蒋桂云
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：北京交通大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 携带Aβ37-42肽段的重组乙肝病毒表面抗原病毒样颗粒的制备
- 目的：阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是引起老年痴呆最常见的原因,随着人口老龄化,世界人口中AD患者迅速增加,而目前临床上尚无特异的防治方法。本研究尝试采用杆状病毒表达系统,制备携带Aβ37-42...
- 蒋桂云
- 关键词：病毒样颗粒免疫原性阿尔茨海默病
- 文献传递
- 基于T7启动子表达系统的牛副流感病毒3型微型基因组的构建与拯救
- 2016年
- 【目的】通过负链RNA病毒反向遗传学操作,构建并拯救以T7启动子表达系统为基础的牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)微型基因组。【方法】分别构建表达该病毒NP、P和L蛋白的辅助质粒px8δT-PT1-b PIV3-NP、px8δT-PT1-b PIV3-P和px8δT-PT1-b PIV3-L以及含增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)开放读码框(Open reading frame,ORF)、BPIV3前导序列(Leader region)、转录起始信号(Gene start signal,GS)、转录终止信号(Gene end signal,GE)和尾随序列(Trailer region)等顺式作用元件(Cis-acting elements)的微型基因组质粒p SC11-b PIV3-EGFP,鉴定正确后,采用2种不同方法拯救BPIV3微型基因组,并通过观察荧光表达情况判断是否拯救成功。【结果】成功构建了基于T7启动子表达系统的BPIV3微型基因组,并实现了拯救。【结论】该系统的成功构建,有助于今后对BPIV3开展基因修饰研究。
- 姜男郑妍鹏蒋桂云张伟焦月盈付远辉彭向雷何金生
- 关键词：反向遗传学拯救
- 基于T7启动子表达系统的呼吸道合胞病毒微型基因组的拯救被引量：2
- 2013年
- 目的:以T7启动子表达系统为基础,通过RNA病毒反向遗传学操作,拯救人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)微型基因组。方法:构建可分别表达RSV四种核壳体蛋白的辅助质粒px8δT-PT1-N,px8δT-PT1-P,px8δT-PT1-M2-1和px8δT-PT1-L以及含增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorecent protein,EGFP)开放读码框(open reading frame,ORF),RSV病毒前导序列(leader region/genomic promotor),转录起始信号(gene start,GS)、转录终止信号(gene end,GE)和尾随序列(trailer region/antigenomic promoter)等顺式作用元件(cis-acting elements)的微型基因组重组质粒pSC11-E,在上述的5个质粒中,均引入T7 RNA多聚酶(T7 RNA polymerase,T7 RNP)启动子,经鉴定正确后,先以pSC11-E转染RSV感染的可组成型表达T7多聚酶的BSR T7/5细胞进行拯救,确定微型基因组编码质粒设计的合理性,而后通过5个质粒共转染BSR T7/5细胞,并通过荧光显微镜观察荧光的表达情况判断拯救成功与否。结果:成功构建了基于T7启动子表达系统的RSV微型基因组5质粒拯救系统,并实现了拯救。结论:该系统的成功构建,有助于今后对RSV病毒开展基因修饰研究。
- 袁锐付远辉何金生焦月盈蒋桂云张梅彭向雷阚学通
- 关键词：呼吸道合胞病毒反向遗传学
- 携带Aβ37-42肽段的重组乙肝病毒表面抗原病毒样颗粒的制备
- 2014年
- 目的采用杆状病毒表达系统制备携带Aβ37-42肽段的重组乙肝病毒表面抗原(HBsAg)病毒样颗粒(VLPs)。方法将Aβ42分子的C末端6个氨基酸进行3个串联后,插入到HBsAg的113 aa与114 aa之间,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建表达HBsAg Aβ37-42的重组杆状病毒载体,转染Sf9细胞,Western blot鉴定目的蛋白表达情况,用氯化铯(CsCl)密度梯度超速离心纯化,电镜观察VLPs的形态。结果制备并纯化出HBsAg VLPs和携带Aβ37-42肽段的HBsAg VLPs(HBsAgAβ37-42 VLPs)。结论制备携带Aβ抗原表位的重组HBsAg作为一种阿尔茨海默病(AD)疫苗具有一定的可行性,值得进一步探讨。
- 蒋桂云陈念华付远辉焦月盈徐青何金生
- 关键词：阿尔茨海默病乙肝病毒表面抗原杆状病毒表达系统病毒样颗粒
