胡春松
- 作品数：13 被引量：28H指数：3
- 供职机构：安徽医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生哲学宗教更多>>
- SELDI-TOF-MS技术在贲门癌诊断中的初步研究被引量：1
- 2012年
- 目的寻找贲门癌肿瘤标记物并建立诊断模型。筛选提示发生淋巴转移的差异蛋白,为临床早期诊断贲门癌及判断预后提供新方法。方法 CM10蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测101例贲门癌患者及118例正常对照者血清蛋白,Biomarker Wizard软件和Biomarker Patterns System(BPS)分析得差异蛋白并建立贲门癌诊断分类树,双盲法验证其准确性。进一步分析对比有、无淋巴转移的贲门癌患者血清蛋白指纹图谱,得到差异蛋白。结果对照分析贲门癌患者和正常对照组的血清蛋白指纹图谱得56个差异蛋白(P<0.05),经BPS软件筛选,以质荷比为5 480.49(P<10-8)的蛋白为主根结点建立贲门癌诊断模型,其灵敏度为95.05%,特异度为95.76%。得到可提示淋巴转移的差异蛋白3 820.87(P<0.05),其灵敏度为84.4%,特异度为82.1%。结论 SELDI-TOF-MS技术可建立有较高灵敏度和特异度的贲门癌诊断模型,筛选出能够提示发生淋巴转移的差异蛋白,有助于贲门癌的早期筛查、诊断和预后判断。
- 靳小可杨瑞红郭素堂张旭东胡春松
- 关键词：贲门癌
- PIB5PA增强三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性的研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨PIB5PA(phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate5-phosphatase)基因转染人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞后对紫杉醇敏感性的影响。方法体外培养人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞株,MTT法观察不同浓度(0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5μmol/L)紫杉醇处理后对两株细胞生存率的影响;流式细胞PI单染法检测两株细胞凋亡率的差异;蛋白免疫印迹法检测0.3μmol/L紫杉醇处理两株细胞不同时间点Bcl-2家族成员蛋白表达差异。将p CGNPIB5PA质粒转染对紫杉醇相对不敏感MDA-MB-231细胞,0.3μmol/L紫杉醇处理24h,免疫蛋白印迹法检测PIB5PA,磷酸化Akt以及Bcl-2家族成员蛋白的表达,MTT和PI单染法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇敏感性的改变。结果MDA-MB-231细胞对紫杉醇敏感性较差,过表达PIB5PA后细胞生存率明显降低,细胞中磷酸化Akt水平降低,Bim(Bcl-2 interacting mediator of cell death)表达明显增高,对紫杉醇敏感性明显增强。结论 PIB5PA可能通过上调Bim表达增强三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性。
- 张楠楠胡春松陈振东
- 关键词：紫杉醇乳腺癌凋亡BIM
- 重组腺病毒PAd-VP3的制备及其与姜黄素协同诱导SW480细胞凋亡的实验研究
- 2014年
- 目的利用细菌内同源重组法构建携带凋亡素VP3基因的重组腺病毒,观察其与姜黄素单独或联合对结肠癌SW480细胞凋亡及周期分布的影响。方法设计VP3 cDNA扩增引物,从PET15b-VP3质粒中扩增VP3 DNA序列,与pShuttle-IRES-hrGFP连接构建pShuttle-VP3-hrGFP穿梭质粒,PCR和EcoRⅤ酶切电泳鉴定;线性化穿梭质粒pShuttle-VP3-hrGFP,转化含pAdeasy-1的超感受态BJ5183大肠杆菌,构建pAd-VP3重组腺病毒质粒并经PCR、电泳及测序鉴定,线性化腺病毒质粒经脂质体转染AD293细胞进行pAd-VP3重组腺病毒的包装和扩增,CsCI密度梯度离心法进行病毒浓缩和纯化并将其单独或联合姜黄素作用人结肠癌SW480细胞,观察其对细胞凋亡及周期分布的影响。结果pShuttle-VP3-hrGFP穿梭质粒构建鉴定成功,pAd-VP3重组腺病毒质粒经酶切获得一大于23 kb的大片段和4.5kb的片段,PCR反应扩增出了402 bp的片段,重组质粒测序证实VP3-hrGFP编码区成功地克隆入了腺病毒pAd中,且其序列与GeneBank中VP3 CDNA序列完全一致。成功包装出携带VP3基因的腺病毒,滴度为1.738×1012opu·ml-1,获得的重组腺病毒及姜黄素单独或合用均可阻滞细胞周期于G0/G1期,诱导细胞凋亡(P<0.05,P<0.01),二药联用效果更为显著(P<0.01)。结论细菌内同源重组法可快速、高效地制备携带凋亡素VP3基因的重组腺病毒,并能与姜黄素协同通过阻滞细胞周期于G0/G1期诱导结肠癌SW480细胞凋亡。
- 胡茵邓守恒胡春松
- 关键词：姜黄素同源重组凋亡素人结肠癌细胞
- A亚型人呼吸道合胞病毒G基因的克隆、真核表达被引量：2
- 2006年
- 目的克隆A亚型人呼吸道合胞病毒(HRSV)G基因,构建G基因的真核表达载体,并进行表达和鉴定。方法自行设计引物,利用RTPCR技术,从感染HRSV的HEp2细胞中获得G基因片段,克隆到pGEMTeasy载体,经核酸序列分析,进一步亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),酶切鉴定后,脂质体法转染COS7细胞,RTPCR和Westernblotting鉴定基因转录和蛋白表达。结果真核表达载体pcDNA3.1(+)G的限制性内切酶分析结果与预期一致,基因序列分析显示没有发生无义突变。转染COS7细胞后,RTPCR检测到G基因有转录,Westernblotting分析观察到G蛋白特异性的表达条带。结论成功克隆A亚型HRSVG基因,并在真核细胞中获得表达。
- 李栋梁宋蔚汪红俊李群黄保军胡春松罗畅民何金生
- 关键词：呼吸道合胞体病毒
- 白介素-4和-10调节嗜碱性粒细胞CXCR4表达和功能
- 目的:研究IL-4和IL-10对人嗜碱性粒细胞上CXC趋化性细胞因子受体-4(CXCR4)表达和配体SDF-1a(Chemokine staomal cell-derived factor-1 alpha)功能的调节.方...
- 谭锦泉胡春松王兴兵王明军李群黄保军
- 文献传递
- 辛伐他汀对oxLDL诱导的巨噬细胞活性氧及IL-1β分泌的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨辛伐他汀对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导的巨噬细胞内活性氧(ROS)的水平及IL-1β分泌的影响。方法将oxLDL 0、50、100、200 mg·L-1作用于巨噬细胞J774A.1后,采用油红O染色观察脂滴在巨噬细胞内的聚集情况;用辛伐他汀0.5、1.0μmol·L-1作用于oxLDL处理的巨噬细胞,流式细胞仪检测辛伐他汀作用前后细胞内ROS的水平;Western blot检测pro-caspase-1、cleaved caspase-1和成熟IL-1β的表达情况。结果油红O染色结果表明,oxLDL可导致巨噬细胞内明显的脂质聚集,并于100 mg·L-1作用剂量达到摄取脂质的饱和状态;流式细胞仪结果表明,oxLDL可以诱导脂质聚集巨噬细胞内ROS的水平增加,辛伐他汀作用后,ROS水平由(167±0.47)%下降到(139±0.97)%,并呈明显的剂量依赖;Western blot结果表明,辛伐他汀可抑制oxLDL诱导的caspase-1活化及IL-1β的分泌,辛伐他汀处理组与oxLDL实验组相比,cleaved caspase-1及成熟IL-1β的表达呈下降趋势,灰度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论在oxLDL诱导的巨噬细胞脂质聚集模型中,辛伐他汀可以抑制巨噬细胞内ROS的产生及caspase-1的活化,并减少IL-1β的分泌。
- 靳梦醒闫海程艳伟桂丽胡春松张林杰黄保军
- 关键词：辛伐他汀巨噬细胞活性氧IL-1ΒOX-LDL
- 高迁移率族蛋白1对奥沙利铂诱导的SGC-7901胃癌细胞凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的构建pDsRED2-HMGB1重组质粒,探讨转染高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因对奥沙利铂诱导的SGC-7901细胞凋亡的影响。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HMGB1 mRNA全编码序列,将PCR产物插入到pD-sRED2-N1载体的Xho I和EcoR I位点,构建pDsRED2-HMGB1重组质粒;通过脂质体法转染SGC-7901胃癌细胞,荧光显微镜检测HMGB1红色荧光融合蛋白表达。Westernblot鉴定HMGB1蛋白表达。应用流式细胞仪(Annexin-V/PI标记)分析HMGB1过表达对奥沙利铂诱导胃癌细胞凋亡的影响。结果成功构建真核表达质粒pDsRED2-HMGB1,转染SGC-7901细胞后,荧光显微镜下可见细胞内有HMGB1红色荧光融合蛋白的表达;流式细胞术检测发现转染pD-sRED2-HMGB1后SGC-7901细胞凋亡水平较转染pDsRED2-N1组下降22.4%。结论 HMGB1过表达可抑制奥沙利铂诱导的SGC-7901胃癌细胞凋亡。
- 沈磊胡梅琮吴亚欧张梅李群桂丽胡春松张林杰黄保军
- 关键词：细胞凋亡质粒重组融合蛋白质类
- IL-4和IL-10调节嗜碱性粒细胞CXCR4表达及功能被引量：1
- 2001年
- 目的 研究IL 4和IL 10对人嗜碱性粒细胞上CXC趋化性细胞因子受体 4(CXCR4)表达和配体SDF 1α(Chemokinestromalcell derivedfactor 1alpha)功能的调节。方法 嗜碱性粒细胞的纯化技术 ,流式细胞术 ,实时定量逆转录PCR (RT PCR) ,胞内游离Ca2 +的变化 ,趋化性技术和组胺释放等方法进行测定与分析。结果 CXCR4大量表达在人外周血静息嗜碱性粒细胞上。IL 4可显著上调CXCR4蛋白和mRNA的表达 ,而IL 10则明显下调其表达。SDF 1α可通过CXCR4诱导嗜碱性粒细胞中游离Ca2 +增加 ,激活嗜碱性粒细胞使之产生趋化性游走并释放组胺。此活性可被抗CXCR4单抗所阻断。结论 IL 4和IL 10是CXCR4表达和功能重要的调节细胞因子 ,CXCR4 SDF 1α复合物相互作用对嗜碱性粒细胞的聚集和活化起着重要作用。
- 黄保军谭锦泉胡春松王兴兵王明军李群罗畅民
- 关键词：趋化因子趋化因子受体细胞活化趋化作用嗜碱性粒细胞
- 脂多糖诱导巨噬细胞自噬相关LC3B-GFP荧光聚集体的形成被引量：1
- 2012年
- 目的构建pEGFP-C1/LC3B重组质粒并转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,观察脂多糖(LPS)诱导其自噬相关LC3B-GFP荧光聚集体形成的过程。方法根据编码小鼠微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)的开放读码框(ORF)设计引物,RT-PCR扩增小鼠LC3B的ORF,构建pEGFP-C1/LC3B重组质粒;脂质体法转染并筛选稳定表达RAW264.7细胞株,荧光显微镜观察及Western blot鉴定LC3B-GFP融合蛋白表达;LPS刺激稳定转染的RAW264.7细胞株,激光共聚焦显微镜检测不同时间绿色荧光聚集体的分布。结果成功构建真核表达质粒pEGFP-C1/LC3B,并获得稳定表达LC3B-GFP融合蛋白的RAW264.7细胞株,荧光显微镜下可见细胞内有绿色荧光蛋白分布,Western blot鉴定表达LC3B-GFP融合蛋白,激光共聚焦结果显示LPS刺激前融合蛋白呈弥散性分布在胞浆中,而LPS刺激后细胞内有明显绿色荧光聚集体形成并呈时间依赖性逐渐增加。结论成功构建pEGFP-C1/LC3B,转染RAW264.7细胞可正确表达LC3B-GFP融合蛋白,LPS刺激后显示绿色荧光聚集体形成。
- 张梅黄保军胡梅琮程艳伟宋蔚黄大可李群胡春松
- 关键词：绿色荧光蛋白
- γIP-10和Mig通过趋化因子CXC受体3激活嗜酸性粒细胞的NFAT被引量：1
- 2001年
- 目的 研究γIP 1 0和Mig通过趋化因子CXC受体 3 (CXCR3 )激活嗜酸性粒细胞的活化细胞核因子 (nuclearfactorofactivatedTlymphocytes,NFAT)作用。方法 嗜酸性粒细胞的纯化技术、流式细胞术、实时定量逆转录PCR (RT PCR)、核提取物和电泳移动性转变测定等方法进行测定与分析。结果 CXCR3大量在嗜酸性粒细胞上表达。通过流式细胞仪及实时定量RT PCR技术检测证明 ,IL 2和IL 1 0上调或下调嗜酸性粒细胞上CXCR3的蛋白和mRNA表达水平。其配体γIP 1 0和Mig可以引起嗜酸性粒细胞中的NFAT复合体的核易位而激活NFAT1和NFAT4。结论 CXCR3 γIP 1 0和 Mig受体 配体以及IL 2和IL 1 0对CXCR3表达的调节作用可能在过敏炎症过程 (包括启动、发展和结局的病理生理过程 )的细胞因子 /趋化因子环境中发挥特别重要的作用。
- 李群谭锦泉黄保军胡春松陈静PerS.SkovLarsK.Poulsen罗畅民
- 关键词：趋化因子趋化因子受体细胞活化嗜酸性粒细胞
