耿磊
- 作品数：11 被引量：10H指数：2
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- SiRNA沉默HBx对HepG2.2.15细胞人端粒酶逆转录酶基因表达的影响
- 2014年
- 目的探讨应用RNA干扰技术沉默HBx对HepG2.2.15细胞中hTERT基因表达的影响。方法 (1)将pSIHBV/X质粒转染HepG2.2.15细胞,RT-PCR法评估沉默效率。(2)MTT法检测转染24h、48h、72h后细胞增殖情况。(3)Real-time PCR和Western blot检测hTERT表达情况。结果测序结果显示pSIHBV/X质粒构建正确;RT-PCR检测HBV x基因的沉默效率为53.6%;MTT检测结果显示转染24h、48h、72h后HepG2.2.15细胞的增殖受抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);Real-time PCR和Western blot检测结果均显示,转染pSIHBV/X质粒后HepG2.2.15细胞中hTERT基因的mRNA水平和蛋白水平表达分别有不同程度的下调,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 siRNA沉默HBx基因可抑制HepG2.2.15细胞中癌症标志基因hTERT的表达。
- 范芳孙越鹏耿磊李长福
- 关键词：RNA干扰HBX基因HEPG2.2.15细胞人端粒酶逆转录酶
- 小儿骶尾部畸胎瘤术后大便失禁的预防及应用解剖探讨
- 目的：探讨小儿骶尾部畸胎瘤术后大便失禁的原因，进一步完善其手术方式，减少术后并发症的发生，提高骶尾部畸胎瘤治疗效果。
方法：回顾性分析我院1999年5月～2008年12月41例骶尾部畸胎瘤手术患儿的临床资料。手...
- 耿磊
- 关键词：小儿骶尾部畸胎瘤手术治疗大便失禁盆底解剖
- 文献传递
- shRNA沉默HBx下调HepG2.2.15细胞基质金属蛋白酶2的表达
- 2014年
- 目的探讨HBx小发夹RNA(shRNA)对HepG2.2.15细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响。方法采用psiHBV/X质粒转染HepG2.2.15细胞,反转录PCR评估沉默效率;MTT法检测转染后HepG2.2.15细胞增殖情况;实时定量PCR(qRT-PCR)检测MMP-2 mRNA表达;Western blot法检测MMP-2蛋白表达的变化。结果反转录PCR检测HBx基因的沉默效率为53.6%;MTT检测结果显示转染24、48、72 h后HepG2.2.15细胞的增殖受抑制,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);psiHBV/X质粒转染HepG2.2.15细胞后,qRT-PCR和Western blot检测结果显示,HepG2.2.15细胞中MMP-2基因的mRNA水平和蛋白水平表达分别有不同程度的下调,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RNA干扰技术抑制HepG2.2.15细胞中HBx基因的表达,可抑制细胞增殖,下调HepG2.2.15细胞中MMP-2的表达。
- 李长福孙越鹏耿磊范芳
- 关键词：HBX基因HEPG2
- shMRE11质粒转染对BEL7402/5-FU肝癌细胞耐药性的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究减数分裂重组蛋白11(MRE11)基因沉默对5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的肝癌细胞株Bel7402/5-FU的化疗敏感性及耐药相关蛋白1(MRP1)表达的影响,探讨MRE11与肝癌耐药性的关系。方法采用阳离子脂质体法将shMRE11干扰质粒转染BEL7402/5-FU细胞,实时定量PCR(qRT-PCR)及Western blot法检测沉默效率;MTT法检测转染后BEL7402/5-FU细胞对化疗药物顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)、5-FU的敏感性,qRT-PCR及Western blot法分别检测转染后BEL7402/5-FU细胞中耐药相关蛋白MRP1 mRNA水平及蛋白水平的变化。结果 qRT-PCR及Western blot法检测显示MRE11mRNA及蛋白水平的沉默效率分别为78.0%、56.1%。MTT结果显示,shMRE11转染BEL7402/5-FU细胞后,shMRE11实验组对DDP、MMC、ADM、5-FU的IC50均低于对照组(P<0.05)。qRT-PCR及Western blot法检测结果显示shMRE11实验组MRP1mRNA及蛋白水平的表达与对照组相比均有所降低(P<0.05)。结论 shMRE11能够提高肝癌耐药细胞BEL7402/5-FU对化疗药物的敏感性,降低耐药相关蛋白MRP1的表达。
- 范芳耿磊李长福
- 关键词：多药耐药
- 一种丙酸氯倍他索的制备方法
- 本发明涉及一种甾体化合物的制备方法，尤其是涉及丙酸氯倍他索的制备。本发明以式1化合物为起始物，依次经过氯代反应、酯化反应、开环反应，得丙酸氯倍他索。该发明新工艺更具产业化价值，能够有效控制副反应，提高反应收率和质量；工艺...
- 耿磊李亚玲韩昆颖齐海迪
- 文献传递
- MRE11沉默对肝癌耐药细胞BEL7402/5-FU增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:观察shMRE11对肝癌耐药细胞BEL7402/5-FU细胞增殖和凋亡的影响,初步探索MRE11与肝癌发生发展的关系。方法:采用阳离子脂质体法将shMRE11干扰质粒转染BEL7402/5-FU细胞,Real-time PCR及Western blot检测沉默效率;MTT法检测转染前后BEL7402/5-FU细胞增殖情况;AnnexinV-FITC/PI双染法检测MRE11基因沉默对BEL7402/5-FU细胞凋亡的影响。结果:Real-time PCR及Western blot检测结果显示MRE11 mRNA及蛋白水平的沉默效率分别为78.0%、56.1%。MTT结果显示,shMRE11转染BEL7402/5-FU细胞后,shMRE11实验组与对照组相比细胞增殖速度减慢(P<0.05)。AnnexinV-FITC/PI双染法检测结果显示shMRE11实验组的细胞凋亡指数增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:shMRE11干扰质粒能够抑制BEL7402/5-FU细胞增殖,促进细胞凋亡。
- 范芳耿磊李长福束波李大玉
- 关键词：5-FU
- 一种糠酸莫米松的制备方法
- 本发明提供一种糠酸莫米松的制备方法，包括1)氯代反应：在SO<Sub>2</Sub>存在下，化合物1与氯代试剂反应生成化合物2，所述氯代试剂选自乙酰氯、丙酰氯、苯甲酰氯、氯化锂、四氯化碳、氯代丁二酰亚胺、二氯海因中的一种...
- 韩昆颖李亚玲耿磊齐海迪
- 文献传递
- shMRE11对肝癌耐药细胞BEL7402//5-FU耐药性及生物学行为的影响
- 目的：本研究旨在利用RNA干扰技术研究MRE11沉默对肝癌耐药细胞Be17402／5-FUDNA损伤修复功能、化疗药物敏感性、耐药相关蛋白表达以及细胞生物学行为的影响,初步探索MRE11与肝癌耐药性的关系。
方法...
- 耿磊
- 关键词：肝癌多药耐药
- 文献传递
- SiRNA沉默HBx表达对HepG2.2.15细胞增殖和凋亡的影响被引量：4
- 2013年
- 目的观察沉默HB x基因表达对肝癌细胞HepG2.2.15增殖和凋亡的影响。方法用脂质体转染法将pSIHBV/X转染肝癌细胞HepG2.2.15,RT-PCR法检测HBx mRNA表达;ELISA法检测细胞上清液中HBsAb和HBeAg的表达情况;MTT法检测对细胞增殖的影响;AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况。结果 pSIHBV/X质粒转染HepG2.2.15细胞后HBx mRNA表达较对照组明显降低(P<0.01);G2.2.15细胞上清液中HBsAg和HBeAg的水平下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);MTT法检测结果显示转染pSIHBV/X质粒后HepG2.2.15细胞的增殖受到抑制,AnnexinV-FITC/PI双染法检测结果显示HBx siRNA可促进细胞凋亡,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论靶向HBx基因的干扰质粒能降低HepG2.2.15细胞中HBsAg和HBeAg的水平、抑制HepG2.2.15细胞增殖,促进HepG2.2.15细胞凋亡。
- 孙越鹏耿磊李长福范芳
- 关键词：HBX基因HEPG2增殖凋亡
- shRNA沉默MRE11表达对肝癌耐药细胞BEL7402/5-FUDNA损伤修复的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:观察shMRE11沉默MRE11基因对肝癌耐药细胞Bel7402/5-FU DNA损伤修复功能的影响.方法:采用阳离子脂质体法将shMRE11干扰质粒转染BEL7402/5-FU细胞,Real-time PCR及Western blot检测沉默效率;Western blot检测细胞-H2AX蛋白表达;EdU法检测细胞DNA合成;MTT法检测细胞增殖情况.结果:Real-time PCR及Western blot检测结果显示MRE11 mRNA及蛋白水平的沉默效率分别为78.0%、56.1%;Western blot检测-H2AX表达结果显示shMRE11实验组(1.04±0.056)较对照组(0.847±0.025)增加(P<0.05,t=10.78);EdU检测结果显示shMRE11实验组DNA合成率(38.819%±2.607%)较对照组(49.814%±1.227%)降低(P<0.05,t=-8.87);MTT细胞增殖检测结果显示转染72 h后shMRE11实验组(0.58±0.08)与对照组(0.87±0.09)相比细胞增殖速度减慢(P<0.05,t=-50.2).结论:shMRE11干扰质粒能够有效抑制B E L7402/5-F U细胞中M R E11表达,使细胞DNA损伤修复能力减弱、抑制细胞增殖.
- 范芳耿磊李大玉李长福
- 关键词：BEL74025-FUDNA损伤修复
