王玉东 作品数:145 被引量:752 H指数:16 供职机构: 中国动物卫生与流行病学中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 留学人员科技活动项目择优资助经费 霍英东教育基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 经济管理 轻工技术与工程 更多>>
山东地区大肠杆菌的耐药性及分子分型研究 被引量:14 2015年 目的 了解山东地区肉鸡养殖环节大肠杆菌的分布情况,初步揭示山东地区大肠杆菌分离株的耐药性及分子流行规律和特征,为该菌的分子溯源及风险评估提供依据。方法 选取山东地区2000—2012年肉鸡养殖场分离的42株大肠杆菌为研究对象,用13种抗菌药物进行药物敏感性试验,选用脉冲场凝胶电泳(PFGE)及多位点序列分型(MLST)两种分型方法对菌株进行分析。结果 PFGE方法可分为34个带型,菌株之间的相似系数为60%~100%,带型比较分散,未发现绝对优势的带型;MLST方法得到18个序列型(ST),菌株的7个管家基因均有不同程度的变异;耐药性结果显示,42株菌均为多重耐药,对氨苄西林(AM)、复方新诺明(SXT)和氧氟沙星(NOR)的耐药率较高,分别为97.62%、92.86%和90.48%。结论 山东省部分地区肉鸡养殖场中大肠杆菌耐药谱较广,耐药现象比较严重,菌株基因呈多态性,菌株分布具有一定的时间性和地区性。 盖文燕 王娟 曲志娜 王君玮 黄秀梅 王玉东 赵思俊 洪军关键词:大肠杆菌 耐药性 脉冲场凝胶电泳 多位点序列分型 食源性致病菌 山东地区生猪屠宰环节沙门菌毒力基因携带状况分析 被引量:1 2015年 为了了解山东地区生猪屠宰环节沙门菌毒力基因携带状况,为进一步开展沙门菌风险评估提供基础数据。采集山东地区5个不同生猪屠宰场样品1 000份,分离沙门菌,鉴定血清型,并对mogA、sseL、spvC、spvR、hisJ、fliC等6种毒力基因进行PCR检测。结果共分离得到沙门菌菌株188株,分离率为18.8%。鉴定出9种血清型,以德尔卑沙门菌(S.derby)、鼠伤寒沙门菌(S.typhimurium)、汤卜逊沙门菌(S.thompson)为主。上述6种毒力基因均有检出,其中,mogA检出率为76.70%,hisJ检出率为62.77%,两种毒力质粒spvR、spvC的检出率较低,仅分别为3.19%和1.06%,且同时含有多种毒力基因的沙门菌菌株较少。不同地区屠宰场毒力基因携带状况存在较大差异。表明山东地区生猪屠宰环节沙门菌毒力基因携带状况不同,沙门菌污染较严重,应采取措施降低生猪屠宰中沙门菌的污染,减少食物中毒事件。 刘鲜鲜 王娟 张倩 赵建梅 曲志娜 王玉东 孙佳怡 黄秀梅 邹明 王君玮关键词:屠宰 沙门菌 毒力基因 鸡的亚临床型法氏囊病与小肠球虫混合感染的诊治 2003年 车京波 杨玫 王玉东 王娟关键词:小肠球虫 IBD 流行病学 临床症状 剖检 抗PRRSVGP5和M蛋白独特型抗体替代抗原诱导机体产生中和抗体的研究 被引量:1 2007年 制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗独特型抗体(Ab2),探讨Ab2替代抗原对机体免疫调节作用的研究。用纯化的PRRSV-GP5(GP5-Ab1)蛋白和抗PRRSV-M(M-Ab1)蛋白单抗免疫大白兔,当免疫血清琼扩效价达1:16以上,加强免疫后心脏采血分离血清,分别纯化兔抗PRRSV-GP5IgG(GP5-Ab2)和抗PRRSV-MIgG(M-Ab2)血清,分别用GP5-Ab2、M-Ab2以及GP5-Ab2与M-Ab2混合型三种分别免疫未免PRRS疫苗的小猪,同时设PRRS弱毒苗、灭活苗和空白组作对照,免疫后21d采集猪血清,间接ELISA检测免疫Ab2和PRRS疫苗的猪血清全为阳性,空白组仍然为阴性。经细胞中和试验证明免疫Ab2及PRRS疫苗的猪血清都具有中和抗体,说明Ab2在体内具有替代PRRSV的作用诱导机体产生具有中和效应的中和抗体,从而起到保护机体免受PRRSV的感染作用,为猪繁殖与呼吸综合征病新型疫苗的研究提供了新的思路。 周作红 管远红 龚振华 李葳 刘俊辉 王玉东 郭福生 郑增忍 蒋正军关键词:PRRSV PRRS 独特型抗体 中和抗体 市售猪肉中沙门氏菌耐药基因与毒力基因筛查及PFGE分型研究 被引量:11 2018年 为了解市售猪肉中沙门氏菌耐药基因和毒力基因携带状况,以及PFGE分子分型情况,用PCR方法对分离的22株沙门氏菌携带的耐药基因和毒力基因进行检测,并运用XbaⅠ酶进行酶切后完成PFGE分析,再利用BioNumerics软件对分离菌株的指纹图谱进行聚类分析。结果显示:分离菌株对氨苄西林的耐药性最严重,耐药率为72.73%,其次是对氟苯尼考,耐药率为68.18%;在10种耐药基因检测中,共检出9种;除喹诺酮类药物外,分离菌株耐药基因与耐药表型的符合率为95%,其中88%的分离菌株携带酰胺醇类耐药基因(catI)和β-内酰胺类耐药基因(blatem-1/blapsE-1/blaCMY-1/blaoxA-1)。在14种毒力基因检测中,共检出13种;所有分离菌株均携带mgt C和bcfA毒力基因,其次是mogA、araB、stn、fimA毒力基因,携带率均为95.45%;22株沙门氏菌共分为10个群,包括8个带型,菌株相似度为60%~100%。结果表明:市售猪肉中的沙门氏菌携带多种耐药基因和毒力基因,须采取措施防止沙门氏菌污染猪肉产品。 黄秀梅 盖文燕 曲志娜 赵思俊 李月华 王玉东 王君玮 王娟关键词:沙门氏菌 耐药基因 毒力基因 PFGE分型 盐酸头孢噻呋注射液在鸡体内的药物代谢动力学研究 被引量:1 2022年 为了比较美国盐酸头孢噻呋、中国大中农盐酸头孢噻呋与中国山东某生物科技公司新研制的盐酸头孢噻呋三种头孢噻呋注射液在白羽鸡血浆中的药物代谢动力学特征,以检测新研制盐酸头孢噻呋注射液在白羽鸡体内的药物动力学参数变化规律。在给白羽鸡肌肉注射药物后,在0至48小时内于不同时间点采集血样,用碘乙酰胺衍生,把二硫赤鲜醇作为提取液,以水-三氟乙酸-乙腈(700∶1∶300)作为流动相,266 nm紫外检测。标准曲线线性相关很好,相关系数都在0995以上。最低检测限为0.05μg/mL;最低定量限为0.1μg/mL,回收率都在90%以上。日间变异系数小于0.1,日内变异系数小于0.05。结果表明,新研制盐酸头孢噻呋的药物动力学参数符合产品要求。三种剂型达峰时间相同;美国盐酸头孢噻呋和新研制盐酸头孢噻呋的半衰期相似,大中农盐酸头孢噻呋半衰期相对要短,但总体三种剂型的半衰期差异不显著;新研制的盐酸头孢噻呋最高血药浓度比美国盐酸头孢噻呋和大中农盐酸头孢噻呋相对高些,美国盐酸头孢噻呋和大中农盐酸头孢噻呋最高血药浓度相当,但总体三种剂型的血药浓度半衰期差异不显著。 刘坤 王淑婷 田丽华 王玉东 宋翠平关键词:高效液相色谱 药物动力学 羊屠宰环节布鲁氏菌病检疫漏检的初步定量风险评估 被引量:2 2017年 [目的 ]评估屠宰环节布鲁氏菌病漏检对屠宰从业人员和消费环节羊肉消费者的潜在健康风险及其干预措施。[方法 ]利用屠宰环节肉品风险评估专项监测中的定量监测数据,以及文献检索数据、专家咨询和调研结果,采用@RISK软件,分析估计屠宰环节布鲁氏菌病检疫漏检情况下的感染人数和消费者因烹调不当发生布鲁氏菌感染的风险。[结果 ]构建了屠宰环节布鲁氏菌病漏检感染风险模型。假设接触漏检羊感染布鲁氏菌病的概率为20%,那么0.001%、0.08%、1.5%三种漏检概率可能导致的感染人数分别为0~4人、0~114人和7~1 829人(90%置信区间);不同接触感染概率的感染人数有较大差异:5%概率时每年有0~541人可能感染布鲁氏菌病;60%概率时,多数情况下有155人感染布鲁氏菌病,最多可达到6 473人。应用该模型对某省居民消费漏检布鲁氏菌病羊肉后新增布鲁氏菌病感染人数的估算结果表明:按照0.1%概率计算,该省2016年度屠宰313.25万只羊可能新增布鲁氏菌病感染病例111~148例(90%置信区间)。如果因厨房生熟不分、烹调不当等因素而使感染概率提高至1%,则可能出现1 234~1 352个新增病例。[结论 ]羊屠宰环节存在布鲁氏菌病检疫漏检现象,从业人员受布鲁氏菌病感染风险较高;消费环节存在因烹调不当而导致的布鲁氏菌病感染风险;应加强养殖环节羊群布鲁氏菌病的控制和宰前检疫,提升从业人员和消费者对布鲁氏菌病危害的认知水平。 王君玮 赵格 雷宇平 熊仲良 盖文燕 谢建华 王治维 李岩 王玉东 王娟关键词:布鲁氏菌病 风险评估 鸡传染性支气管炎弱毒苗Ma5株对肉仔鸡免疫效果观察 1997年 鸡传染性支气管炎弱毒苗Ma5株对肉仔鸡免疫效果观察王永玲吴延功蒋贻海张子春王玉东(农业部动物检疫所266032)俞志涛陈捍卫(山东农业大学)目前,用于我国鸡传染性支气管炎(IB)免疫预防的疫苗主要是弱毒疫苗,市场上较多见的为H120和H52弱毒苗,但... 王永玲 吴延功 蒋贻海 张子春 王玉东 俞志涛 陈捍卫关键词:肉用鸡 仔鸡 传染性支气管炎 鸡腺胃型传染性支气管炎病毒山东分离株S基因的克隆及序列分析 被引量:3 2015年 为研究3株鸡腺胃型传染性支气管炎病毒(IBV)山东分离株(青岛腺胃株QX株、东营腺胃株DY株、肥城腺胃株FC株)病毒纤突蛋白基因(S基因)的核苷酸特征,与呼吸型M41标准株及肾型IBV进行S基因核苷酸进行同源性比较。采用RT-PCR技术方法,对IBV分离株(QX、DY、FC)及标准毒株M41株S基因进行克隆和序列测定,对其中QX和DY株S基因核苷酸分别用3种方法(Clustal V method、Jotun Hein method和Clustal W method)对获得的基因核苷酸序列进行分析。结果显示,QX株和DY株的S基因核苷酸与标准毒株M41株S基因核苷酸的同源性最高为79.3%和79.2%,最小差异性为24.5%和22.3%。QX株和DY株与肾型IB分离株HD同源性最高为78.4%和78.9%,最小差异性均为22.7%。HD株与M41株的同源性最高达到80.8%。通过对S基因进化关系分析,说明腺胃型IBV山东分离株(QX、DY株)与呼吸型和肾型IBV是引起不同组织嗜性的IBV变异株,与呼吸型IBV和肾型IBV有明显的差异,是在IBV遗传变异进化过程中具有重要地位的进化阶段。 王玉东 刘俊辉 郑增忍 王君玮 王永玲 王晓燕 王树双 牛钟相关键词:传染性支气管炎病毒 腺胃型 S基因 白菜中三乙膦酸铝不同提取方法的比较研究 被引量:1 2021年 目的:通过比较白菜中三乙膦酸铝的不同测试方法,来确定一种准确高效的检测三乙膦酸铝的方案。方法:抽取21份白菜样品,通过比较水、乙腈、甲醇三种试剂,采用不同提取时间和均质提取法、超声提取法、振荡提取法三种方法,得到的三乙膦酸铝的检测结果,来确定一种最优的测试方案。结论:以水作为提取溶剂,进行振荡提取20min的方法检测蔬菜中三乙膦酸铝,该方法检出限达到0.01mg/kg,定量限可以达到0.025mg/kg,回收率81.3%~89.4%,可以达到较好的测试结果。通过试验验证,该方法同时适用于其他植物源性的食品测试。 张晓梅 黄翠玲 张鸿伟 郗富奎 吕明春 王全红 王渤 宋翠平 王玉东 王磊磊关键词:三乙膦酸铝 超声提取法