胡艺冰
- 作品数：11 被引量：19H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CEA-TCB双特异性抗体cibisatamab增强T细胞对胃癌类器官的免疫杀伤作用被引量：2
- 2020年
- 目的研究T细胞联合CEA^-TCB双特异性抗体cibisatamab对胃癌的作用。方法采用H2B-mCherry慢病毒感染人胃癌原代细胞,体外3D培养建立人胃癌类器官;用流式细胞仪检测人胃癌组织及其类器官中癌胚抗原(CEA)的表达情况;用流式细胞仪从健康人外周血中分离出CD8^+T细胞并与人胃癌类器官进行体外共培养;采用红色荧光蛋白(mCherry)的融合度分析检测类器官的生长情况;用流式细胞仪从类器官中分选出不表达CEA(CEA^-/lo)和表达CEA(CEA^+)的细胞亚群,体外增殖实验比较T细胞与cibisatamab联合作用对两者增殖的影响,流式细胞仪检测T细胞联合cibisatamab作用对两者细胞凋亡的影响;采用荧光定量PCR比较两者CD133、CD44和Lgr5基因的表达水平;体外成球实验比较两者自我更新能力,小鼠体内有限稀释成瘤实验比较两者的成瘤能力。结果流式检测结果显示,人胃癌类器官具有和亲代胃癌组织相似的CEA表达率,不同人胃癌类器官中CEA表达具有异质性;T细胞联合cibisatamab治疗后,残留的类器官细胞中CEA^-/lo细胞比例均显著上升;生长曲线显示,CEA表达水平低的胃癌类器官对T细胞联合cibisatamab作用敏感性显著低于高表达CEA的类器官,CEA^-/lo细胞对T细胞联合cibisatamab作用敏感性显著低于CEA^+细胞;流式检测凋亡显示,CEA^+细胞经T细胞和cibisatamab联合处理后凋亡细胞比例更高;荧光定量PCR显示,CEA^-/lo细胞中CD133、CD44和Lgr5 mRNA表达量显著高于CEA^+细胞;体外成球实验显示,CEA^-/lo细胞形成细胞球体量显著高于CEA^+细胞;体内有限稀释成瘤实验显示,CEA^-/lo细胞较CEA^+细胞显著富集可成瘤细胞。结论CEA^-TCB双特异性抗体cibisatamab可以增强T细胞对胃癌类器官的免疫杀伤,其作用效果与CEA的表达率呈正相关;不表达CEA的细胞是对T细胞联合cibisatamab治疗耐药的细胞亚群,且富集肿瘤干细胞,是导致免疫治疗后复发的主导细胞亚群
- 颜畅胡艺冰赵晖米昱龙
- 关键词：胃癌肿瘤干细胞
- 肿瘤相关成纤维细胞分泌exosome增强肿瘤干细胞化疗耐药性研究
- 在结直肠癌中，肿瘤干细胞（CSCs）与化疗耐药密切相关，但其机制目前并不清楚。肿瘤相关成纤维细胞（CAFs)与结直肠癌的的复发有关，清除组织内的CAFs可以增强肿瘤细胞的化疗敏感性。本研究旨在探索CAFs是否可以通过调节...
- 胡艺冰
- 关键词：肿瘤干细胞肿瘤相关成纤维细胞化疗耐药性
- 跨膜型TNF-α与NF-κB在三阴性乳腺癌中的表达及其意义被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨跨膜型TNF-α与磷酸化NF-κB在三阴性乳腺癌(TNBC)中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化法检测52例三阴性乳腺癌与30例非三阴性乳腺癌组织中跨膜型TNF-α与磷酸化NF-κB的表达,并分析其与三阴性乳腺癌各临床指标的相关性。结果:跨膜型TNF-a与磷酸化NF-κB在三阴性乳腺癌中的阳性表达率分别为82.7%(43/52)和67.3%(35/52),均显著高于非三阴性乳腺癌,差异具有统计学意义(P<0.05)。在三阴性乳腺癌中,跨膜型TNF-α及磷酸化NF-κB的表达与肿瘤大小和淋巴结转移与否显著相关(P<0.05),且跨膜型TNF-α与磷酸化NF-κB的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论:跨膜型TNF-α及磷酸化NF-κB高表达可能预示着TNBC更差的化疗敏感性和预后,有望成为TNBC预后的重要预测因子。跨膜型TNF-α通过激活磷酸化NF-κB激活其下游的抗凋亡和促增殖因子,与三阴性乳腺癌的发生发展有关。
- 晏昱婧胡小鹏胡艺冰夏耘吴亚群
- 关键词：三阴性乳腺癌跨膜型TNF-Α耐药
- 下调P55PIK基因表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞体外增殖和迁移能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制P55PIK基因表达,观察下调P55PIK对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231体外增殖和迁移能力的影响。方法利用脂质体将特异性针对P55PIK的siRNA瞬时转染P55PIK高表达细胞株MDA-MB-231,以转染无关序列siRNA(siRNA-NC)和未转染细胞作为对照。通过Western blot检测其对P55PIK表达的下调效果,MTT法和Transwell实验分别检测MDA-MB-231细胞的增殖和迁移能力。结果 siRNA-P55PIK明显下调MDA-MB-231细胞中P55PIK蛋白的表达;MTT检测显示下调P55PIK后,MDA-MB-231生长明显受到抑制;Transwell实验显示siRNA-P55PIK组穿膜细胞数为(5.2±1.3),显著低于siRNA-NC组(18.6±3.8)和空白对照组(18.4±4.3)(P<0.05)。结论应用RNAi抑制P55PIK基因的表达可抑制MDA-MB-231细胞体外增殖和迁移能力,为乳腺癌的靶向治疗提供了新思路。
- 李襄胡艺冰孙黎曹小年王桂华丁庆庆吴亚群胡俊波
- 关键词：乳腺癌RNA干扰增殖迁移
- 肿瘤相关成纤维细胞诱导乳腺癌分化细胞去分化为癌干细胞的研究被引量：3
- 2014年
- 目的观察乳腺癌相关成纤维细胞（TAFs）在乳腺癌分化细胞去分化为肿瘤干细胞（CSCs）中的作用。方法用流式细胞仪从8例原代乳腺癌组织中分离TAFs并用免疫荧光鉴定；采用成球实验研究TAFs对乳腺癌腺上皮细胞自我更新能力的影响，并检测TAFs处理前后干细胞表型CD44^＋CD24^-1/low的比例变化，观察TAFs对去分化的影响。结果从新鲜乳腺癌组织中分离出TAFs，间质细胞标志物波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色呈阳性。TAFs与乳腺癌腺上皮细胞（BCCs）共接种能增强其自我更新能力，共接种组和对照组的成球数分别为（71．67±3．51）和（24．67±1．53）个（P〈0．01）。TAFs的条件培养基（CM）能增强乳腺癌腺上皮细胞自我更新能力，CM处理组和对照组的成球数分别为（74．67±3．06）和（30．33±3．21）个（P〈0．01）。TAFs能增强乳腺癌分化细胞的自我更新能力，分化细胞（non—CD44^＋CD24-／low）经CM处理后的成球数为（86．00±3．00）个，而对照组为（15．33±1．53）个（P〈0．01）；TAFs能促进乳腺癌分化细胞的去分化，13013-CD44^＋CD24^-1/low细胞经CM处理后，CD44^＋CD24^-1/low比例明显上升达（52．13±0．70）％，对照组为（17．07±0．65）％（P〈0．01）。结论TAFs能通过旁分泌的方式增强乳腺癌腺上皮细胞的自我更新能力，并促进分化细胞去分化为肿瘤干细胞。
- 罗智勇胡艺冰张哲覃吉超吴亚群
- 关键词：肿瘤相关成纤维细胞乳腺癌肿瘤干细胞去分化
- Ki-67阴性结直肠癌细胞的增殖和自我更新能力的研究被引量：2
- 2015年
- 目的观察结直肠癌中Ki-67阴性(Ki-67-/low)细胞在肿瘤增殖及自我更新(self-renew)中的作用,探讨将Ki-67-/low作为分离肿瘤干细胞标记物的应用。方法通过将人结直肠癌标本消化成为单细胞,感染Ki-67启动子驱动GFP表达(pKi-67-GFP)的慢病毒后,注射至NOD/SCID小鼠背部建立pKi-67-GFP结直肠癌移植瘤模型;用流式细胞仪从移植瘤内分离出GFP+EpCAM+细胞(Ki-67+癌上皮细胞)和GFP-/lowEpCAM+细胞(Ki-67-/low癌上皮细胞),并采用免疫印迹验证Ki-67的表达;用流式细胞仪检测Ki-67-/low的细胞周期;采用PKH26标记细胞后,根据滞留细胞分析其在体内的增殖能力;采用荧光定量PCR(qPCR)研究Ki-67细胞中CD133、CD44和Lgr5等肿瘤干细胞相关基因的表达水平,并用成球实验研究Ki-67-/low结直肠癌细胞的自我更新能力。结果从新鲜人结直肠癌移植瘤中分离出GFP+EpCAM+细胞和GFP-/lowEpCAM+细胞,Western blot检测显示GFP+EpCAM+细胞高表达Ki-67,GFP-/lowEpCAM+细胞不表达Ki-67;细胞周期检测显示,(82.25±3.16)%的Ki-67-/low细胞在G0/G1期,(51.67±4.11)%的Ki-67+细胞在G0/G1期,体内PKH26标记滞留实验显示Ki-67-/low和Ki-67+细胞分别含(81.53±5.85)%和(4.57±1.05)%PKH26阳性细胞,差异有统计学意义(P<0.01),提示Ki-67-/low细胞主要是G0/G1期细胞,在体内处于慢增殖状态;荧光定量PCR证明Ki-67-/low细胞CD133、CD44和Lgr5的mRNA水平为Ki-67+细胞的(3.47±0.79)、(6.18±1.65)和(4.67±1.15)倍,差异有统计学意义(P<0.05),体外成球实验,Ki-67-/low及Ki-67+细胞的成球数量分别为(83.00±9.54)和(8.00±2.66)(P<0.01),提示Ki-67-/low细胞高表达CD133、CD44和Lgr5等肿瘤干细胞相关标记物,并具有显著的自我更新能力,富集肿瘤干细胞。结论 Ki-67阴性的结直肠癌细胞具有慢增殖的特点,较Ki-67阳性结直肠癌细胞具有更强的成球能力,在结直肠癌的自我更新中起重要作用,并有可能作为肿瘤干细胞的标记物。
- 颜畅胡艺冰穆磊黄开禹覃吉超
- 关键词：KI-67结直肠癌自我更新肿瘤干细胞
- tmTNF-α在乳腺浸润性导管癌中的表达与化疗耐药的关系
- 目的：检测tmTNF-α在乳腺浸润性导管癌中的表达情况，分析乳腺浸润性导管癌的化疗耐药性与其表达的关系，探讨tmTNF-α在介导乳腺浸润性导管癌耐药中的作用；观察shRNA下调人原代乳腺癌细胞tmTNF-α mRNA表达...
- 胡艺冰
- 关键词：乳腺浸润性导管癌阿霉素多西紫杉醇化疗耐药
- 文献传递
- Twist沉默介导的间充质-上皮转化对乳腺癌干细胞特性的影响被引量：4
- 2016年
- 目的 观察Twist沉默介导的间充质-上皮转化（MET）对乳腺癌干细胞特性的影响.方法 小干扰RNA（siRNA）转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后,采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot法检测细胞中Twist及MET相关分子[Slug、Snail以及波形蛋白（Vimentin）]的mRNA和蛋白的表达;显微镜观察Twist沉默后细胞的形态变化;流式细胞仪检测CD44＋ CD24细胞比例;体外球体形成实验检测细胞自我更新能力;体内有限稀释实验检测细胞启动肿瘤能力.结果 si-Twist组与对照组比较,Twist基因的mRNA（0.24±0.04,P＜0.01）和蛋白表达量明显降低;细胞表现为上皮样形态,排列规则、细胞间连接紧密、成团生长;间质相关分子Slug、Snail、Vimentin mRNA（0.25±0.05,P＜0.01;0.34 ±0.03,P＜0.01;0.44±0.04,P＜0.01）和蛋白表达量明显降低;上皮标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA（58.71±1.27,P＜0.01）和蛋白表达量明显升高;肿瘤干细胞的百分比明显降低[（63.30±0.80）％比（86.50±0.70）％,P＜0.01];球体形成能力明显降低[（46.67±2.52）个比（109.67±2.52）个,P＜0.01];肿瘤起始细胞数目明显减少（1/122 851比1/20 064,P＜0.01）.结论 MDA-MB-231细胞中Twist沉默后,细胞发生MET,体外自我更新和体内成瘤能力下降.
- 殷茜胡艺冰罗智勇覃吉超
- 关键词：乳腺癌TWIST小干扰RNA肿瘤干细胞
- BMP4增强结直肠癌耐药细胞化疗敏感性的作用及机制被引量：4
- 2015年
- 目的研究骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)对结直肠癌耐药细胞化疗敏感性的影响及机制。方法采用5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理结直肠癌细胞株LoVo,建立耐药细胞株LoVo/5-Fu;通过CCK-8法检测LoVo/5-Fu细胞和亲本细胞对5-Fu、奥沙利铂或伊立替康的敏感性,并检测不同浓度BMP4对LoVo/5-Fu细胞生长的抑制效应;用5-Fu联合BMP4处理LoVo/5-Fu细胞3d,采用Annexin-Ⅴ/PI法检测5-Fu联合BMP4处理后LoVo/5-Fu细胞的凋亡情况;通过裸鼠体内成瘤实验观察BMP4在体内对LoVo/5-Fu细胞化疗敏感性的影响;采用Western blot检测BMP4处理后LoVo/5-Fu细胞中AKT信号通路活性和Bcl-2的蛋白水平。结果 5-Fu诱导形成的耐药细胞株LoVo/5-Fu可以在含5μg/mL 5-Fu的培养液中稳定生长,并对奥沙利铂和伊立替康有交叉耐药;BMP4可以抑制LoVo/5-Fu细胞的生长,抑制效应呈时间和浓度依赖性;细胞凋亡实验显示BMP4可以促进培养在含5μg/mL 5-Fu培养液中的LoVo/5-Fu细胞发生凋亡;裸鼠体内成瘤实验显示BMP4可以有效增强LoVo/5-Fu细胞在体内的对5-Fu的敏感性,抑制其在裸鼠体内的生长;Western blot检测发现BMP4可以抑制LoVo/5-Fu细胞中AKT的磷酸化,并抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结论 BMP4可以增强结直肠癌耐药细胞对化疗的敏感性;其机制有可能是通过抑制细胞中AKT通路的活性和Bcl-2表达,降低细胞抵抗凋亡的能力。
- 颜畅胡艺冰穆磊黄开禹覃吉超
- 关键词：骨形态发生蛋白4结直肠癌多药耐药化疗敏感性
- 跨膜TNF-α反向信号在乳腺癌耐药中的作用和分子机制
- 背景:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以两种生物学活性形式存在,即26k Da的跨膜型和17k Da的分泌型,并发挥不同的生物学功能。本课题组前期研究证实tm TNF-α可通过其反向信号导致乳腺肿瘤细胞抵抗s TNF-α诱...
- 李襄林国洪晏煜婧胡艺冰肖莉喻明霞吴亚群李卓娅
- 关键词：乳腺癌跨膜型TNF-Α反向信号阿霉素化疗耐药
- 文献传递
