石庆秋
- 作品数：7 被引量：5H指数：2
- 供职机构：广西医科大学蛇毒研究所更多>>
- 发文基金：广西科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胎盘免疫调节因子对大鼠子宫内膜异位症的疗效观察被引量：3
- 2007年
- 目的研究胎盘免疫调节因子(placental immunoregulatory factor,PF)对大鼠子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)的治疗效果。方法建立雌性大鼠EMS模型,随机分为对照组、模型组、PF低、中、高治疗组。PF治疗8周后开腹测量异位内膜生长体积;用淋巴细胞非特异性酯酶(achroacyte acor nonspecific esterase,ANAE)组织化学染色方法检测用药后外周血ANAE阳性细胞;用ELLSA法测量血清中细胞因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)含量。结果各治疗组治疗后异位内膜体积较治疗前小(P<0.05);PF能明显提高各治疗组ANAE活性(P<0.05)和血清IL-2含量(P<0.05)。结论PF可以提高机体的细胞免疫功能,对大鼠EMS模型的生长及粘连起到抑制或治疗作用。
- 刘海涛张学荣石庆秋韦敏蒙怡
- 关键词：子宫内膜异位症胎盘免疫调节因子
- 神经生长因子的提取及其对MGC-803细胞的凋亡作用被引量：1
- 2008年
- 目的:从广西眼镜蛇蛇毒中提取神经生长因子(nerve growth factor,NGF)并探讨其对人胃癌MGC-803细胞的生长抑制作用。方法:①粗毒采用Sephadex G75凝胶过滤及CM Sepharose CL-6B阳离子交换柱进行分离纯化,洗脱峰用大鼠嗜铬神经瘤细胞(PC12细胞)测定活性,通过SDS-PAGE测定纯度和相对分子质量;②采用MTT法,以NGF浓度分别为7.5、15、30、60、120mg/L处理人胃癌MGC-803细胞24h,观察不同浓度NGF对MGC-803细胞的毒性和生长抑制率;③采用AO/EB双重染色法,NGF浓度分别为25、50、75mg/L,观察不同浓度NGF作用后细胞染色及形态的变化,计算细胞凋亡率;④An-nexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡率变化。结果:①所得NGF为单一组分,SDS-PAGE结果为一条带,相对分子质量约为23000,对PC12细胞有良好的促进分化作用;②NGF对MGC-803细胞的生长有抑制作用且呈剂量依赖关系,作用24h的IC50值为49.9mg/L;荧光显微镜下可观察到凋亡细胞主要特点为:细胞体积缩小,染色质固缩,橘红色荧光增强,各浓度组与对照组的细胞凋亡率比较有明显差异(P<0.01);流式细胞仪检测到早期细胞凋亡率随NGF浓度的增高而增加,各浓度组与对照组的细胞凋亡率比较有明显差异(P<0.01)。结论:采用Sephadex G75凝胶过滤及CM Sepharose CL-6B阳离子交换柱提取得到的眼镜蛇毒NGF能诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡且呈剂量依赖关系。
- 韦敏宋慧班建东蒙怡石庆秋徐阳曦陈缨张学荣
- 关键词：神经生长因子MGC-803细胞细胞凋亡
- 广西眼镜蛇毒神经生长因子基因的构建及真核表达
- 目的构建广西眼镜蛇毒神经生长因子(nerve growth factor,NGF)基因的真核表达载体pcDNA-NGF,并在哺乳动物细胞中进行表达和对表达产物进行鉴定及生物活性分析,为大量制备NGF和采用NGF基因治疗神...
- 石庆秋宋慧韦敏班建东舒雨雁张学荣
- 文献传递
- 蛇毒神经生长因子基因表达系统的探讨
- 2008年
- 石庆秋张学荣
- 关键词：蛇毒神经生长因子基因治疗
- 广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子的分离纯化及NGF基因的真核表达
- 目的：从广西眼镜蛇蛇毒中分离纯化神经生长因子(nerve growth factor，NGF)，并测定其纯度和活性;克隆编码成熟NGF的cDNA序列，构建其真核表达载体pcDNA3,1(-)-NGF，并在哺乳动物细胞NI...
- 石庆秋
- 关键词：蛇毒基因克隆神经生长因子
- 文献传递
- 胎盘免疫调节因子对子宫内膜异位症大鼠免疫功能的影响
- 2007年
- 目的:观察胎盘免疫调节因子对大鼠子宫内膜异位症动物模型的治疗效果和对大鼠免疫功能的影响。方法:实验于2005-10/2006-12在广西医科大学医学科学实验中心及广西肿瘤防治研究所实验病理室完成。①实验材料:健康6个月龄雌性SD大鼠60只,体质量为200～250g;健康产妇胎盘在经广西医科大学第一附属医院伦理委员会同意和产妇知情同意后获得。②实验干预及分组:利用自体子宫组织移植的方法,建立雌性子宫内膜异位症大鼠模型40只,随机分为胎盘免疫调节因子小剂量组、中剂量组、高剂量组和模型对照组,分别肌注胎盘免疫调节因子剂量为0.375,0.75,1.5mg/kg和等体积生理盐水,1次/d,连续8周。③用两脚规测量移植物的体积(V=长×宽×高/mm3),采用ATP生物荧光法测定大鼠脾细胞增殖能力;采用中性红法测定腹腔巨噬细胞的吞噬功能。采用ELISA法检测治疗后各组大鼠血清中白细胞介素2水平。结果:建模成功40只,均进入结果分析。①各组移植物外观及体积:用药后8周,各胎盘免疫调节因子组移植物体积不同程度缩小(P<0.05),呈扁平状,粘连受到明显的抑制。②各组大鼠脾细胞增殖试验、腹腔巨噬细胞吞噬功能及血清白细胞介素2水平的变化:胎盘免疫调节因子中,高剂量用药组脾细胞增殖能力较模型对照组升高(P<0.05);各剂量胎盘免疫调节因子组腹腔巨噬细胞吞噬功能、白细胞介素2水平均较模型对照组升高(P<0.05)。结论:胎盘免疫调节因子治疗大鼠子宫内膜异位症显示了较好的疗效,可显著缩小子宫异位内膜的体积,提高大鼠的免疫功能。
- 张学荣刘海涛韦敏石庆秋班建东苏建家舒雨雁
- 关键词：免疫因子子宫内膜异位症
- 胎盘免疫调节因子对细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构及免疫表型的调节作用被引量：2
- 2007年
- 目的:通过电子显微镜、流式细胞仪观察经胎盘免疫调节因子处理的细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构及免疫表型变化,了解胎盘免疫调节因子的免疫调节活性。方法:实验于2006-02/2007-01在广西医科大学医学科学实验中心重点实验室进行。实验材料:重组人干扰素γ和白细胞介素1α为Peprotech公司产品。重组人白细胞介素2和抗人CD3单克隆抗体为北京远策药业有限公司产品。实验方法:①胎盘免疫调节因子的制备:将新鲜经检人胎盘去筋膜,生理盐水冲净、剪碎匀浆,置-20℃48h后,反复冻融3次,用生理盐水透析,取透析外液,过虑除菌,分装,抽样做有关鉴定实验。②细胞因子诱导的杀伤细胞的制备:抽取健康自愿者静脉血20mL,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,加RPMI1640培养液调整细胞的密度至1×109L-1,放于50mL培养瓶中培养。于当天加入1×106U/L干扰素γ,置于37℃、50mL/LCO2孵育箱中培养24h。次日将悬浮的细胞转移到6孔板培养中,分别加入终浓度为100mg/L的PHA、3×105U/L白细胞介素2、133μg/L抗CD3mAb及1×105U/L白细胞介素1α,每3d半量换液1次,同时补加白细胞介素2至3×105U/L。将培养14d细胞因子诱导的杀伤细胞以5×109L-1接种于24孔板,实验组中加入一定剂量的胎盘免疫调节因子诱导,对照组加入等量生理盐水,继续培养72h。③实验评估:制备电镜标本,观察细胞超微结构。采用流式细胞术测定细胞因子诱导的杀伤细胞CD4+、CD8+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD25+、HLA-DR、CD3+CD56+、CD80+百分含量。结果:①细胞因子诱导的杀伤细胞表型分析:实验组CD4+、CD8+和CD3+CD4+明显低于对照组[实验组:(8.40±8.15)%,(33.10±4.61)%,(7.98±12.65%);对照组:(39.43±9.16)%,(58.90±11.35)%,(31.30±5.94)%,P<0.05];实验组CD3+CD8+、CD25+表达明显高于对照组[实验组:(30.50±2.56)%,(24.8±6.31)%;对照组:(15.90±7.35)%,(0.56±0.21)%,P<0.05]。②透视电镜下观察
- 张学荣蒙怡舒雨雁韦敏石庆秋徐阳曦
- 关键词：胎盘免疫调节因子CIK细胞超微结构细胞表型
