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王秀敏

作品数：16 被引量：88H指数：5
供职机构：北京林业大学林学院草坪研究所更多>>
发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 11篇期刊文章
  • 2篇学位论文
  • 2篇会议论文
  • 1篇科技成果

领域

  • 15篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇毒病
  • 5篇蚀纹病
  • 5篇花叶
  • 5篇花叶病
  • 5篇花叶病毒
  • 5篇病毒病
  • 4篇烟草
  • 4篇烟草蚀纹病毒
  • 4篇克隆
  • 3篇烟草病毒
  • 3篇烟草病毒病
  • 3篇原核表达
  • 3篇基因
  • 3篇核表达
  • 3篇甘蔗
  • 3篇甘蔗花叶病
  • 3篇甘蔗花叶病毒
  • 3篇CPTI
  • 2篇毒原
  • 2篇毒原鉴定

机构

  • 13篇西北农林科技...
  • 4篇北京林业大学
  • 1篇中国热带农业...

作者

  • 16篇王秀敏
  • 12篇吴云锋
  • 4篇杨英
  • 4篇韩烈保
  • 4篇车海彦
  • 3篇郝兴安
  • 2篇魏宁生
  • 2篇张建新
  • 1篇杨栋
  • 1篇崔晓峰
  • 1篇王睿
  • 1篇郭明
  • 1篇柳树斌
  • 1篇陈建文
  • 1篇曾会明
  • 1篇林林
  • 1篇梁小波
  • 1篇刘先宝
  • 1篇李卫民
  • 1篇张满良

传媒

  • 5篇西北农业学报
  • 2篇西北农林科技...
  • 1篇烟草科技
  • 1篇植物病理学报
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇中国烟草学报
  • 1篇2009年全...

年份

  • 3篇2009
  • 1篇2008
  • 2篇2007
  • 3篇2006
  • 1篇2005
  • 2篇2004
  • 3篇2003
  • 1篇2002
共 16 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
豇豆蛋白酶抑制剂基因(CpTI)的克隆及其原核表达
豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cowpea TrypsinIn hibitor,CpTI)是一种植源性的抗虫蛋白,它可与昆虫消化道内的蛋白酶相互作用,形成酶-抑制剂复合物(EI),抑制了蛋白酶的消化活性;同时,
王秀敏韩烈保
文献传递
多羟基双萘醛诱导西葫芦抗病中主要酶活性的变化被引量：1
2003年
用植物源病毒抑制剂多羟基双萘醛处理西葫芦后,诱导了西葫芦叶片内过氧化氢酶、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性发生变化;叶片中过氧化氢酶活性受到抑制,酶活性降低30％;药剂处理,叶片中酸溶性胞内和碱溶性胞间几丁质酶活性相对于对照分别提高22.1％和20.1％;碱溶性胞内和酸溶性胞间β-1,3-葡聚糖酶活性相对于对照分别提高17.3％和76.6％。同时发现,叶片胞间可溶性酶活性峰较胞内可溶性酶活性峰出现的时间早;上述的研究结果表明,该药物能启动植物的一系列抗病防御反应,提高植物抵抗病原物侵入的能力。
车海彦吴云锋杨英王秀敏刘先宝
关键词：多羟基双萘醛西葫芦抗病几丁质酶Β-1,3-葡聚糖酶酶活性
豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI)的克隆及其植物表达载体的构建被引量：3
2008年
用CTAB法提取豇豆叶片总DNA后,根据基因两端的保守序列设计引物,经PCR方法扩增得到CpTI基因,将其克隆到pMD-18T载体上,酶切并测序鉴定,将该基因登陆到GeneBank(NO.EU088405)并进行同源性鉴定,证明该基因为丝氨酸蛋白酶抑制剂基因家族中的一员。在此基础上,将CpTI基因用限制性内切酶BamHⅠ/SacⅠ切下后,克隆到pCUbi1303的UBI启动子和NOS终止子之间。经PCR和酶切鉴定,得到了该基因的真核表达载体pCUbiCpTI1303,为下一步的转基因做好了准备。
罗娟王秀敏韩烈保刘君曾会明吴云锋
关键词：克隆植物表达载体
植物源病毒抑制剂WCT-II控制烟草花叶病毒(TMV)的作用机理初探被引量：23
2004年
用植物源病毒抑制物WCT- 直接处理烟草花叶病毒(TMV)病毒粒体,经枯斑半叶法接种和电镜检测发现,处理后的病毒致病力明显下降,病毒粒体大量发生断裂、略变弯曲等畸变现象,WCT- 对TMV的枯斑抑制率为86.6%;WCT- 处理烟草后,其叶片匀浆和胞间液的蛋白经SDS-PAGE不连续电泳发现,处理后的烟草叶片胞间在第5天至第9天和第7天分别存在1条酸溶性蛋白和1条碱溶性蛋白。上述研究结果表明,WCT- 不仅对TMV病毒粒体具有体外钝化作用,而且能诱导植物产生病程相关蛋白,提高烟草抵抗TMV侵染的能力。
车海彦吴云锋杨英夏明星王秀敏
关键词：烟草花叶病毒致病力病程相关蛋白
陕西烟草病毒病毒原鉴定及种群区系分布被引量：19
2005年
2001年在陕西省烟区采集了165个样品,经过生物学测定、血清学反应(琼脂双扩散法和酶联免疫吸附法)和电镜观察,鉴定出5种为害烟草的病毒。其中烟草普通花叶病毒(TMV)34份、烟草蚀纹病毒(TEV)32份、黄瓜花叶病毒(CMV)31份、马铃薯Y病毒(PVY)16份、烟草环斑病毒(TRSV)4份,分别占总标样的20.61%、19.39%、18.79%、9.7%和2.4%。TMV和CMV、TMV和TEV、TMV和PVY复合侵染各为35、2和11份,分别占总标样的21.21%、1.2%和6.67%。TEV和PVY在某些烟区有明显上升的趋势。
王秀敏郝兴安吴云锋成巨龙黎登寨
关键词：烟草病毒病毒原种群分布
陕西套袋苹果黑点病病原鉴定及发生规律研究初报被引量：23
2004年
套袋苹果黑点病是苹果套袋后产生的一种新病害,严重影响苹果品质,近年来在陕西呈逐年加重趋势。通过对其病原学,病害发生与育果袋、套袋方式、田间通风透光条件及用药的关系进行研究,发现其病原为粉红聚端孢霉(TrichotheciumroseumLK.ex.Fr)和链格孢霉(Alternariaspp);使用不同的育果袋(及不使用育果袋),病害发生明显不同;规范套袋方式、改善田间通风透光条件、合理施药可以减轻病害的发生。
郝兴安吴云锋周新民杨英王秀敏柳书斌
关键词：套袋苹果黑点病病原
烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因的克隆及在毕赤酵母中的表达被引量：3
2009年
利用RT-PCR方法获得烟草蚀纹病毒(TEV)外壳蛋白(CP)基因,大小为789bp。经过EcoRI和Not Ⅰ双酶切、定向克隆到pPIC9K,构建了真核表达载体pPIC9K-TEVCP。将重组质粒用Sal I线性化后电转化导入毕赤酵母GS115中,经PCR鉴定为阳性的菌落,利用甲醇进行诱导表达,筛选出了高效表达菌株GS115-11和GS115-14,表达的蛋白大小约为37kD。表达产物经SDS-PAGE割胶纯化后,免疫家兔,制备了特异性抗血清,ELISA法检测效价为1:1500。Western blot结果显示,制备的抗血清可以用来检测田间的发病植株。
王秀敏吴云锋韩烈保
关键词：烟草蚀纹病毒外壳蛋白
烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达被引量：11
2006年
根据烟草蚀纹病毒(TEV)CP序列设计合成上下游引物,利用RT-PCR方法获得了TEV CP基因,大小为789 bp。将TEV CP基因克隆到pM D 18-T S im p le V ector,经E coRⅠ/S acⅠ双酶切得到目的片段,并将其定向插入到pET 30a载体中构建了原核表达载体pET 30-TEV CP,重组质粒经E coRⅠ和S acⅠ双酶切鉴定及基因测序验证正确后,转化大肠杆菌BL 21,用IPTG进行诱导表达。结果表明,TEV CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,分子量约为37 ku。以表达产物为抗原免疫家兔,制备了特异性抗血清,其效价为1/1 204。W estern b lot检测结果表明,制备的抗血清可用于检测田间的发病植株。
王秀敏吴云锋成巨龙张建新杨栋罗朝鹏
关键词：烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因原核表达抗血清
豇豆蛋白酶抑制剂基因(CpTI)的克隆及其原核表达
本实验在国内外研究的基础上，扩增了豇豆蛋白酶抑制剂基因的全序列并进行了原核表达，为进一步验证该基因的功能以及探索它在转基因曹稽中的抗虫性奠定了研究基础。
王秀敏韩烈保
关键词：原核表达基因功能抗虫性
文献传递
西瓜花叶病毒HC-Pro基因在毕赤酵母中的分泌表达与功能研究被引量：2
2007年
利用RT-PCR方法扩增出西瓜花叶病毒HC-Pro的基因,长度为1371bp,并构建了真核表达质粒pPIC9K-WHC。将重组质粒经SalⅠ单酶切后电转化Pichia pastoris GS115菌株,经PCR鉴定与G418、MD和MM培养基筛选,获得Mut+/His+表型高拷贝转化子。经1%甲醇诱导5d后,SDS-PAGE检测发酵液上清,在66kD处有一特异蛋白条带表达。Western blot鉴定表明,表达蛋白可以和HC-Pro蛋白抗血清发生结合反应。Far-Western blot证明该蛋白能与西瓜花叶病毒CP蛋白结合,支持了HC-Pro蛋白协助传毒的"桥梁"学说。
张建新吴云锋王秀敏
关键词：西瓜花叶病毒毕赤酵母真核表达
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