罗金花
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
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- cpn0585蛋白的免疫活性及血清学诊断初步评价
- 2011年
- 目的克隆肺炎嗜衣原体包涵体膜蛋白Cpn0585基因,初步探讨其在血清学诊断中的应用价值。方法构建pGEX-6p-2/Cpn0585重组质粒,诱导表达并纯化重组蛋白,免疫BALB/c小鼠,间接酶联免疫附试验(ELISA)检测小鼠血清抗体滴度,以重组蛋白作为ELISA包被抗原检测血清中Cpn IgG抗体和检测36份Cpn-/Ct+IgG阳性参考血清。结果高效表达和纯化出一相对分子质量约为95 kDa的重组蛋白,蛋白质印迹法证明其能与人抗Cpn IgG抗体发生反应;在被免疫的BALB/c小鼠体内,特异性IgG抗体的滴度为1:12 800;检测104例临床血清标本中的IgG抗体,与以色列Savyon Diagnostics公司SeroCP^(TM)IgG ELISA诊断试剂盒的检测结果进行比较,符合率为98.3%。结论表达的Cpn0585重组蛋白具有良好的免疫活性,在Cpn的血清学诊断中具有较高的应用价值。
- 李波刘良专刘磊罗金花贺志国
- 关键词：肺炎嗜衣原体免疫活性血清学诊断
- 铜绿假单胞菌诱导气道上皮细胞产生MUC5AC的分子机制
- 2013年
- 目的探讨铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)诱导气道上皮细胞表达产生粘蛋白MUC5AC的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养NCI-H292细胞,用Pa感染后,采用ELISA检测MUC5AC的产生情况;并用商品化的MMP-9活性检测试剂盒检测其产生以及酶活性情况。同时,采用EGFR,PI3K,NADPH,ROS和MMP特异性抑制剂AG1478,LY294002,DPI,NAC和GM6001预处理NCI-H292细胞,观察MUC5AC以及MMP-9的产生情况。结果 Pa能以时间依赖性方式诱导NCI-H292细胞产生MMP-9,并增加其活性。EGFR活化后,经PI3K途径激活Rac1并诱导MMP-9的表达,最终诱导MUC5AC产生。结论 Pa经EGFR/PI3K/Rac1/NADPH/ROS/MMP-9通路诱导NCI-H292细胞产生MUC5AC。
- 李波罗金花阳帆
- 关键词：铜绿假单胞菌基质金属蛋白酶-9MUC5AC
- 姜黄素对铜绿假单胞菌诱导人肺上皮细胞产生细胞因子的影响及其分子机制研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨姜黄素对铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,Pa)感染的肺上皮细胞的体外抗炎效应。方法体外培养肺上皮细胞系NCI-H292,加入姜黄素和培养的Pa感染不同时间。Western blot检测和实时定量PCR分别检测NCI-H292细胞中红素氧合酶1(Heme oxygenase-1,HO-1)mRNA和蛋白表达情况;ELISA检测IL-1β和IL-8的产生。同时采用RNA干扰HO-1表达后,观察对Pa诱导IL-1β和IL-8产生的影响。结果 Pa感染NCI-H292细胞后,IL-1β和IL-8含量分别为(87.52±7.96)pg/mL和(205.63±34.25)pg/mL,50μg/mL姜黄素孵育8 h后,其含量分别降至(15.78±10.74)pg/mL和(49.82±14.28)pg/mL,处理前后差异有统计学意义(P<0.05)。同时,姜黄素能在转录翻译水平分别调控HO-1 mRNA和蛋白表达,其中50μg/mL姜黄素能将HO-1 mRNA增高19倍,蛋白表达水平提高4.8倍(P<0.05)。HO-1 siRNA沉默HO-1表达后,与Pa组相比,IL-1β和IL-8分泌进一步增高。结论姜黄素可能通过上调HO-1的表达而发挥对肺上皮细胞的抗炎作用。
- 李波罗金花贺志国
- 关键词：血红素氧合酶-1姜黄素铜绿假单胞菌肺上皮细胞白介素-8
- 泰利霉素经NF-κB途径抑制铜绿假单胞菌诱导MUC5AC表达
- 2013年
- 目的研究大环内酯类抗生素泰利霉素（TEL）对铜绿假单胞菌（PA）诱导气道上皮细胞表达产黏蛋白MUC5AC的影响，并探讨其可能的分子机制。方法体外培养NCI—H292细胞，用10mg／LTEL孵育6h预处理细胞，随后加人不同浓度PA孵育3-9h，分别采用ELISA和实时定量PCR检测MUC5AC蛋白和mRNA的表达情况，ELISA检测NCI—H292细胞内核因子KB（NF-κB）的DNA结合活性。结果NCI—H292细胞经PA感染后6h后，MUC5AC分泌水平随PA浓度的增高而增加。此外，PA感染3h后即可检测出MUC5ACmRNA的表达，6h后达到高峰。NCI—H292细胞经TEL处理后，能显著抑制PA诱导的MUC5ACmRNA表达。PA感染NCI—H292细胞后，能促进NF-κBp50／p65亚基核转位，呈一定的时间依赖性，TEL处理后，NF-κB转录活性显著降低。结论TEL能抑制PA诱导的黏蛋白表达，其机制可能与抑制NF-κBDNA结合活性有关。
- 李波罗金花阳帆
- 关键词：铜绿假单胞菌泰利霉素核因子KBMUC5AC
