王真瑜
- 作品数：47 被引量：260H指数：10
- 供职机构：上海市预防医学研究院更多>>
- 发文基金：上海市卫生局科研基金上海市“科技创新行动计划”项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 间日疟原虫和恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因的序列和重组抗原表位分析被引量：9
- 2010年
- 目的对间日疟原虫和恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDH)基因的序列及重组抗原的表位进行比较分析。方法根据GenBank中已知的pLDH基因序列(登录号为DQ198262和DQ060151)设计特异性引物,体外扩增间日疟原虫和恶性疟原虫LDH的全长基因,对两序列进行比对分析,用SYFPEITHI软件进行表位预测分析。将Pv-LDH和Pf-LDH基因克隆入pET28a表达载体,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)株,加入异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Westernblotting和中和ELISA法鉴定重组蛋白。结果Pv-LDH和Pf-LDH基因的编码区全长均为951bp,编码316个氨基酸,Pf-LDH与参考序列DQ198262完全一致,而Pv-LDH与参考序列DQ060151仅在第666位有一个核苷酸的变异;两者的核苷酸和氨基酸序列的一致性分别为75.1%和90.2%。T细胞表位预测分析结果显示,能识别pLDH抗原表位的人类白细胞抗原(HLA)分子类型共28种,预测的表位数约为180个,相同或相似的表位约占总表位数的75%,Pv-LDH和Pf-LDH特异性表位分别为38个和45个。Westernblotting分析显示,Pv-LDH重组抗原可被疟疾患者血清识别,但反应强度明显低于Pv-LDH重组抗原免疫兔血清。中和ELISA试验结果显示,Pv-LDH抗原对多克隆抗体最高抑制率可达70.3%,而Pf-LDH抗原的最高抑制率仅为30.5%。结论Pv-LDH和Pf-LDH基因的核苷酸序列及其重组抗原均有差异,特异性表位诱导的抗体在整个抗体谱中相对较少。
- 江莉王真瑜马晓疆张小萍蔡黎
- 关键词：间日疟原虫恶性疟原虫乳酸脱氢酶抗原表位
- 2015-2019年上海市市售食品寄生虫感染监测分析被引量：11
- 2021年
- 目的了解上海市市售食品寄生虫感染状况,为制订食品安全策略提供依据。方法根据城区、郊区结合的原则,2015—2019年对上海市部分农贸市场和超市的市售淡水类水产品、海水类水产品、腌制品类产品、肉类和蔬果类等食品进行抽样,分别采用压片法和消化法检测淡水类水产品和腌制品类产品中的寄生虫囊蚴,解剖镜检法检测海水类水产品中的异尖线虫幼虫,压片法检测肉类中的带绦虫囊尾蚴和旋毛虫幼虫囊包,荧光定量PCR方法检测肉类中弓形虫DNA,漂浮法检测蔬果类中的布氏姜片吸虫囊蚴和其他寄生虫虫卵。结果2015—2019年共检测市售淡水类水产品1125份,检出寄生虫囊蚴阳性9份,阳性率为0.8%。淡水鱼类585份,寄生虫囊蚴(华支睾吸虫)阳性率为1.5%(9/585),淡水鱼类中麦穗鱼的检出率较高(5/8);2015—2019年淡水鱼类阳性率分别为0.7%(1/144)、3.3%(4/121)、1.7%(2/120)、0(0/100)、2.0%(2/100)。淡水虾、蟹540份,未检出并殖吸虫囊蚴。检测海水类水产品35种591份,异尖线虫幼虫阳性率为31.1%(184/591),2015—2019年海水类水产品阳性率分别为36.0%(50/139)、37.1%(49/132)、29.2%(35/120)、39.0%(39/100)和11.0%(11/100)。青占鱼、小黄鱼和带鱼中异尖线虫幼虫的阳性率分别为72.5%(37/51)、70.1%(61/87)和50.0%(52/104),高于其他海鱼的19.1%(34/178)(χ^(2)=33.9、48.3、13.2,P<0.01)。检测腌制类样品443份,其中272份黄泥螺腌制品中查见棘口吸虫囊蚴,阳性率为61.4%(272/443),所有腌制类样品均未查见并殖吸虫囊蚴。检测猪、牛、羊、鸡、鸭等肉类样品253份,未检出猪带绦虫、牛带绦虫囊尾蚴,旋毛虫幼虫囊包和刚地弓形虫。检测蔬菜和可生食蔬果30份,均未检出布氏姜片吸虫囊蚴和其他寄生虫虫卵。结论2015—2019年上海市市售淡水类水产品、海水类水产品、腌制品类产品中存在有不同程度的寄生虫感染。
- 王真瑜吴寰宇江莉马晓疆张耀光何艳燕朱倩
- 关键词：市售食品
- 疟疾巢式PCR检测方法的优化应用被引量：4
- 2017年
- 目的结合疟疾检测工作实际,对疟疾基因检测的巢式PCR方法进行优化应用,以提高疟疾检测效率。方法通过采用PCR预混液、内引物一步扩增、重新设计针对卵形疟多个亚种的新引物,在疟疾巢式PCR的基础对反应体系、反应条件和卵形疟原虫特异性引物进行优化。对优化后的方法进行特异性和敏感性分析,并用巢式PCR和优化后的方法同时对疟疾阳性血样和疟疾送检血样进行检测,对检测结果进行比较分析。结果优化后的方法特异性较好,敏感性可达pg至fg级。两种方法同时检测疟疾阳性血样的结果表明,优化后的方法PCR扩增产物的产量无明显变化,非特异性扩增明显减少,卵形疟不同亚种的检出率提高,总体特异性提高。对111份疟疾送检血样的实测结果表明,巢式PCR的敏感性和虫种特异性分别为94.57%和86.96%,优化后方法的敏感性和虫种特异性均为93.48%,两种方法敏感性差异无统计学意义(P>0.05),但优化后的方法特异性明显提高(P<0.05)。结论优化后的PCR检测在保持常规巢式PCR方法敏感性的基础上提高了特异性,同时因其实验环节减少而节省了检测成本、提高了检测效率。
- 张耀光江莉王真瑜蔡黎
- 关键词：疟疾巢式PCR敏感性特异性
- 2012-2015年上海市实验室疟疾检测能力比较分析被引量：8
- 2017年
- 目的比较疟原虫镜检、抗原快速检测(RDT)和核酸检测(PCR)3种方法在上海市级和区县级疾病预防控制中心(疾控中心)的应用情况,对该市疟疾实验室检测能力进行分析。方法由上海市疾控中心收集2012-2015年上海市疟疾病例和疑似疟疾病例的血涂片、全血血样、病例复核确认记录单和上海市疟疾病例疫情资料,并对检测结果进行比较分析。结果 2012-2015年,上海市各区县共送检数据完整的样本212份,各区县中以金山区送样量最多(41.98%),报告医院以三级医院送样量最多(82.07%);1-10月间送检样本量逐渐增多。市疾控中心对212份血样均采用显微镜检、RDT和PCR 3种方法同时进行检测,综合判定疟疾确诊样本共计167份(78.77%),阴性样本45份(21.23%)。区县级实验室使用显微镜检和国产RDT对样本进行检测,判定疟疾阳性样本153份(72.17%),其中阳性未分型41份(19.34%),阴性样本53份(25.00%),未检测6份(2.83%)。报告医院与区县疾控中心镜检符合率为78.16%,区县疾控中心与市疾控中心镜检符合率为93.20%;区县级实验室RDT使用率为73.58%,国产RDT检测和市疾控中心进口RDT检测的符合率为93.59%。以市疾控中心检测结果作为标准,区县级实验室误判37份。99.37%的疟疾确诊病例为境外输入,包括非洲(85.44%)、亚洲(13.92%)和美洲(0.63%)。结论上海市消除疟疾后的监测工作应结合多种检测方法,整合资源开展。
- 王真瑜江莉张耀光朱民张小萍马晓疆朱倩何燕艳蒋守富蔡黎
- 关键词：疟疾镜检PCR输入病例
- 微环境对诱蚊诱卵器监测媒介伊蚊效果的影响因素研究被引量：1
- 2022年
- 为规范诱蚊诱卵器监测媒介伊蚊工作,2020年7月21日至9月29日在上海市徐汇区某科教园区内开展微环境对诱蚊诱卵器监测的影响因素研究。在研究区域内设置132个监测点位,每个点位布放1个诱蚊诱卵器,布放7 d后于第8天回收并再布放1个新诱蚊诱卵器,连续监测10次,记录监测点位上方乔木遮罩、周围2 m内道路或建筑物、诱蚊诱卵器瓶盖圆孔被草叶或树叶等物体覆盖、瓶内水增加、瓶内钻入其他虫类、瓶内落入异物等影响因素。结果显示,共回收有效诱蚊诱卵器1308个,其中阳性428个,平均阳性率为32.72%;布放在草丛、灌木丛或空地点位的诱蚊诱卵器阳性率分别为29.30%、37.17%和27.54%;上方有乔木遮罩点位的诱蚊诱卵器阳性率(35.62%)高于无乔木遮罩(23.10%);周围2 m内无道路及在东、南、西和北方有道路点位的诱蚊诱卵器阳性率分别为47.14%、31.47%、27.17%、40.74%和28.27%;周围2 m内无建筑及在东、南、西和北方有建筑点位的诱蚊诱卵器阳性率分别为37.99%、30.90%、19.47%、40.63%和28.99%;瓶盖无草叶等覆盖、半覆盖和全覆盖的点位的诱蚊诱卵器阳性率分别为35.22%、30.83%和20.00%;瓶内水未增多的诱蚊诱卵器阳性率(34.55%)高于瓶内水增多的阳性率(21.62%);瓶内无虫的诱蚊诱卵器阳性率(39.02%)高于瓶内有虫的阳性率(30.81%);Probit概率单位回归模型拟合显示点位上方无乔木遮罩、在道路东面或南面、瓶盖被全覆盖物和瓶内水增多,都是导致诱蚊诱卵器阳性率显著降低的因素(均P<0.05)。结果表明,诱蚊诱卵器布放点位上方无乔木遮罩、在道路的东面2 m处、在道路的南面2 m处、瓶盖被全覆盖和瓶内水增多,都是诱蚊诱卵器阳性率降低的主要影响因素。
- 朱伟任志华刘翔宇王真瑜姚隽一雷庆周毅彬
- 关键词：白纹伊蚊微环境诱蚊诱卵器阳性率影响因素
- 上海市消除疟疾后输入性疟疾监测响应系统实施与成效分析
- 2024年
- 目的分析上海市消除疟疾后输入性疟疾监测响应系统的实施和工作成效,为持续维持消除疟疾状态、巩固消除疟疾成果提供科学依据。方法系统收集上海市疟疾监测响应相关的活动方案及其记录,基于国家传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统中2017—2022年疟疾病例个案信息,使用SPSS 25.0软件进行统计学分析。结果2017—2022年上海市共报告疟疾病例281例,包括上海市户籍47例(16.7%,47/281)、外省籍215例(76.5%,215/281)和外籍病例19例(6.8%,19/281),均有境外疟疾流行区旅居史。报告病例均为境外输入性病例,主要来自几内亚(17.4%,49/281)、尼日利亚(14.2%,40/281)、刚果民主共和国(12.1%,34/281)等非洲国家。报告病例以恶性疟(83.3%,234/281)为主,报告地区主要为金山区(15.7%,44/281)、浦东新区(14.9%,42/281)和闵行区(11.7%,33/281)。2017—2022年上海市共血检106361人次,血检阳性率为3.3‰(353/106361),被动监测、人群主动侦查和病例线索追踪的阳性率分别为3.6‰(350/97917)、0.4‰(3/7828)和0(0/616)。病例1 d内网络报告率和1 d内复核率均为100%(281/281),2 d内流行病学调查率为90.0%(253/281),3 d内疫点调查处置率为100%(179/179),1个月内风险评估率为100%(281/281)。病例从发病到确诊时间间隔中位数为2 d(四分位数P25,P75:1 d,4 d)。共捕获传疟媒介按蚊2126只,均为中华按蚊,主要分布于嘉定区(31.6%,672/2126)、崇明区(24.9%,529/2126)等郊区。结论消除疟疾后上海市输入性疟疾监测响应系统运行良好,疫情处理规范、及时。
- 朱民张浩吴立明张宸罡张耀光王真瑜陈健吴寰宇陈昕
- 关键词：疟疾
- 中国大陆淡水鱼华支睾吸虫感染率的meta分析被引量：3
- 2022年
- 目的了解中国大陆淡水鱼华支睾吸虫感染实际水平,为华支睾吸虫病防控和淡水鱼卫生检测提供科学依据。方法以万方数据资源系统、中国期刊全文数据库(CNKI)、PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library等中英文数据库为数据源,检索2010年1月1日至2020年12月31日发表的有关中国大陆淡水鱼华支睾吸虫感染状况的文献,根据纳入和排除标准筛选文献,并进行文献质量评价。利用Stata 15.0软件计算淡水鱼华支睾吸虫合并感染率及其95%可信区间(confidential interval,CI),并对不同地区、不同采样季节、不同来源淡水鱼华支睾吸虫合并感染率进行亚组分析。此外,对所纳入研究的敏感性及发表偏倚进行分析。结果共纳入文献40篇,其中中文文献37篇、英文文献3篇,高质量文献10篇、中等质量文献27篇、低质量文献3篇。40项研究共纳入53种、37 959条淡水鱼,其中39种(占73.58%)淡水鱼感染华支睾吸虫。meta分析结果显示,淡水鱼华支睾吸虫感染率为23.5%[95%CI:(0.19,0.28)];亚组分析结果表明,东北地区淡水鱼华支睾吸虫感染率达35.7%[95%CI:(0.22,0.50)],高于华中地区[25.9%,95%CI:(0.04,0.48)]和华南地区[20.6%,95%CI:(0.09,0.32)];春季采样的淡水鱼样本华支睾吸虫感染率为44.1%[95%CI:(0.35,0.53)],高于秋季[6.7%,95%CI:(0.05,0.08)]和夏季[3.3%,95%CI:(-0.01,0.07)];来源于自然水体的淡水鱼华支睾吸虫感染率为25.2%[95%CI:(0.17,0.33)],高于来源于零售环节[22.2%,95%CI:(0.17,0.28)]和养殖环节[12.3%,95%CI:(0.03,0.22)]的淡水鱼。所纳入文献敏感性较低,存在发表偏倚。结论中国大陆淡水鱼华支睾吸虫感染率较高,华支睾吸虫病防控任务依然艰巨,需要加强健康教育、诊断技术开发和食品安全监管等方面工作。
- 戴思敏余晴马晓疆王真瑜张耀光朱民张宸罡朱倩江莉靳艳军潘浩吴寰宇
- 关键词：华支睾吸虫淡水鱼第二中间宿主META分析
- 2015—2019年上海市常见致腹泻性寄生原虫感染调查分析被引量：1
- 2021年
- 为了解上海市人体常见致腹泻性寄生原虫的感染情况,根据市、郊结合的原则,2015—2019年选择上海市长宁、虹口、闵行、嘉定和浦东新区等5个区各1~2家综合性医院,采集监测点医院就诊的腹泻患者(24 h内大便次数3次以上,粪便性状改变者)粪样,分别采用生理盐水涂片法、碘液染色法和抗酸染色法,以及粪抗原免疫层析法检测溶组织内阿米巴原虫、蓝氏贾第鞭毛虫、隐孢子虫,分析原虫感染情况。结果显示,2015—2019年共采集并检测腹泻患者粪样6984份,病原学检测检出寄生原虫阳性9份,总阳性率为0.13%(9/6984)。其中检出溶组织内阿米巴原虫、蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫阳性分别为4、2和3例。各年度阳性率分别为0.08%(1/1207)、0.40%(5/1254)、0.13%(2/1506)、0(0/1509)和0.07%(1/1508)。6984名腹泻患者中,以30~40岁年龄组较多,检出4例;男性和女性分别检出4例和5例;长宁区、虹口区、闵行区、嘉定区分别检出2、2、2、3例,浦东新区未检出阳性者。采用原虫粪抗原快速检测试剂检出阳性31份,总阳性率为0.44%(31/6984),与病原学检测方法检出的总阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=12.13,P<0.01)。提示上海市寄生原虫阳性率保持在较低水平,处于低感染或零星散在感染状态。应继续开展健康宣教,加强连续有效的监测;并采用病原、免疫和分子生物学联合检测方法提高检出率。
- 王真瑜张耀光马晓疆江莉何艳燕朱倩潘浩
- 关键词：腹泻寄生原虫
- 细粒棘球蚴抗原B亚单位多表位重组抗原的血清学诊断评价
- 2013年
- 目的对6个细粒棘球蚴抗原B(AgB)亚单位多表位重组抗原和3个AgB亚单位抗原进行血清学平行比较分析,评价多表位抗原的诊断价值。方法在多表位重组抗原MEA-26中插入一段Linker序列,成为MEA-49抗原。用I-TASSER在线服务器模拟分析蛋白质三维结构,比较2个目标序列相同但三维结构不同的重组抗原(MEA-26和MEA-49)在样品检测中反应性的差异。用间接ELISA方法对6个多表位抗原(MEA-8、MEA-20、MEA-26、MEA-36、MEA-49和MEA-52)、3个亚单位抗原(AgB1、AgB2和AgB4)和2个对照抗原(Trx和Linker)平行检测232份血清样品(细粒棘球蚴病患者血清112份、多房棘球蚴病患者血清35份、囊尾蚴病患者血清43份和健康人血清42份),并用ROC曲线分析不同抗原对细粒棘球蚴病患者血清的诊断价值。结果三维模型预测结果显示,MEA-26的表位区域相互靠近,呈平行排列;MEA-49表位区域相互分离形成独立的结构域。用MEA-49抗原检测细粒棘球蚴病患者血清的反应性(2.88±2.02)、敏感性(92%)和诊断效率(89%)等均高于MEA-26抗原(2.54±2.02,78%,82%)。ELISA结果显示,MEA-20(2.24±1.31)、MEA-26(2.54±2.02)、MEA-36(2.44±1.51)、MEA-49(2.88±2.02)和MEA-52(2.50±1.37)等5个抗原检测细粒棘球蚴病患者血清的反应性均高于AgB1抗原(2.15±1.26)。多表位抗原检测多房棘球蚴病患者血清的反应性与AgB1抗原的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MEA-52抗原检测囊尾蚴病患者血清(1.27±0.70)的反应性显著高于AgB1抗原(0.95±0.13)(P<0.01)。6个多表位抗原检测健康人血清的反应性仅MEA-8抗原的反应性(1.04±0.15)与AgB1抗原(0.89±0.07)差异有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线结果显示,3个亚单位抗原检测细粒棘球蚴病患者血清的敏感性以AgB1抗原最高,为77%;MEA-49(92%)、MEA-36(92%)、MEA-52(87%)和MEA-26(78%)等4个多表位抗原的检测敏感性均高于AgB1抗原。结论多表位抗原的总体反应性优于亚单位抗原,MEA-49�
- 江莉冯正张耀光王真瑜
- 关键词：细粒棘球蚴血清学分析
- 两种检测方法应用于城市水源中蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫污染的比较研究被引量：1
- 2015年
- 目的用PCR和免疫荧光染色镜检法检测城市现场水源中蓝氏贾第鞭毛虫（简称贾第虫）和隐孢子虫．了解上海市水源地贾第虫和隐孢子虫污染状况。方法采集上海市8个区的自来水和3个区的环境水，PCR检测水样本中的贾第虫磷酸丙糖异构酶（triosephosphate isomerase，Tim）基因和隐孢子虫18S rRNA的基因；按《生活饮用水标准检验方法》（GB5750．12-2006）Filta-Max Xpress快速方法进行免疫荧光染色镜检。计算比较两种方法检测贾第虫和隐孢子虫的阳性率。结果共采集200份水样：其中自来水出厂水48份．PCR和荧光镜检法均未检出贾第虫和隐孢子虫；检测原水、动物饲养场周边池水、污水处理厂出水、游泳池水和餐馆养渔池等水样分别为62、25、29、20、16份，PCR法贾第虫阳性率分别为8．1％、36．0％、17．2％、0和0．总阳性率为12．5％；隐孢子虫阳性率分别为6．5％、40．0％、13．8％、0和0，总阳性率为11．8％。免疫荧光染色镜检法贾第虫阳性率分别为9．7％、40．0％、24．1％、0和0，总阳性率为15．1％；隐孢子虫阳性率分别为8．1％、44．0％、17．2％、0和0．总阳性率为13．8％。两种方法检测贾第虫和隐孢子虫一致性分别为96．1％和95.4％，经Kappa检验．两种方法一致性较好（Kappa=0．83和0．79，Kappa〉0．75），PCR与荧光镜检结果无显著性差异（χ^2=0．44和0．26．P〈0．05）。结论两种方法均可用于城市现场水源中贾第虫和隐孢子虫污染的调查。自来水未检出贾第虫和隐孢子虫．但在原水和环境水中检测到贾第虫和隐孢子虫污染，需加强监测。
- 张小萍朱倩蒋守富江莉何艳燕张耀光王真瑜
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫隐孢子虫包囊卵囊水样
