王荣芝
- 作品数：21 被引量：121H指数：8
- 供职机构：南京医科大学基础医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：江苏省重点实验室开放基金国家自然科学基金江苏省卫生厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 日本血吸虫再感染相关基因克隆的筛选与鉴定被引量：12
- 1998年
- 目的：获取编码可能指示再感染倾向的日本血吸虫特异免疫分子的ｃＤＮＡ克隆。方法：用日本血吸虫病流行区化疗后再感染人群高特异性ＩｇＧ４水平的混合血清筛选构建于表达载体λｇｔ１１的日本血吸虫成虫ｃＤＮＡ文库，以ＰＣＲ鉴定免疫筛选的阳性ｃＤＮＡ克隆插入片段选择插入片段大的克隆进行序列测定及基因数据库同源性检索。结果与结论：对ｃＤＮＡ文库中约８．６×１０４个噬菌斑进行了筛选，有１１个噬菌斑呈阳性反应，其中有可能编码日本血吸虫的线粒体蛋白的基因克隆及可能与人群日本血吸虫再感染相关的基因克隆等４个日本血吸虫基因克隆。
- 吴海玮王荣芝陈淑贞苏川张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫再感染CDNA克隆
- 重组副肌球蛋白联合ISA206佐剂诱导抗日本血吸虫保护力
- 2009年
- 目的探讨重组的全长日本血吸虫副肌球蛋白(rSj97)的免疫保护作用以及作为疫苗的适用佐剂组合。方法重组副肌球蛋白分别与弗氏佐剂(rSj97-FA)、ISA206(rSj97-ISA206)、CpGODN(rSj97-CpGODN-IFA)联合免疫C57BL/6小鼠,在0、2、4周共进行3次免疫注射,剂量为每只每次25μgrSj97。第3次免疫后2周,经腹部贴片感染日本血吸虫尾蚴(40±2)条。第12周剖杀冲虫,计算减虫率与减卵率。同时,在0、2、6、8、12周对各组小鼠采血,检测血清中特异性IgG1与IgG2a抗体。结果相对于未免疫组,rSj97-FA组的减虫率为27.6%、减卵率为-2.3%,rSj97-ISA206组的减虫率为45.3%(P<0.01)、减卵率为35.4%(P<0.05),rSj97-CpGODN-IFA组的减虫率为7.3%、减卵率为6.4%,对照组(仅注射CpGODN)减虫率为13%、减卵率为3%。rSj97-FA、rSj97-ISA206与rSj97-CpGODN-IFA组在首次免疫后2周,rSj97特异性IgG1与IgG2a水平较免疫前显著升高(P<0.01),攻击感染后仍维持在同一水平;对照组与未免疫对照组,其特异性IgG1水平至感染后6周方显著升高(P<0.01),但仍为较低水平(A值<0.1),而IgG2a一直保持在基线水平,无显著变化。结论重组副肌球蛋白分别与3种佐剂联合使用均能诱导小鼠产生特异性IgG1和IgG2a,但仅ISA206佐剂组诱导C57BL/6小鼠产生显著的抗日本血吸虫保护力,rSj97-ISA206是潜在用于大动物免疫的疫苗组合。
- 孟睿杜晓棠储凯侯敏王荣芝王勇张美娟田芳张媛媛徐进梅季旻珺吴海玮
- 关键词：日本血吸虫佐剂小鼠保护力
- 日本血吸虫(中国大陆株)22.6kDa抗原编码基因的核酸疫苗研究被引量：9
- 1999年
- 为探索日本血吸虫（中国大陆株）２２．６ｋＤａ 抗原（Ｓｊ２２．６）编码基因用作核酸疫苗的可行性，将ｐＣＭＶ／Ｓｊ２２．６基因重组质粒经肌肉注射免疫了一批ＢＡＬＢ／ｃ小鼠并进行攻击感染试验，结果表明此重组质粒能在小鼠体内持续存在、稳定表达并诱导小鼠产生特异性的抗Ｓｊ２２．６ 抗体。
- 苏川马磊王荣芝邵莉君吴海玮沈蕾范乐明陈淑贞张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫核酸疫苗编码基因
- 日本血吸虫22.6kDa重组蛋白对小鼠的免疫保护性研究被引量：19
- 1999年
- 目的:研究日本血吸虫(中国大陆株)22.6 kDa 抗原作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能,并探讨Sj22.6/Sj26 GST 融合蛋白作为复合疫苗的可能性。方法:用亲和层析法制备Sj22.6/Sj26 GST融合蛋白。将这两种蛋白分别免疫BALB/c小鼠后进行攻击感染试验。结果:Sj22.6 重组蛋白和Sj22.6/Sj26 GST 融合蛋白分别可诱导小鼠产生32.1% (P< 0.005) 和34.9% (P< 0.02)的成虫减虫率, 28.4% (P< 0.02)和45.1% (P< 0.005)的总减卵率。结论:rSj22.6 与Sj22.6/Sj26
- 苏川马磊王荣芝胡雪梅陈淑贞邵莉君吴海玮沈蕾张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫免疫保护
- M1 和 M2 对蠕形螨的疗效观察被引量：2
- 1997年
- 运用透明胶纸法对６６９人进行蠕形螨检查。对其中阳性者２６３人分别用Ｍ１霜和Ｍ２霜进行疗效观察。结果表明：Ｍ１霜组和Ｍ２霜组的阴转率分别为４５．７８％和４７．９７％，均高于基质对照组；其副反应发生率接近基质对照组。表明Ｍ１和Ｍ２对面部蠕形螨有一定杀灭或抑制作用，Ｍ２副反应率显著低于Ｍ１，Ｍ２对人体更为安全。
- 倪忠耘王荣芝郭宪国林珍朱昌亮叶炳辉
- 关键词：蠕形螨透明胶纸法护肤霜
- 一例腹泻婴儿粪便内检出圆孢子虫被引量：7
- 1996年
- 近年，国外报道在腹泻病人粪便内发现圆孢子虫（Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒａｃａｙｅｔａｎｅｎｓｉｓ）。它寄生于小肠上皮细胞内，主要引起水样腹泻。其卵囊随粪便排出体外。卵囊圆形，直径８—１０μｍ，内含淡绿色桑椹胚。经抗酸染色法染色后，卵囊呈淡红、深红，有的不着色...
- 韩范王荣芝倪忠耘
- 关键词：腹泻粪便圆孢子虫婴儿
- 全文增补中
- 日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因克隆及特性鉴定被引量：13
- 2000年
- [目的 ]探索研制血吸虫病疫苗的新路径 ,对日本血吸虫线粒体相关蛋白进行基因克隆及特性鉴定。[方法 ]分析本室筛选日本血吸虫成虫cDNA文库获得的 1个cDNA片段 (Sj338 2 4)的开读框序列 ,在其上下游分别设计引物A和B ,并以该cDNA片段为模板进行PCR扩增后 ,将该片段重组于pGEM T中并进行DNA测序鉴定及检索。再经酶切后将该基因片段亚克隆入表达载体pGEX 6P 1,并进行蛋白表达、纯化及抗原性鉴定。 [结果 ]该目的基因PCR产物全长共 487bp ,其开读框由 45 9bp组成 ,编码 15 3个氨基酸经残基组成的多肽。DNA序列同源性分析发现Sj338克隆基因与人及褐鼠的线粒体外膜蛋白的部分编码基因较高度同源。重组质粒pPEX 6P 1 Sj338能高效融合表达 ,理论蛋白的分子量为 17kDa。SDS PAGE和Westernblotting检测结果表明 ,重组蛋白rSj338具有良好的抗原性。 [结论 ]Sj338可能为日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因 ,重组蛋白有望成为新的疫苗候选分子。
- 胡雪梅吴海玮张兆松苏川赵巍沈蕾王荣芝马磊周吉礼陈淑贞吴观陵
- 关键词：日本血吸虫线粒体基因克隆线粒体相关蛋白
- 日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因克隆及特性鉴定
- 2000年
- 目的为探索血吸虫病疫苗的新路径,对日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因克隆及特性鉴定。方法分析本室筛选日本血吸虫成虫cDNA文库获得的一cDNA片段(Sj338/24)的开读框序列,在其上下游分别设计引物A和B,并以该cDNA片段为模板进行PCR扩增后将该片段重组于pGEM-T中并进行DNA测序鉴定及检索。再经酶切后将该基因片段亚克隆入表达载体pGEX-6P-1,并进行蛋白表达、纯化及抗原性鉴定。结果该目的基因PCR产物全长共487bp,其开读框由459bp组成,编码153个氨基酸残基组成的多肽。DNA序列同源性分析发现,Sj338克隆基因与人及褐鼠的线粒体外膜蛋白的部分编码基因较高度同源。重组质料pPEX-6P-1/Sj338能高效融合表达,融合蛋白的分子量为43kDa。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,重组蛋白rSj338具有良好的抗原性。结论·Sj338可能为日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因,重组蛋白有望成为新的疫苗侯选分子。
- 胡雪梅吴海玮张兆松苏川赵巍沈蕾王荣芝马磊周吉礼陈淑贞吴观陵
- 关键词：日本血吸虫线粒体基因克隆重组抗原线粒体相关蛋白
- 日本血吸虫重组抗原基因的高效表达和特性鉴定被引量：8
- 1996年
- 为了获得有效的保护性抗原分子，我们对已构建的日本血吸虫成虫ｃＤＮＡ库的免疫筛选中所获得的阳性克隆λＳｊ５１４的。ＤＮＡ插入片段进行ＰＣＲ扩增，扩增产物亚克隆入高表达载体ｐＧＥＸ－１λｔ，得到高效表达克隆ｐＧＳｊ２４。经诱导表达生产出约２０ｋＤａ的分离表达产物，该特异性蛋白可被日本血吸虫免疫血清、感染兔血清和病人血清特异地识别，而且具有较强的免疫原性，可刺激动物产生较强的抗体反应。
- 张桂筠张兆松陈淑贞沈一平吴海玮苏川王荣芝吴观陵
- 关键词：日本血吸虫基因克隆
- 日本血吸虫(中国大陆株)22.6kDa抗原编码基因在C2C12细胞内的表达被引量：6
- 1999年
- 目的为探索日本血吸虫（中国大陆株）22．6kDa抗原（Sj22．6）编码基因用作核酸疫苗的可行性。方法以PCR法对此编码基因改造后将其亚克隆入真核表达载体质粒PCMV－β并转化入大肠杆菌JM109进行大量扩增。将提纯的PCMV／Sj22．6基因重组质粒在体外转化C2C12真核细胞。结果免疫组化试验证明，该重组质粒能够在体外培养的C2C12细胞中表达Sj22.6抗原。结论表明该重组质粒有用作真核疫苗的可能性。
- 苏川马磊王荣芝张慧范乐明陈淑贞张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫C2C12细胞核酸疫苗编码基因
