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逆转录病毒载体介导的白细胞介素-1受体拮抗剂和转化生长因子-β1联合基因体外转染兔膝关节软骨细胞表达的研究被引量：3: 2013年; 目的运用重组逆转录病毒载体介导白细胞介素-1受体拈抗剂（IL-1Ra）和转化生长因子-β1（TGF-β1），分别和共同体外转染兔膝关节软骨细胞，观察其在关节软骨细胞中的表达及其对软骨细胞生物学性状的影响。方法构建含有目的基因的表达载体PLNCX2-IL-1Ra-GFP和PLNCX2-TGF-β1-RFP，分别和联合体外转染到兔膝关节软骨细胞，采用NO检测试剂盒检测基因转染对软骨细胞的影响，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清液中hlL-IRa和hTGF-β1的表达。结果成功构建真核表达载体PLNCX2-IL-1Ra-GFP和PLNCX2-TGF-β1-RFP并稳定转染软骨细胞；培养液NO含量检测基因转染组[hlL-1Ra：（92．15±5．36）μmol／L．；hTGF-β1：（89．71±5．43）μmol／L；hlL-1Ra＋hTGF-βl：（94．93±4．88）μmol／L]均比空载体组（60．19±4．68）μmol／L和空白组（57．23±4．29）μmol／L高，差异有统计学意义（P〈0．05），基因转染组间差异无统计学意义（P〉0．05），非基因转染组间差异无统计学意义（P〉0．05）；ELISA检测发现基因转染组均有一定量hlL-1Ra和hTGF-β1表达，空白组与空载体组均无基因表达，基因转染组与非基因转染组间比较差异有统计学意义（P〈0．05），单基因转染组和联合基因转染组问差异无统计学意义（P〉0．05）。结论逆转录病毒载体PLNCX2介导的IL-1Ra和TGF-β1能有效的转染到兔膝关节软骨细胞并获得一定程度表达，转染后的软骨细胞增生活跃。; 向川刘君卫小春耿俊海; 关键词：逆转录病毒转化生长因子-Β1 软骨细胞

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耿俊海

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