪细胞去分化成骨细胞横向分化
- 脂质体介导人骨形态发生蛋白2基因转染对兔脂肪干细胞生长增殖的影响被引量:2
- 2010年
- 背景:脂质体对细胞具有毒副作用,而外源性基因的胞内导入亦在细胞的代谢方面有所影响,因此脂质体介导人骨形态发生蛋白2基因转染脂肪干细胞对其在生长、增殖方面有无显著影响值得探讨。目的:观察脂质体介导的人骨形态发生蛋白2基因转染对兔脂肪干细胞生长、增殖的影响。方法:从兔脂肪组织中提取脂肪干细胞,体外培养传代,取第4代细胞分别转染人骨形态发生蛋白2基因和增强型绿色荧光蛋白基因,倒置显微镜下连续观察转染后的细胞形态变化及生长情况。荧光显微镜下计数转染后48h可发绿色荧光细胞的个数估算瞬时转染效率,MTT法绘制染后细胞的生长曲线,并计算群体倍增时间。结果与结论:转染后48h,细胞体积变大,胞浆丰富,部分呈圆形或椭圆形改变。荧光显微镜下计数瞬时转染率为(18.0±0.42)%。MTT法绘制细胞生长曲线发现:转染后细胞较未转染的细胞生长速率略慢,但转染与未转染组细胞的生长曲线大致一样,均呈"S"形,且两者的总体趋势变化不大。转染后人骨形态发生蛋白2组的细胞群体倍增时间为55.51h,EGFP组群体倍增时间约为53.58h,未转染组的群体倍增时间46.10h,差异无显著意义(P>0.05)。提示脂质体可以介导人骨形态发生蛋白2基因和绿色荧光蛋白基因转染兔脂肪干细胞,并对细胞的生长、增殖无明显影响。
- 安荣泽刘凡凡王兆杰袁小洪齐新文赵俊延杨晋赵豪胡小军陈军平温广宇
- 关键词:骨形态发生蛋白脂肪干细胞脂质体转染生长增殖
- 重组pcDNA3.1-hBMP-2转染兔脂肪干细胞体外诱导的成骨分化
- 2011年
- 背景:骨形态发生蛋白2具有很强的诱导干细胞成骨活性。目的:构建人骨形态发生蛋白2基因真核表达载体,探讨其转染脂肪干细胞后的成骨效果。方法:通过噬菌斑原位杂交筛选人混合细胞cDNA文库获得人骨形态发生蛋白2基因,与真核表达载体pcDNA3.1-连接,构建重组质粒pcDNA3.1-hBMP-2。利用脂质体LipofectamineTM2000分别介导人骨形态发生蛋白2基因、EGFP基因转染第4代脂肪干细胞,并经G418进行筛选。结果与结论:酶切鉴定及DNA测序结果证实重组质粒pcDNA3.1-hBMP-2构建成功。经计算脂质体介导的脂肪干细胞瞬时转染率为(18.0±0.42)%,并经过G418筛选后获得了稳定转染的细胞。细胞生长曲线表明转染后对脂肪干细胞生长、增殖无明显影响。ELISA检测发现人骨形态发生蛋白2组的人骨形态发生蛋白2因子表达量均高于EGFP组及未转染组,且能够稳定表达。经人骨形态发生蛋白2基因转染的脂肪干细胞的Ⅰ型胶原含量、碱性磷酸酶活性以及钙结节数目均比EGFP组及未转染组有明显升高。
- 安荣泽王兆杰刘凡凡齐新文袁小洪陈军平赵俊延胡小军杨晋赵豪
- 关键词:骨形态发生蛋白2脂肪源性干细胞转染骨组织工程