臧德跃
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 羔羊外周血单个核细胞转化MTT比色法最佳检测条件的筛选被引量：6
- 2011年
- 为了建立羔羊外周血单个核细胞转化检测的MTT比色法,对影响MTT比色法的3个主要因素(包括刺激原、细胞浓度、培养时间)进行了探索性的研究。结果表明,MTT法检测的最佳条件为:植物血凝素(PHA)浓度为10μg/mL,细胞密度为1×107个/mL;或者刀豆蛋白A(ConA)浓度为40μg/mL,细胞密度为2×107个/mL。反应条件以37℃培养48 h为佳。
- 张冰冰赵魁贺文琦王栋臧德跃陈克研王改丽高丰
- 关键词：羔羊外周血单个核细胞MTT
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒呼吸道感染模型的建立及其在体内的动态分布
- 猪血凝性脑脊髓炎(Porcine hemagglutinating encephalomyelitis)是由血凝性脑脊髓炎病毒(Hemagglutinating encephalomyelitis virus, HEV)...
- 臧德跃
- 关键词：动物模型荧光定量RT-PCR病毒分布
- 文献传递
- 一种猪血凝性脑脊髓炎细胞培养灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种猪血凝性脑脊髓炎细胞培养灭活疫苗，包含有抗原猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV-67N)和佐剂。本发明以PK-15细胞增殖HEV-67N，优化病毒的增殖条件，提高疫苗的质量和使用效果，制备的猪血凝性脑脊髓炎细胞培...
- 陈克研高丰贺文琦陆慧君宋德光高巍赵传博李志萍兰云刚臧德跃
- 绵羊IFN-γ和IL-2基因SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法的建立及应用被引量：5
- 2010年
- 为探讨传染性脓疱病毒感染后机体的细胞免疫应答,从分子水平对传染性脓疱病毒的免疫机制进行了深入探讨。首先针对Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2以及管家基因GAPDH的mRNA序列分别设计了1对特异性引物,扩增相应的基因片段并构建含有相应基因序列的重组质粒,以所构建的重组质粒作为阳性标准品,建立了用于IFN-γ、IL-2及GAPDH检测的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法。该方法线性关系良好,IFN-γ、IL-2和GAPDH标准曲线的相关系数均达0.99以上;敏感性高,初始模板的检出下限均达1×103copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性融解峰;重复性好,组内与组间的变异系数均小于3%。应用该方法对传染性脓疱病毒感染羔羊外周血白细胞中的IFN-γ、IL-2 mRNA的表达水平进行了检测。结果表明,建立的real-time PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点,可用于绵羊Th1型细胞因子的检测及定量分析。
- 张冰冰赵魁宋德光臧德跃王栋贺文琦陈克研王改丽高丰
- 关键词：TH1型细胞因子荧光定量聚合酶链反应
- 一种猪血凝性脑脊髓炎细胞培养灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种猪血凝性脑脊髓炎细胞培养灭活疫苗，包含有抗原猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV-67N)和佐剂。本发明以PK-15细胞增殖HEV-67N，优化病毒的增殖条件，提高疫苗的质量和使用效果，制备的猪血凝性脑脊髓炎细胞培...
- 陈克研高丰贺文琦陆慧君宋德光高巍赵传博李志萍兰云刚臧德跃
- 文献传递
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒在人工感染仔猪体内侵染过程和分布规律的研究
- 2011年
- 为研究血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)在人工感染仔猪体内的侵袭过程和分布规律,本实验采用滴鼻的方式感染5头1日龄未食初乳仔猪,并在感染后每隔24 h迫杀1头仔猪,采集鼻黏膜、气管、口腔黏膜、舌、食管、胃、肠、心肌、肝、脾、肺、肾、各段脊髓和脑等组织脏器制作切片,通过间接免疫组织化学方法检测HEV在仔猪体内的动态侵袭过程。此外,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测病毒在各组织脏器中的分布情况。结果显示:感染病毒后2 d～3 d,仔猪出现精神沉郁、全身震颤等中枢神经系统症状,免疫组织化学检测可见病毒抗原首先出现于脑桥,并进一步蔓延至延髓和各段脊髓,最后进入小脑浦肯野氏细胞和大脑皮层锥体细胞中;Real-time PCR检测结果显示病毒广泛分布于大脑皮层、脑桥、延髓、脊髓和小脑等中枢神经系统的组织中,其中大脑皮层的检出率最高。
- 王栋臧德跃赵魁张冰冰宋德光贺文琦陈克研高丰
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒免疫组织化学
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4
- 2011年
- 根据GenBank中的猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)S蛋白基因的保守序列设计合成1对特异性引物,经PCR扩增S基因并构建含有该基因片段的重组质粒,将该重组质粒作为阳性标准品,建立了检测HEV的SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法。结果显示,该方法线性关系良好,相关系数为0.994;敏感性高,检测下限为1.6×104 copies/μL;特异性强,与牛冠状病毒、伪狂犬病病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒不发生交叉反应;并且重复性好,组内、组间的变异系数均小于2%。应用该方法对采集的20份疑似HEV感染病料进行检测,其中16份为阳性,而用常规PCR检测同样的样品,仅8份为阳性。表明建立的SYBRGreen Ⅰ real-time PCR方法具有快速、特异、敏感、重复性好等优点,可用于临床上HEV的检测及定量分析。
- 臧德跃王栋李明谦赵魁张冰冰陆慧君贺文琦陈克研岳占碰高丰
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒荧光定量聚合酶链反应
