王飞飞
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：华侨大学化工学院工业生物技术福建省高等学校重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 共表达木聚糖酶和木糖还原酶生产木糖醇的研究被引量：2
- 2007年
- 运用PCR技术扩增出短小芽孢杆菌木聚糖酶A基因,构建分泌型重组质粒pET22-xynA,并构建木糖还原酶重组质粒pET28-xyl1。利用双抗生素抗性将pET22-xynA和pET28-xyl1在E.coliBL21(DE3)plysS中共表达,鉴定了木聚糖酶和木糖还原酶的活性。此外,还对其利用木聚糖生产木糖醇做了初步研究,为将来直接应用玉米芯等农副产品生产木糖醇奠定了基础。
- 王晓霞郑晨娜王飞飞方柏山
- 关键词：木聚糖酶木糖还原酶共表达
- 克雷伯杆菌甘油脱氢酶基因的克隆表达与纯化被引量：6
- 2008年
- 以克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)基因组DNA为模板,运用PCR扩增得到编码甘油脱氢酶(GDH)的基因(gldA),并克隆到pMD-18T载体上,构建克隆载体pMD-gldA。经测序正确后,将gldA亚克隆至表达载体pET-32a(+)上构建表达质粒pET-32gldA。在乳糖诱导下,携带pET-32gldA的E.coli BL21(DE3)高效表达分子量约为54kD的可溶性蛋白。表达产物带有His6-tag标记,选用Ni柱对表达产物进行纯化,纯化后酶液的比活为188u/mg,纯化倍数和回收率分别为3倍和67.5%。
- 张婷婷方柏山王耿王飞飞
- 关键词：克雷伯杆菌蛋白纯化
- G／11家族木聚糖酶特征序列与其最适温度定量关系的研究被引量：2
- 2007年
- 本文研究了G/11家族木聚糖酶特征序列与其最适温度的定量关系,所得逐步回归模型达到极显著(p<0.0001),相关系数为0.965。该模型对文献[5]报道的23种木聚糖酶的预测值与其实测值吻合较好,平均绝对误差和平均绝对百分比误差分别为3.42%和1.84℃。对比文献[5]的两种模型,它优于基于单个氨基酸的模型(2.26℃和8.1%),但略逊于基于二肽的模型(1.22℃和2.27%)。同时,在这两个特征序列中,存在7个对木聚糖酶最适温度影响较大的位点。利用在大肠杆菌中表达的重组木聚糖酶的特征序列和最适温度验证该模型的可靠性,该模型的预测误差仅为0.2%(预测值和实测值分别为50℃和49.9℃)。此模型适用于G/11家族中的所有木聚糖酶且有很好的精度,所以它可为木聚糖酶定向改造其耐高温的活性提供更多的生物信息。
- 王飞飞张光亚方柏山张婷婷
- 关键词：木聚糖酶最适温度
